| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-35页 |
| ·木材的形成过程 | 第13-26页 |
| ·次生维管系统 | 第13-15页 |
| ·细胞程序性死亡 | 第15-23页 |
| ·线粒体与PCD 的关系 | 第23-24页 |
| ·木材形成与PCD 的关系 | 第24-26页 |
| ·酵母双杂交及其应用 | 第26-31页 |
| ·酵母双杂交的基本原理 | 第26-28页 |
| ·酵母双杂交系统的应用 | 第28-31页 |
| ·植物CO 基因研究现状 | 第31-32页 |
| ·本研究的立论依据及研究意义 | 第32-33页 |
| ·本研究的技术路线 | 第33-35页 |
| 第二章 材料与方法 | 第35-55页 |
| ·试验材料及其来源 | 第35-36页 |
| ·植物材料 | 第35页 |
| ·菌株与质粒 | 第35页 |
| ·仪器与试剂 | 第35-36页 |
| ·研究方法 | 第36-55页 |
| ·构建pGBKT7-PtCDD 诱饵蛋白表达载体 | 第36-37页 |
| ·乙酸锂法制备并转化酵母感受态细胞 | 第37-39页 |
| ·诱饵蛋白自激活活性检测 | 第39页 |
| ·诱饵蛋白毒性的验证 | 第39页 |
| ·构建酵母双杂交文库，RNA 提取及mRNA 的分离 | 第39-41页 |
| ·用Oligo(dT)引物合成cDNA 第一链 | 第41页 |
| ·LD-PCR 合成双链cDNA | 第41-42页 |
| ·用BD CHROMA SPIN~(TM) TE-400 柱子进行双链cDNA 的纯化 | 第42-43页 |
| ·共转化法构建酵母双杂交文库 | 第43-44页 |
| ·酵母双杂交文库的筛选 | 第44页 |
| ·阳性克隆相互作用特异性的体内重新鉴定 | 第44-45页 |
| ·凝胶阻滞 | 第45页 |
| ·烟草DNA 的提取 | 第45-46页 |
| ·目的基因扩增 | 第46-47页 |
| ·目的片段的亚克隆 | 第47-49页 |
| ·序列比对 | 第49页 |
| ·Real Time PCR | 第49-50页 |
| ·植物表达载体的构建、鉴定及农杆菌转化 | 第50-53页 |
| ·转基因植株的PCR 检测 | 第53-54页 |
| ·石蜡切片及显微结构观察 | 第54-55页 |
| 第三章 结果与分析 | 第55-73页 |
| ·酵母双杂交文库的构建、筛选及鉴定 | 第55-62页 |
| ·诱饵蛋白表达载体的构建及序列测定 | 第55-56页 |
| ·诱饵蛋白的自激活活性鉴定 | 第56页 |
| ·诱饵蛋白对酵母细胞的生长的毒性检测 | 第56页 |
| ·酵母双杂交cDNA 文库的构建 | 第56-57页 |
| ·酵母双杂交(cDNA 文库的筛选) | 第57-61页 |
| ·凝胶阻滞实验检测 CDD 蛋白与 mtSSU 片段 AD1-10 的相互作用 | 第61-62页 |
| ·PtSZF 基因的扩增、转化及其功能分析 | 第62-73页 |
| ·PtSZF 蛋白cDNA 基因的获得 | 第62-63页 |
| ·PtSZF 蛋白的功能预测 | 第63-64页 |
| ·PtSZF 超量表达载体的构建及鉴定 | 第64-65页 |
| ·表达载体对农杆菌的转化 | 第65-66页 |
| ·重组农杆菌对烟草的转化 | 第66-67页 |
| ·转化植株的PCR 检测 | 第67页 |
| ·Real-time PCR 分析PtSZF 基因的表达量 | 第67-68页 |
| ·转基因植株的表型变化分析 | 第68-73页 |
| 第四章 讨论、结论与展望 | 第73-79页 |
| ·酵母双杂交 | 第73-75页 |
| ·酵母双杂中遇到的问题及解决办法 | 第73-74页 |
| ·PtCDD 基因的功能分析 | 第74-75页 |
| ·PtSZF 基因的调控机制分析 | 第75-78页 |
| ·PtSZF 基因的克隆转化及功能研究 | 第75-76页 |
| ·PtSEP 基因调控机制分析 | 第76-78页 |
| ·结论与展望 | 第78-79页 |
| 参考文献 | 第79-101页 |
| 在读期间的学术研究 | 第101-102页 |
| 致谢 | 第102页 |
