摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
第1章 绪论 | 第16-24页 |
1.1 研究的目的和意义 | 第16页 |
1.2 研究现状 | 第16-22页 |
1.2.1 桑叶用作家禽饲料 | 第16-17页 |
1.2.2 木质素的研究进展 | 第17页 |
1.2.3 咖啡酸O-甲基转移酶基因 | 第17-19页 |
1.2.4 咖啡酰辅酶A-O甲基转移酶基因 | 第19-21页 |
1.2.5 木质素生物合成途径中其它关键基因 | 第21-22页 |
1.3 研究内容 | 第22-24页 |
1.3.1 桑树咖啡酸O-甲基转移酶(COMT)基因的克隆及序列分析 | 第22页 |
1.3.2 桑树咖啡酰辅酶A-O甲基转移酶(CCoAOMT)基因的克隆及序列分析 | 第22页 |
1.3.3 桑树不同品系、不同组织和采收时期基因表达水平及桑叶总木质素相对含量分析 | 第22-24页 |
第2章 桑树咖啡酸O-甲基转移酶基因(MmCOMT)克隆及序列分析 | 第24-34页 |
2.1 实验材料与主要试剂 | 第24页 |
2.2 实验方法 | 第24-28页 |
2.2.1 桑树总RNA提取 | 第24-25页 |
2.2.2 cDNA第1 链的合成 | 第25-26页 |
2.2.3 桑树COMT基因克隆引物的设计 | 第26页 |
2.2.4 桑树COMT基因的克隆 | 第26-27页 |
2.2.5 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第27页 |
2.2.6 COMT基因目的片段与载体的连接 | 第27页 |
2.2.7 连接产物的转化 | 第27-28页 |
2.2.8 桑树COMT基因序列分析 | 第28页 |
2.3 结果与分析 | 第28-32页 |
2.3.1 桑树COMT基因CDS序列的克隆 | 第28-29页 |
2.3.2 桑树COMT基因及编码蛋白质的序列分析 | 第29-30页 |
2.3.3 桑树COMT基因编码氨基酸序列的同源性比对与系统进化分析 | 第30-32页 |
2.4 结论与讨论 | 第32-34页 |
第3章 桑树咖啡酰辅酶A-O甲基转移酶基因(MmCCoAOMT)克隆、序列分析及原核表达 | 第34-44页 |
3.1 实验材料与主要试剂(同2.1) | 第34页 |
3.2 实验方法 | 第34-37页 |
3.2.1 桑树总RNA提取(同2.2.1) | 第34页 |
3.2.2 cDNA第一链的合成(同2.2.2) | 第34页 |
3.2.3 桑树CCoAOMT基因克隆引物的设计 | 第34页 |
3.2.4 桑树CCoAOMT基因的克隆 | 第34页 |
3.2.5 大肠杆菌感受态细胞的制备(同2.2.5) | 第34页 |
3.2.6 CCoAOMT基因目的片段与载体的连接 | 第34-35页 |
3.2.7 连接产物的转化(同2.2.7) | 第35页 |
3.2.8 桑树CCoAOMT基因序列分析 | 第35页 |
3.2.9 桑树CCoAOMT基因的原核表达 | 第35-37页 |
3.3 结果与分析 | 第37-42页 |
3.3.1 桑树CCoAOMT基因CDS序列的克隆 | 第37-38页 |
3.3.2 桑树CCoAOMT基因及编码蛋白质的序列分析 | 第38-39页 |
3.3.3 桑树CCoAOMT基因编码氨基酸序列的同源性比对与系统进化分析 | 第39-41页 |
3.3.4 桑树CCoAOMT基因的原核表达分析 | 第41-42页 |
3.4 结论和讨论 | 第42-44页 |
第4章 桑树CAD、CCR、F5H、COMT、CCoAOMT基因表达水平与总木质素含量分析 | 第44-56页 |
4.1 实验材料与主要试剂 | 第44页 |
4.1.1 qRT-PCR所需仪器与试剂 | 第44页 |
4.1.2 木质素含量的测定所需仪器与试剂 | 第44页 |
4.2 实验方法 | 第44-46页 |
4.2.1 基因表达荧光定量PCR相关引物的设计 | 第44-45页 |
4.2.2 桑树不同品系、不同组织、不同采收时期CAD、CCR、F5H、COMT、CCoAOMT基因表达的荧光定量PCR | 第45页 |
4.2.3 桑叶总木质素相对含量的测定 | 第45-46页 |
4.3 结果与分析 | 第46-54页 |
4.3.1 不同桑品系CAD、CCR、F5H、COMT、CCoAOMT基因表达水平 | 第46-52页 |
4.3.2 桑树总木质素相对含量 | 第52-54页 |
4.4 结论和讨论 | 第54-56页 |
结论 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-62页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第62-64页 |
致谢 | 第64页 |