| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-6页 |
| 中文文摘 | 第6-9页 |
| 目录 | 第9-13页 |
| 第一章 绪论 | 第13-33页 |
| 一 多不饱和脂肪酸 | 第13-14页 |
| 二 γ-亚麻酸(GLA) | 第14-19页 |
| ·γ-亚麻酸(GLA)的结构和理化性质 | 第14页 |
| ·γ-亚麻酸的生理、药理学功能 | 第14-19页 |
| ·对血栓形成的抑制作用 | 第14-15页 |
| ·调节脂质代谢 | 第15页 |
| ·降低心律失常发病率 | 第15-16页 |
| ·调节血糖作用 | 第16页 |
| ·抗肿瘤作用 | 第16-17页 |
| ·抗过敏和炎症作用 | 第17-18页 |
| ·对视神经和大脑发育的影响 | 第18-19页 |
| 三 脂肪酸脱饱和酶研究进展 | 第19-26页 |
| ·脂肪酸脱饱和酶概况 | 第19-20页 |
| ·脂肪酸脱饱和酶的结构特点 | 第20-21页 |
| ·各种类型的脂肪酸脱饱和酶 | 第21-26页 |
| ·Δ4-脂肪酸脱饱和酶 | 第21-22页 |
| ·Δ5-脂肪酸脱饱和酶 | 第22-23页 |
| ·Δ6-脂肪酸脱饱和酶 | 第23页 |
| ·Δ9-脂肪酸脱饱和酶 | 第23-25页 |
| ·Δ12-脂肪酸脱饱和酶 | 第25页 |
| ·Δ15-脂肪酸脱饱和酶 | 第25-26页 |
| 四 启动子 | 第26-30页 |
| ·启动子概述 | 第26-29页 |
| ·原核生物启动子 | 第26-27页 |
| ·真核生物启动子 | 第27-29页 |
| ·脂肪酸脱饱和酶启动子 | 第29-30页 |
| 五 本课题的目的和意义 | 第30-33页 |
| ·目的 | 第30-31页 |
| ·意义 | 第31-33页 |
| 第二章 Δ6-脂肪酸脱饱和酶启动子的克隆与序列分析 | 第33-41页 |
| 第一节 前言 | 第33页 |
| 第二节 材料和方法 | 第33-36页 |
| ·材料 | 第33-34页 |
| ·菌株和质粒 | 第33-34页 |
| ·主要试剂和工具酶 | 第34页 |
| ·主要培养基 | 第34页 |
| ·方法 | 第34-36页 |
| ·基因组DNA的提取 | 第34-35页 |
| ·基因组DNA酶切与连接 | 第35页 |
| ·LA-PCR扩增 | 第35-36页 |
| ·测序和序列分析 | 第36页 |
| 第三节 结果与分析 | 第36-39页 |
| ·Mucor sp.EIM-10基因组DNA的提取与酶切 | 第36页 |
| ·Δ6-脂肪酸脱饱和酶基因5'端侧翼区域LA-PCR扩增 | 第36-37页 |
| ·LA-PCR产物的转化与筛选 | 第37-38页 |
| ·LA-PCR产物序列测定与序列分析 | 第38-39页 |
| 第四节 小结与讨论 | 第39-41页 |
| 第三章 Δ6-脂肪酸脱饱和酶启动子的功能鉴定 | 第41-49页 |
| 第一节 前言 | 第41页 |
| 第二节 材料与方法 | 第41-44页 |
| ·材料 | 第41-42页 |
| ·菌株和质粒 | 第41页 |
| ·主要试剂和工具酶 | 第41-42页 |
| ·主要培养基 | 第42页 |
| ·方法 | 第42-44页 |
| ·表达载体PYMD6PMCD6的构建 | 第42-44页 |
| ·重组表达载体PYMD6PMCD6的表达 | 第44页 |
| ·基因表达产物的GC/MS分析 | 第44页 |
| 第三节 结果与分析 | 第44-47页 |
| ·载体PYMCD6的构建 | 第44-45页 |
| ·载体PYMD6PMCD6的构建 | 第45-46页 |
| ·Δ6-脂肪酸脱饱和酶基因启动子片段的功能鉴定 | 第46-47页 |
| 第四节 小结与讨论 | 第47-49页 |
| 第四章 Δ6-脂肪酸脱饱和酶启动子缺失片段重组表达载体的构建和其转录活性的研究 | 第49-61页 |
| 第一节 前言 | 第49页 |
| 第二节 材料和方法 | 第49-50页 |
| ·材料 | 第49-50页 |
| ·菌株和质粒 | 第49页 |
| ·主要试剂和工具酶 | 第49-50页 |
| ·主要培养基 | 第50页 |
| ·方法 | 第50-52页 |
| ·启动子缺失片段重组表达载体的构建 | 第50-51页 |
| ·不同长度启动子缺失片段重组表达载体的表达 | 第51页 |
| ·基因表达产物的GC/MS分析 | 第51-52页 |
| 第三节 结果与分析 | 第52-59页 |
| ·不同长度启动子缺失片段的亚克隆 | 第52-53页 |
| ·含有不同长度启动子缺失片段重组表达载体的构建 | 第53-54页 |
| ·不同长度启动子片段的起始转录功能鉴定 | 第54-59页 |
| 第四节 小结与讨论 | 第59-61页 |
| 第五章 Δ6-脂肪酸脱饱和酶启动子区域-919～-784片段增强子功能验证和研究 | 第61-71页 |
| 第一节 前言 | 第61-62页 |
| 第二节 材料和方法 | 第62-65页 |
| ·材料 | 第62-63页 |
| ·菌株和质粒 | 第62页 |
| ·主要试剂和工具酶 | 第62页 |
| ·主要培养基 | 第62-63页 |
| ·方法 | 第63-65页 |
| ·表达载体PYOL94MCD6的构建 | 第63-64页 |
| ·表达载体PYOL94MCD6的表达 | 第64页 |
| ·基因表达产物的GC/MS分析 | 第64-65页 |
| 第三节 结果与分析 | 第65-70页 |
| ·启动子区域-919～-784 bp和-434～-1 bp片段的PCR扩增 | 第65页 |
| ·启动子区域-919～-784 bp和-434～-1 bp融合片段的PCR扩增 | 第65-66页 |
| ·表达载体PYOL94MCD6的构建 | 第66-67页 |
| ·启动子中-919～-784 bp区域增强子功能的验证 | 第67-70页 |
| 第四节 小结与讨论 | 第70-71页 |
| 结论 | 第71-73页 |
| 附录 主要缩略符号对照表 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-87页 |
| 攻读学位期间承担的科研任务与主要成果 | 第87-89页 |
| 致谢 | 第89-91页 |
| 个人简历 | 第91-93页 |
