摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-6页 |
目录 | 第6-9页 |
第一章 绪论 | 第9-20页 |
·铁硫簇的介绍 | 第10-11页 |
·铁硫蛋白 | 第11-18页 |
·植物型铁氧还蛋白 | 第13页 |
·4Fe4S细菌铁氧还蛋白高氧化还原电位铁硫蛋白(HiPIP)的介绍 | 第13-17页 |
·亚铁氧化酶的介绍(Iron oxidase) | 第17-18页 |
·课题的研究目的与研究内容 | 第18-20页 |
·依据和目的 | 第18页 |
·课题的创新性 | 第18-19页 |
·论文的主要研究内容 | 第19页 |
·论文课题受资助情况 | 第19-20页 |
第二章 实验材料和方法 | 第20-33页 |
·实验材料 | 第20-24页 |
·菌种 | 第20页 |
·培养基 | 第20-21页 |
·质粒提取试剂 | 第21-22页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第22页 |
·不连续体系SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第22页 |
·SDS-PAGE胶保存试剂及装置 | 第22-23页 |
·蛋白亲和纯化试剂 | 第23页 |
·实验仪器与设备 | 第23-24页 |
·实验方法 | 第24-32页 |
·定点突变引物设计 | 第24-27页 |
·定点突变PCR扩增 | 第27-28页 |
·酶切和转化 | 第28页 |
·阳性克隆的筛选 | 第28页 |
·质粒的提取 | 第28-29页 |
·突变蛋白质的表达转化 | 第29页 |
·蛋白质最佳表达条件的确定 | 第29-30页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第30-31页 |
·蛋白质的纯化 | 第31-32页 |
·测试分析方法 | 第32-33页 |
·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第32页 |
·紫外分光光谱法(UV Scanning) | 第32页 |
·园二色远紫外吸收光谱(Circular dichroism spectroscopy) | 第32页 |
·分子结构模型图的模拟(Molecular structure modeling) | 第32-33页 |
第三章 亚铁氧化酶定点突变研究 | 第33-47页 |
·亚铁氧化酶蛋白序列的同源比对 | 第33-34页 |
·IRO突变蛋白质基因的克隆 | 第34-36页 |
·IRO突变蛋白质的表达 | 第36-37页 |
·亚铁氧化酶蛋白表达条件的确定 | 第36-37页 |
·亚铁氧化酶大规模的表达 | 第37页 |
·SDS-PAGE分析纯化的蛋白样品 | 第37-38页 |
·UV/Vis分析突变蛋白 | 第38-40页 |
·突变蛋白铁硫元素含量分析 | 第40-41页 |
·园二色远紫外光谱吸收 | 第41-42页 |
·酸性条件下铁硫簇的稳定性 | 第42-44页 |
·亚铁氧化酶分子结构模型图 | 第44-46页 |
·本章小结 | 第46-47页 |
第四章 高氧化还原电位铁硫蛋白定点突变研究 | 第47-54页 |
·高氧化还原电位铁硫蛋白序列的同源比对 | 第47-48页 |
·高氧化还原电位铁硫蛋白突变蛋白质基因的克隆 | 第48页 |
·高氧化还原电位铁硫蛋白突变蛋白质的表达 | 第48-49页 |
·高氧化还原电位铁硫蛋白表达条件的确定 | 第48页 |
·高氧化还原电位铁硫蛋白大规模的表达 | 第48-49页 |
·SDS-PAGE分析纯化的样品 | 第49页 |
·UV/Vis分析突变蛋白 | 第49-51页 |
·园二色远紫外光谱吸收 | 第51-53页 |
·本章小结 | 第53-54页 |
第五章 结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-64页 |
致谢 | 第64-65页 |
研究成果 | 第65页 |