| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 研究背景 | 第12-42页 |
| 第一节 天然免疫对病原微生物的识别 | 第12-24页 |
| 一、天然免疫概述 | 第12-13页 |
| 二、天然免疫的模式识别受体 | 第13-24页 |
| 第二节 抗病毒天然免疫的信号转导及其调控机制 | 第24-36页 |
| 一、抗病毒天然免疫信号转导概述 | 第24-25页 |
| 二、Ⅰ型干扰素基因转录调控机制 | 第25-27页 |
| 三、模式识别受体介导的天然免疫信号转导 | 第27-33页 |
| 四、模式识别受体介导的信号转导中的调控机制 | 第33-36页 |
| 第三节 病毒诱导Ⅰ型干扰素表达的早、晚期事件和干扰素效应因子 | 第36-42页 |
| 一、病毒诱导Ⅰ型干扰素基因表达的早、晚期事件 | 第36-39页 |
| 二、干扰素诱导的效应因子 | 第39-42页 |
| 第二章 实验材料和实验方法 | 第42-53页 |
| 第一节 实验材料 | 第42-44页 |
| 一、细胞系、细胞培养和细胞因子 | 第42页 |
| 二、病毒 | 第42页 |
| 三、抗体 | 第42-43页 |
| 四、表达载体 | 第43页 |
| 五、核酸操作及检测试剂盒 | 第43页 |
| 六、其它试剂 | 第43-44页 |
| 七、耗材 | 第44页 |
| 八、特殊仪器和设备 | 第44页 |
| 第二节 实验方法 | 第44-53页 |
| 一、表达载体构建和质粒纯化 | 第44-45页 |
| 二、细胞培养和瞬时转染 | 第45-46页 |
| 三、原代细胞的分离培养和转染 | 第46-47页 |
| 四、荧光素酶报告基因实验 | 第47页 |
| 五、蛋白复合物的纯化和质谱鉴定 | 第47-48页 |
| 六、免疫共沉淀和Western Blot检测 | 第48-49页 |
| 七、非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第49页 |
| 八、RT-PCR | 第49-50页 |
| 九、VSV空斑实验 | 第50页 |
| 十、体外结合核酸实验 | 第50-51页 |
| 十一、通过逆转录病毒载体构建稳定表达细胞系 | 第51页 |
| 十二、细胞核质分离和亚细胞器分离 | 第51-52页 |
| 十三、免疫荧光和激光共聚焦显微镜观察 | 第52-53页 |
| 第三章 实验结果和讨论一:新型核酸受体LSM14A的鉴定及其功能研究 | 第53-87页 |
| 第一节 研究背景与立项依据概述 | 第53-54页 |
| 第二节 实验结果 | 第54-84页 |
| 一、基因库筛选 | 第54-56页 |
| 二、过量表达LSM14A激活ISRE、NF-κB和IFN-β启动子 | 第56-59页 |
| 三、下调内源性LSM14A表达抑制病毒感染诱导的Ⅰ型干扰素表达 | 第59-67页 |
| 四、LSM14A参与细胞抗病毒反应 | 第67-68页 |
| 五、LSM14A参与SeV感染早期Ⅰ型干扰素的表达 | 第68-71页 |
| 六、人肠癌HCT116细胞LSM14A-Flag-Knock-in细胞系的构建 | 第71-72页 |
| 七、LSM14A定位于细胞质 | 第72-73页 |
| 八、LSM14A结合poly(I:C)和poly(dA:dT) | 第73-75页 |
| 九、LSM14A与RIG-I、VISA相互作用 | 第75-78页 |
| 十、LSM14A介导Ⅰ型干扰素表达需要RIG-I的参与 | 第78-80页 |
| 十一、LSM14A、RIG-I、VISA与P-bodies的共定位 | 第80-84页 |
| 第三节 小结和讨论 | 第84-87页 |
| 第四章 实验结果和讨论二:1SG56负反馈调节病毒诱导的Ⅰ型干扰素表达 | 第87-107页 |
| 第一节 研究背景与立项依据概述 | 第87-88页 |
| 第二节 实验结果 | 第88-104页 |
| 一、ISG56和ISG54是MITA相互作用蛋白 | 第88-91页 |
| 二、过量表达ISG56抑制病毒诱导的ISRE和IFN-β的激活 | 第91-96页 |
| 三、内源性ISG56的表达下调促进病毒感染诱导的IFN-β激活 | 第96-100页 |
| 四、ISG56负调控细胞抗病毒反应 | 第100-101页 |
| 五、1SG56阻断MITA-VISA和MITA-TBK1的相互作用 | 第101-104页 |
| 第三节 小结和讨论 | 第104-107页 |
| 第五章 研究总结和展望 | 第107-109页 |
| 参考文献 | 第109-120页 |
| 缩略词表 | 第120-122页 |
| 作者简历 | 第122-124页 |
| 致谢 | 第124-125页 |
