| 目录 | 第1-9页 |
| 致谢 | 第9-10页 |
| 英文缩写 | 第10-12页 |
| 中文摘要 | 第12-14页 |
| 英文摘要 | 第14-16页 |
| 第一章 卵巢肿瘤血清诊断标志物筛选及临床验证研究近况(文献综述述) | 第16-108页 |
| 1 卵巢恶性肿瘤概述 | 第16-26页 |
| ·卵巢恶性肿瘤的发病率及可能的致病因素 | 第16-21页 |
| ·发病率 | 第16-17页 |
| ·发病因素 | 第17-21页 |
| ·卵巢恶性肿瘤的主要诊断与鉴别诊断模式及存在的问题 | 第21-26页 |
| ·卵巢癌的筛查 | 第21-22页 |
| ·卵巢癌的早期诊断 | 第22-26页 |
| 2、卵巢肿瘤血清潜在诊断标志物筛选及临床验证研究近况 | 第26-41页 |
| ·血清潜在诊断标志物筛选的主要方法及原理 | 第27-32页 |
| ·卵巢肿瘤血清潜在诊断标志物筛选现况 | 第32-35页 |
| ·已筛选出的卵巢肿瘤血清潜在诊断标志物临床验证现况 | 第35-39页 |
| ·卵巢肿瘤血清潜在诊断标志物筛选中存在的问题及拟解决的问题 | 第39-41页 |
| 3 卵巢肿瘤血清诊断标志物研究近况 | 第41-67页 |
| ·血清抗原抗体类诊断标记物在卵巢恶性肿瘤诊断、鉴别诊断及病程监测中的应用 | 第41-55页 |
| ·血清CA125含量测定在卵巢恶性肿瘤诊断、鉴别诊断及病程监测中的应用 | 第41-42页 |
| ·血清CA125含量测定在卵巢恶性肿瘤诊断、鉴别诊断 | 第42-44页 |
| ·CA125与卵巢上皮性肿瘤(EOC)的筛查 | 第44-45页 |
| ·CA125与EOC的诊断与鉴别诊断 | 第45页 |
| ·治疗前血清CA125水平与EOC临床的关系 | 第45-46页 |
| ·CA12与EOC的化疗疗效及复发转移 | 第46-48页 |
| ·CA125与EOC的预后 | 第48页 |
| ·血清CA125含量测定在诊断、鉴别诊断及病程监测中应用中存在的问题及原因 | 第48-49页 |
| ·血清HE4含量测定在卵巢恶性肿瘤诊断、鉴别诊断及病程监测中的应用 | 第49-52页 |
| ·其它血清抗原抗体类标志物在卵巢恶性肿瘤诊断、鉴别诊断及病程监测中的应用价值及缺陷 | 第52-55页 |
| ·激素类标志物在卵巢恶性肿瘤诊断、鉴别诊断及病程监测中的应用价值及缺陷 | 第55-60页 |
| ·尿促性腺激素片段 | 第55页 |
| ·UGF与卵巢癌 | 第55-56页 |
| ·抑制素 | 第56页 |
| ·INH与卵巢上皮性肿瘤 | 第56-57页 |
| ·激活素 | 第57-58页 |
| ·绒毛促性腺激素(HCG) | 第58页 |
| ·内固醇类激素的测定 | 第58-59页 |
| ·米勒管抑制激素(MIS) | 第59页 |
| ·抑制素 | 第59-60页 |
| ·酶类标志物在卵巢恶性肿瘤诊断、鉴别诊断及病程监测中的应用价值及缺陷 | 第60-63页 |
| ·端粒酶(Telomerase,TLMA) | 第60-61页 |
| ·基质金属蛋白酶(matrix metallop roteinase,MMPs) | 第61-62页 |
| ·环氧化酶(cyclooxygenase,COX) | 第62页 |
| ·谷胱甘肽S2转移酶(Glutathione S transferases,GSTs) | 第62-63页 |
| ·神经细胞特异性稀醇化酶(NSE) | 第63页 |
| ·血清乳酸脱氢酶(LDH) | 第63页 |
| ·肽类标志物在卵巢恶性肿瘤诊断、鉴别诊断及病程监测中的应用价值及缺陷 | 第63-66页 |
| ·组织多肽抗原(TPA)和特异性组织多肽抗原(TPS) | 第63-64页 |
| ·细胞角蛋白19(CK19)/CYFRA21-1 | 第64-65页 |
| ·甲胎蛋白(AFP) | 第65页 |
