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O型口蹄疫病毒P1-2A-3C基因重组腺病毒载体的构建

摘要第1-3页
Summary第3-4页
英文缩略表第4-9页
前言第9-11页
第一部分 文献综述第11-30页
 1 口蹄疫概述第11-12页
 2 FMDV 分子生物学特性研究进展第12-30页
   ·FMDV 基因组结构特点第12-13页
   ·FMDV 5′非翻译区(5′-UTR)第13-16页
     ·蛋白质帽状结构(cap)第13页
     ·FMDV S 片段、poly(C)区、假结(PKs)和顺式复制元件(cre)第13-14页
     ·FMDV 内部核糖体进入位点(IRES)第14-15页
     ·FMDV L 区第15-16页
   ·FMDV 结构蛋白和非结构蛋白第16-20页
     ·FMDV 结构蛋白第16页
     ·FMDV 非结构蛋白第16-19页
       ·FMDV 2A/B/C第17页
       ·FMDV 3A/B第17-18页
       ·FMDV 3C 蛋白酶(3Cpro)第18-19页
       ·FMDV 3D 聚合酶(3Dpol)第19页
     ·FMDV 3′非翻译区第19-20页
   ·口蹄疫病毒的病毒粒子结构特点第20-21页
  3 口蹄疫病毒疫苗的研究进展第21页
   ·传统疫苗第21-23页
     ·弱毒疫苗第21页
     ·灭活疫苗第21-23页
   ·新型疫苗第23-28页
     ·病毒活载体疫苗第23-26页
       ·FMDV 腺病毒重组活载体疫苗第23-25页
       ·FMDV 痘病毒重组活载体疫苗第25-26页
       ·FMDV 疱疹病毒重组活载体疫苗第26页
     ·核酸疫苗第26-27页
     ·合成肽疫苗第27页
     ·转基因植物疫苗第27-28页
  4 总结第28-30页
第二部分 实验研究第30-48页
 1 材料第30-31页
   ·实验材料第30页
   ·仪器与设备第30-31页
   ·实验动物第31页
   ·细胞第31页
 2 方法第31-42页
   ·病毒RNA 的提取第31-32页
   ·口蹄疫P1-2A、3C 重组腺病毒穿梭质粒的构建第32-37页
     ·FMDV P1-2A 和3C 基因的扩增第32-33页
     ·目的基因的纯化与回收第33-34页
     ·目的基因纯化产物与pMD18-T 载体的连接第34页
     ·感受态细胞的制备第34页
     ·感受态细胞的转化第34-35页
     ·挑斑第35页
     ·质粒DNA 的提取第35-36页
     ·阳性重组质粒的鉴定第36-37页
   ·目的片段与穿梭载体pAdTrack-CMV 的连接第37-38页
     ·感受态细菌的制备及连接产物转化第38页
     ·质粒DNA 的提取及重组穿梭载体质粒的鉴定第38页
     ·感受态细菌的制备及连接产物转化第38页
     ·质粒DNA 的提取及重组穿梭载体质粒的鉴定第38页
   ·口蹄疫P1-2A、3C 重组腺病毒质粒的构建第38-41页
     ·骨架载体pAdEasy-1 转化BJ5183 菌第40页
     ·pAdEasy-1 BJ5183 细菌感受态的制备第40页
     ·重组腺病毒质粒的构建第40页
     ·重组腺病毒载体的鉴定第40-41页
     ·用重组腺病毒质粒转化宿主菌DH10B第41页
   ·重组腺病毒遗传稳定性检测及毒价测定第41-42页
     ·脂质体介导的质粒转染HEK293 细胞第41页
     ·重组腺病毒遗传稳定性的检测第41-42页
     ·重组腺病毒毒价的测定第42页
   ·动物试验及抗体水平检测第42页
 3 结果第42-46页
   ·O 型口蹄疫目的基因P1-2A、3C 的扩增和重组腺病毒穿梭质粒的构建第42-44页
   ·重组腺病毒质粒pAd-P12A3C 的鉴定第44页
   ·重组腺病毒遗传稳定性和目的基因表达的检测第44页
   ·重组病毒毒价的测定第44-45页
   ·动物试验及抗体水平检测第45-46页
 4 讨论第46-48页
参考文献第48-55页
致谢第55-56页
作者简介第56-57页
导师简介第57-59页

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