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高氧化还原电位铁硫蛋白铁硫簇结构稳定性的研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-6页
目录第6-9页
第一章 绪论第9-20页
   ·铁硫簇的介绍第10-11页
   ·铁硫蛋白第11-18页
     ·植物型铁氧还蛋白第13页
     ·4Fe4S细菌铁氧还蛋白高氧化还原电位铁硫蛋白(HiPIP)的介绍第13-17页
     ·亚铁氧化酶的介绍(Iron oxidase)第17-18页
   ·课题的研究目的与研究内容第18-20页
     ·依据和目的第18页
     ·课题的创新性第18-19页
     ·论文的主要研究内容第19页
     ·论文课题受资助情况第19-20页
第二章 实验材料和方法第20-33页
   ·实验材料第20-24页
     ·菌种第20页
     ·培养基第20-21页
     ·质粒提取试剂第21-22页
     ·琼脂糖凝胶电泳第22页
     ·不连续体系SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳第22页
     ·SDS-PAGE胶保存试剂及装置第22-23页
     ·蛋白亲和纯化试剂第23页
     ·实验仪器与设备第23-24页
   ·实验方法第24-32页
     ·定点突变引物设计第24-27页
     ·定点突变PCR扩增第27-28页
     ·酶切和转化第28页
     ·阳性克隆的筛选第28页
     ·质粒的提取第28-29页
     ·突变蛋白质的表达转化第29页
     ·蛋白质最佳表达条件的确定第29-30页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第30-31页
     ·蛋白质的纯化第31-32页
   ·测试分析方法第32-33页
     ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)第32页
     ·紫外分光光谱法(UV Scanning)第32页
     ·园二色远紫外吸收光谱(Circular dichroism spectroscopy)第32页
     ·分子结构模型图的模拟(Molecular structure modeling)第32-33页
第三章 亚铁氧化酶定点突变研究第33-47页
   ·亚铁氧化酶蛋白序列的同源比对第33-34页
   ·IRO突变蛋白质基因的克隆第34-36页
   ·IRO突变蛋白质的表达第36-37页
     ·亚铁氧化酶蛋白表达条件的确定第36-37页
     ·亚铁氧化酶大规模的表达第37页
   ·SDS-PAGE分析纯化的蛋白样品第37-38页
   ·UV/Vis分析突变蛋白第38-40页
   ·突变蛋白铁硫元素含量分析第40-41页
   ·园二色远紫外光谱吸收第41-42页
   ·酸性条件下铁硫簇的稳定性第42-44页
   ·亚铁氧化酶分子结构模型图第44-46页
   ·本章小结第46-47页
第四章 高氧化还原电位铁硫蛋白定点突变研究第47-54页
   ·高氧化还原电位铁硫蛋白序列的同源比对第47-48页
   ·高氧化还原电位铁硫蛋白突变蛋白质基因的克隆第48页
   ·高氧化还原电位铁硫蛋白突变蛋白质的表达第48-49页
     ·高氧化还原电位铁硫蛋白表达条件的确定第48页
     ·高氧化还原电位铁硫蛋白大规模的表达第48-49页
   ·SDS-PAGE分析纯化的样品第49页
   ·UV/Vis分析突变蛋白第49-51页
   ·园二色远紫外光谱吸收第51-53页
   ·本章小结第53-54页
第五章 结论第54-55页
参考文献第55-64页
致谢第64-65页
研究成果第65页

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