| ·滤泡调整蛋白(FRP) | 第65页 |
| ·血清唾液酸或脂连唾液酸的检测(LSA) | 第65-66页 |
| ·多指标联合应用在卵巢恶性肿瘤诊断、鉴别诊断及病程监测中的应用价值 | 第66-67页 |
| 4、卵巢恶性肿瘤的分子诊断及判断预后的研究现况 | 第67-81页 |
| ·癌基因检测作为卵巢恶性肿瘤诊断及判断预后的临床价值 | 第68-70页 |
| ·HER-2/neu癌基因 | 第68-69页 |
| ·c-myc基因 | 第69-70页 |
| ·ras基因 | 第70页 |
| ·抑癌基因检测作为卵巢恶性肿瘤诊断及判断预后的临床价值 | 第70-74页 |
| ·p53抑癌基因 | 第70-71页 |
| ·nm23基因 | 第71-72页 |
| ·p16基因 | 第72-73页 |
| ·KAI-1基因 | 第73页 |
| ·PETN | 第73-74页 |
| ·生长因子检测作为卵巢恶性肿瘤诊断及判断预后的临床价值 | 第74-78页 |
| ·白介素-6(IL-6) | 第74页 |
| ·巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF) | 第74-75页 |
| ·血管内皮生长因子(VEGF) | 第75页 |
| ·表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR) | 第75-76页 |
| ·碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)和细胞周期蛋白D(cyclin D1) | 第76-77页 |
| ·转化生长因子β1(transforming growth factor beta 1,TGF-β1) | 第77页 |
| ·内皮抑素 | 第77-78页 |
| ·溶血磷脂酸 | 第78页 |
| ·细胞DNA及RNA含量检测的临床价值 | 第78-80页 |
| ·多分子指标联合应用的临床价值 | 第80-81页 |
| 5、ITIH4基因与卵巢肿瘤的关糸研究 | 第81-86页 |
| ·ITIH4基因的发现、结构及主要生物学功能 | 第82页 |
| ·ITIH4基因与恶性肿瘤的关糸研究现况 | 第82-83页 |
| ·ITIH4基因与卵巢恶性肿瘤的关糸及分子机理 | 第83-86页 |
| 6、本研究的目地和意义 | 第86-108页 |
| 第二章 ITIH4基因在卵巢组织中的表达检测及临床意义初探 | 第108-140页 |
| 1 材料与方法 | 第108-126页 |
| ·临床资料 | 第108-110页 |
| ·主要试剂及配制 | 第110-113页 |
| ·引物设计与合成 | 第113-114页 |
| ·实验方法 | 第114-126页 |
| 2 结果 | 第126-136页 |
| ·卵巢肿瘤组织中ITIH4基因mRNA表达的RT-PCR条件建立 | 第126-128页 |
| ·ITIH4基因的荧光定量PCR条件建立 | 第128-131页 |
| ·各类卵巢组织中的ITIH4基因mRNA比较 | 第131-132页 |
| ·卵巢癌组织中ITIH4基因mRNA表达与其临床病理的关系 | 第132-133页 |
| ·利用寿命表法进行生存分析 | 第133-134页 |
| ·卵巢癌组织中ITIH4基因mRNA表达与其预后的关系 | 第134-136页 |
| 3 讨论 | 第136-140页 |
| 第三章 siRNA沉默ITIH4基因对卵巢上皮癌生物学功能影响体外实验研究 | 第140-177页 |
| 1 材料与方法 | 第140-157页 |
| ·材料 | 第140-143页 |
| ·质粒与菌株 | 第140-141页 |
| ·主要试剂及配制 | 第141-143页 |
| ·仪器 | 第143-144页 |
| ·实验方法 | 第144-157页 |
| ·转染细胞系培养 | 第144页 |
| ·siRNA的设计与合成 | 第144-145页 |
| ·siRNA片段最佳沉默效应的筛选 | 第145-146页 |
| ·shRNA-ITIH4重组表达质粒的构建 | 第146-149页 |
| ·脂质体介导的ITIH4-PGPU6-917质粒细胞转染 | 第149-151页 |
| ·携带干扰重组质粒的HO8910pm细胞的筛选 | 第151-152页 |
| ·携带干扰重组质粒的HO8910pm细胞的克隆 | 第152-153页 |
| ·转染前后细胞中ITIH4基因mRNA表达测定 | 第153页 |
| ·细胞生长曲线测定(MTT法) | 第153页 |
| ·细胞体集落形成实验 | 第153-154页 |
| ·流式细胞仪检测细胞生长周期变化 | 第154页 |
| ·细胞体外迁移能力的测定 | 第154-155页 |
| ·细胞体外侵袭能力测定 | 第155-157页 |
| 2 结果 | 第157-172页 |
| ·不同种类卵巢癌细胞的ITIH4基因表达情况 | 第157页 |
| ·转染条件的确定 | 第157-158页 |
| ·不同的siRNA干扰片段瞬时转染HO8910pm细胞前后其ITIH4mRNA表达结果 | 第158-159页 |
| ·ITIH4-PGPU6-917siRNA表达载体构建结果 | 第159-160页 |
| ·ITIH4-PGPU6-917载体转染HO8910pm细胞结果 | 第160-161页 |
| ·HO8910pm-ITIH4-PGPU6-917(+)和HO8910pm-ITIH4-PGPU6(+)细胞筛选 | 第161-162页 |
| ·不同细胞中ITIH4mRNA表达测定 | 第162-164页 |
| ·细胞集落形成实验结果 | 第164-166页 |
| ·细胞生长曲线结果 | 第166-167页 |
| ·各类细胞细胞生长周期结果 | 第167-169页 |
| ·不同细胞体外迁移能力的测定结果 | 第169-170页 |
| ·不同细胞体外侵袭能力测定 | 第170-172页 |
| 3 讨论 | 第172-177页 |
| 第四章 重组慢病毒干扰系统的构建 | 第177-191页 |
| 1 材料与方法 | 第177-185页 |
| ·材料 | 第177-181页 |
| ·质粒与菌株、细胞 | 第177-180页 |
| ·主要试剂 | 第180-181页 |
| ·仪器 | 第181页 |
| ·实验方法 | 第181-185页 |
| ·ITIH4 RNAi慢病毒载体的构建 | 第181-185页 |
| ·shRNA的设计 | 第181-182页 |
| ·插入片段退火反应 | 第182页 |
| ·Hpa I和Xho I双酶切pSico | 第182-183页 |
| ·连接反应 | 第183页 |
| ·连接产物转化大肠杆菌DH-5α | 第183页 |
| ·挑选阳性克隆 | 第183-184页 |
| ·质粒DNA的提取 | 第184页 |
| ·重组质粒DNA-PCR | 第184页 |
| ·重组质粒的测序 | 第184页 |
| ·转染293T细胞 | 第184-185页 |
| ·病毒滴度测定 | 第185页 |
| 2 结果 | 第185-189页 |
| ·psico质粒双酶切电泳 | 第185页 |
| ·RNAi重组质粒提取 | 第185-186页 |
| ·重组质粒ITIH4-Psico PCR鉴定 | 第186页 |
| ·RNAi重组质粒测序结果 | 第186-187页 |
| ·ITIH4-Psico转染293T细胞结果 | 第187-188页 |
| ·病毒滴度测定结果 | 第188-189页 |
| 3 讨论 | 第189-191页 |
| 参考文献 | 第191-192页 |
| 全文小结 | 第192页 |
