| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 1 引言 | 第7-19页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征概述 | 第7-19页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征的基本特征 | 第7-11页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征的流行病学 | 第11-12页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征的临床症状 | 第12-13页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征的病理变化 | 第13页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征的诊断 | 第13-15页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征的防治 | 第15-16页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征疫苗研究进展 | 第16-19页 |
| ·本论文研究的依据及意义 | 第19页 |
| 2 试验一猪繁殖与呼吸综合征病毒N 基因的克隆与原核表达 | 第19-31页 |
| ·材料 | 第19-22页 |
| ·病料和宿主菌 | 第19-20页 |
| ·质粒载体 | 第20页 |
| ·工具酶和主要商品试剂 | 第20页 |
| ·培养基和主要试剂配制 | 第20-22页 |
| ·主要仪器设备 | 第22页 |
| ·方法 | 第22-28页 |
| ·PRRSV RNA 的提取 | 第22-23页 |
| ·PRRSV-N 基因RT-RCR 扩增 | 第23页 |
| ·目的片段的回收纯化 | 第23-24页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第24-25页 |
| ·目的片段的克隆 | 第25页 |
| ·阳性克隆的筛选 | 第25页 |
| ·阳性克隆PMD18-T-N 序列测定 | 第25-26页 |
| ·目的基因的原核重组表达载体的构建和鉴定 | 第26-28页 |
| ·重组菌pGEX-4T-1-N 诱导表达 | 第28页 |
| ·表达蛋白的SDS-PAGE 电泳 | 第28页 |
| ·重组蛋白可溶性分析 | 第28页 |
| ·结果 | 第28-31页 |
| ·PRRSV-N 蛋白基因的RT-RCR 扩增结果 | 第28-29页 |
| ·阳性克隆的测序结果 | 第29页 |
| ·重组原核表达载体的筛选与酶切鉴定 | 第29-30页 |
| ·重组菌pGEX-4T-1-N 诱导表达 | 第30-31页 |
| ·重组蛋白可溶性分析 | 第31页 |
| 3 试验二 PRRS 病毒GP5-M 复合基因的克隆与真核表达载体的构建 | 第31-39页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·病料和宿主菌 | 第31页 |
| ·质粒载体 | 第31页 |
| ·工具酶和主要商品试剂 | 第31页 |
| ·培养基和主要试剂配制 | 第31页 |
| ·主要仪器设备 | 第31-32页 |
| ·方法 | 第32-36页 |
| ·PRRSV RNA 的提取 | 第32页 |
| ·PRRSV-GP5-M 复合基因RT-RCR 扩增 | 第32页 |
| ·目的基因的原核重组表达载体的构建和鉴定 | 第32-33页 |
| ·pGEX-4T-1-GP5 基因加入信号肽序列 | 第33-34页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第34-36页 |
| ·结果 | 第36-39页 |
| ·PRRSV-GP5-M 复合基因的RT-RCR 扩增结果 | 第36页 |
| ·菌落PCR 筛选结果 | 第36-37页 |
| ·阳性克隆测序结果 | 第37-38页 |
| ·阳性重组质粒酶切鉴定结果 | 第38页 |
| ·阳性重组质粒pSinRep5-GP5-SEC 测序结果 | 第38-39页 |
| 4 讨论 | 第39-40页 |
| ·有关PRRSV-N 基因的表达 | 第39-40页 |
| ·有关PRRSV-GP5-M 真核表达载体的构建 | 第40页 |
| 5 结论 | 第40-42页 |
| 致谢 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-50页 |
| 作者简介 | 第50页 |
