缩略语 | 第6-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
前言 | 第12-15页 |
1 材料与方法 | 第15-30页 |
1.1实验材料 | 第15-18页 |
1.1.1 细胞株 | 第15页 |
1.1.2 质粒载体、慢病毒载体 | 第15页 |
1.1.3 主要实验仪器 | 第15-16页 |
1.1.4 主要实验试剂 | 第16-17页 |
1.1.5 主要工作液配制 | 第17-18页 |
1.2 实验方法 | 第18-30页 |
1.2.1 细胞培养 | 第18-19页 |
1.2.2 构建pGenesil-3.1-HBx-shRNA重组表达载体 | 第19-22页 |
1.2.3 pGenesil-3.1-HBx-shRNA载体转染细胞 | 第22-23页 |
1.2.4 RNA提取及逆转录 | 第23-24页 |
1.2.5 实时荧光定量PCR检测HBx基因 | 第24页 |
1.2.6 CCK-8 法检测细胞增殖 | 第24页 |
1.2.7 对各组细胞上清液中HBsAg和HBeAg进行检测 | 第24-25页 |
1.2.8 转染HBx-shRNA后对HepG2.2.15细胞的凋亡检测 | 第25页 |
1.2.9 构建pHBLV-h-CCL20载体 | 第25-27页 |
1.2.10 pHBLV-h-CCL20载体感染HepG2.2.15细胞及筛选 | 第27-28页 |
1.2.11 实时荧光定量PCR检测h-CCL20 | 第28-29页 |
1.2.12 转染pHBLV-h-CCL20后对HepG2.2.15细胞的凋亡检测 | 第29页 |
1.2.13 统计学分析 | 第29-30页 |
2 实验结果 | 第30-38页 |
2.1 成功构建pGenesil-3.1-HBx-shRNA重组表达载体 | 第30-32页 |
2.2 电穿孔法成功转染细胞 | 第32-33页 |
2.3 检测HBx基因表达量的差异 | 第33页 |
2.4 CCK-8 法检测细胞增殖结果 | 第33-34页 |
2.5 对HepG2.2.15细胞内HBsAg和HBeAg抑制效果检测 | 第34页 |
2.6 转染重组HBx-shRNA后,影响HepG2.2.15细胞凋亡 | 第34-35页 |
2.7pHBLV-h-CCL20载体测序结果 | 第35-36页 |
2.8 pHBLV-h-CCL20载体成功感染HepG2.2.15细胞 | 第36页 |
2.9 HepG2.2.15细胞中h-CCL20基因表达量差异 | 第36-37页 |
2.10 转染重组pHBLV-h-CCL20后,影响HepG2.2.15细胞凋亡 | 第37-38页 |
3 讨论 | 第38-42页 |
4 结论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-47页 |
综述 自体CIK细胞联合树突状细胞治疗 HBV 相关进展 | 第47-57页 |
综述参考文献 | 第54-57页 |
附录 | 第57-60页 |
个人简历 | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |