小麦NAC类转录因子的克隆和分子特征研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-22页 |
| ·选题的背景和意义 | 第11页 |
| ·文献综述 | 第11-20页 |
| ·干旱胁迫 | 第12-13页 |
| ·转录因子简介 | 第13-15页 |
| ·NAC 转录因子研究 | 第15-20页 |
| ·实验方法和技术路线 | 第20-22页 |
| ·实验方法 | 第20-21页 |
| ·技术路线 | 第21-22页 |
| 第二章 NAC 基因的克隆及序列分析 | 第22-35页 |
| ·实验材料 | 第22-24页 |
| ·植物材料和菌株 | 第22页 |
| ·克隆载体 | 第22页 |
| ·酶及化学试剂 | 第22页 |
| ·培养基及溶液 | 第22-23页 |
| ·主要设备仪器 | 第23页 |
| ·引物序列 | 第23-24页 |
| ·实验方法 | 第24-27页 |
| ·实验材料处理 | 第24页 |
| ·总RNA 的提取 | 第24-25页 |
| ·cDNA 的合成 | 第25-26页 |
| ·RT-PCR 扩增目的基因 | 第26页 |
| ·PCR 产物的纯化回收 | 第26-27页 |
| ·PCR 产物的克隆测序 | 第27页 |
| ·序列分析 | 第27-29页 |
| ·多序列比对 | 第28页 |
| ·构建系统进化树 | 第28-29页 |
| ·实验结果 | 第29-33页 |
| ·植物组织总RNA 样品质量检测 | 第29页 |
| ·目的基因片段的克隆 | 第29-30页 |
| ·多序列比对和系统进化树 | 第30-33页 |
| ·讨论 | 第33-35页 |
| ·多序列比对结果讨论 | 第33页 |
| ·系统进化树 | 第33-35页 |
| 第三章 TaNAC 基因表达特性分析 | 第35-43页 |
| ·实验材料处理及总RNA 的提取 | 第35页 |
| ·半定量RT-PCR 引物的设计 | 第35-36页 |
| ·NAC 家族成员在不同胁迫条件下的表达特性分析 | 第36页 |
| ·NAC 家族成员组织表达特异性分析 | 第36页 |
| ·实验结果分析 | 第36-40页 |
| ·胁迫处理表达特性分析 | 第36-38页 |
| ·干旱胁迫和ABA 处理下表达趋势的比对 | 第38-39页 |
| ·组织表达特异性分析 | 第39-40页 |
| ·讨论 | 第40-43页 |
| ·三种胁迫处理下的表达趋势 | 第40-41页 |
| ·旱胁迫和外源ABA 条件下的表达关系 | 第41页 |
| ·组织表达特异性 | 第41-43页 |
| 第四章 TaNAC 转录因子亚细胞定位分析 | 第43-51页 |
| ·绿色荧光蛋白(GFP)简介 | 第43-44页 |
| ·实验材料与仪器 | 第44页 |
| ·亚细胞定位所用引物的设计 | 第44页 |
| ·亚细胞定位载体的构建 | 第44-45页 |
| ·载体构建过程 | 第44-45页 |
| ·163GFP 载体结构图谱 | 第45页 |
| ·基因枪法转化洋葱表皮细胞 | 第45-47页 |
| ·洋葱表皮细胞的培养 | 第45-46页 |
| ·金粉制弹 | 第46页 |
| ·基因枪轰击操作流程 | 第46-47页 |
| ·洋葱表皮细胞镜检 | 第47页 |
| ·亚细胞定位结果 | 第47-50页 |
| ·亚细胞定位讨论 | 第50-51页 |
| ·亚细胞定位预测 | 第50页 |
| ·跨膜转录因子 | 第50-51页 |
| 第五章 TaNAC 转录激活活性鉴定 | 第51-59页 |
| ·酵母单杂交系统的原理 | 第51页 |
| ·材料 | 第51-52页 |
| ·菌种和载体 | 第51-52页 |
| ·酶及化学试剂 | 第52页 |
| ·试剂盒 | 第52页 |
| ·引物及测序 | 第52页 |
| ·TaNAC 和PGBKT7 融合表达载体的构建 | 第52-54页 |
| ·转录激活引物设计 | 第52-53页 |
| ·融合表达载体的构建 | 第53-54页 |
| ·酵母感受态细胞的制备和质粒的转化 | 第54-56页 |
| ·所用试剂及配制方法 | 第54-55页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第55页 |
| ·质粒的转化 | 第55-56页 |
| ·β-半乳糖苷酶活性滤膜影印分析 | 第56页 |
| ·实验结果 | 第56-58页 |
| ·转录激活实验讨论 | 第58-59页 |
| 第六章 结论 | 第59-62页 |
| 参考文献 | 第62-69页 |
| 附录 | 第69-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 在读期间发表的学术论文与取得的其他研究成果 | 第71页 |
