摘要 | 第1-3页 |
Summary | 第3-4页 |
英文缩略表 | 第4-9页 |
前言 | 第9-11页 |
第一部分 文献综述 | 第11-30页 |
1 口蹄疫概述 | 第11-12页 |
2 FMDV 分子生物学特性研究进展 | 第12-30页 |
·FMDV 基因组结构特点 | 第12-13页 |
·FMDV 5′非翻译区(5′-UTR) | 第13-16页 |
·蛋白质帽状结构(cap) | 第13页 |
·FMDV S 片段、poly(C)区、假结(PKs)和顺式复制元件(cre) | 第13-14页 |
·FMDV 内部核糖体进入位点(IRES) | 第14-15页 |
·FMDV L 区 | 第15-16页 |
·FMDV 结构蛋白和非结构蛋白 | 第16-20页 |
·FMDV 结构蛋白 | 第16页 |
·FMDV 非结构蛋白 | 第16-19页 |
·FMDV 2A/B/C | 第17页 |
·FMDV 3A/B | 第17-18页 |
·FMDV 3C 蛋白酶(3Cpro) | 第18-19页 |
·FMDV 3D 聚合酶(3Dpol) | 第19页 |
·FMDV 3′非翻译区 | 第19-20页 |
·口蹄疫病毒的病毒粒子结构特点 | 第20-21页 |
3 口蹄疫病毒疫苗的研究进展 | 第21页 |
·传统疫苗 | 第21-23页 |
·弱毒疫苗 | 第21页 |
·灭活疫苗 | 第21-23页 |
·新型疫苗 | 第23-28页 |
·病毒活载体疫苗 | 第23-26页 |
·FMDV 腺病毒重组活载体疫苗 | 第23-25页 |
·FMDV 痘病毒重组活载体疫苗 | 第25-26页 |
·FMDV 疱疹病毒重组活载体疫苗 | 第26页 |
·核酸疫苗 | 第26-27页 |
·合成肽疫苗 | 第27页 |
·转基因植物疫苗 | 第27-28页 |
4 总结 | 第28-30页 |
第二部分 实验研究 | 第30-48页 |
1 材料 | 第30-31页 |
·实验材料 | 第30页 |
·仪器与设备 | 第30-31页 |
·实验动物 | 第31页 |
·细胞 | 第31页 |
2 方法 | 第31-42页 |
·病毒RNA 的提取 | 第31-32页 |
·口蹄疫P1-2A、3C 重组腺病毒穿梭质粒的构建 | 第32-37页 |
·FMDV P1-2A 和3C 基因的扩增 | 第32-33页 |
·目的基因的纯化与回收 | 第33-34页 |
·目的基因纯化产物与pMD18-T 载体的连接 | 第34页 |
·感受态细胞的制备 | 第34页 |
·感受态细胞的转化 | 第34-35页 |
·挑斑 | 第35页 |
·质粒DNA 的提取 | 第35-36页 |
·阳性重组质粒的鉴定 | 第36-37页 |
·目的片段与穿梭载体pAdTrack-CMV 的连接 | 第37-38页 |
·感受态细菌的制备及连接产物转化 | 第38页 |
·质粒DNA 的提取及重组穿梭载体质粒的鉴定 | 第38页 |
·感受态细菌的制备及连接产物转化 | 第38页 |
·质粒DNA 的提取及重组穿梭载体质粒的鉴定 | 第38页 |
·口蹄疫P1-2A、3C 重组腺病毒质粒的构建 | 第38-41页 |
·骨架载体pAdEasy-1 转化BJ5183 菌 | 第40页 |
·pAdEasy-1 BJ5183 细菌感受态的制备 | 第40页 |
·重组腺病毒质粒的构建 | 第40页 |
·重组腺病毒载体的鉴定 | 第40-41页 |
·用重组腺病毒质粒转化宿主菌DH10B | 第41页 |
·重组腺病毒遗传稳定性检测及毒价测定 | 第41-42页 |
·脂质体介导的质粒转染HEK293 细胞 | 第41页 |
·重组腺病毒遗传稳定性的检测 | 第41-42页 |
·重组腺病毒毒价的测定 | 第42页 |
·动物试验及抗体水平检测 | 第42页 |
3 结果 | 第42-46页 |
·O 型口蹄疫目的基因P1-2A、3C 的扩增和重组腺病毒穿梭质粒的构建 | 第42-44页 |
·重组腺病毒质粒pAd-P12A3C 的鉴定 | 第44页 |
·重组腺病毒遗传稳定性和目的基因表达的检测 | 第44页 |
·重组病毒毒价的测定 | 第44-45页 |
·动物试验及抗体水平检测 | 第45-46页 |
4 讨论 | 第46-48页 |
参考文献 | 第48-55页 |
致谢 | 第55-56页 |
作者简介 | 第56-57页 |
导师简介 | 第57-59页 |