反义4CL基因转化紫花苜蓿调控木质素生物合成的研究
| 摘要 | 第4-6页 |
| abstract | 第6-7页 |
| 引言 | 第14-24页 |
| 0.1 紫花苜蓿基因工程 | 第14-16页 |
| 0.1.1 紫花苜蓿的营养品质改良 | 第14-15页 |
| 0.1.2 提高紫花苜蓿抗逆性 | 第15-16页 |
| 0.1.3 作为生物反应器 | 第16页 |
| 0.2 木质素生物合成研究进展 | 第16-20页 |
| 0.2.1 木质素组成与分布 | 第16-17页 |
| 0.2.2 木质素的生物合成 | 第17-18页 |
| 0.2.3 木质素基因工程的研究进展 | 第18-20页 |
| 0.3 反义技术及其应用 | 第20-23页 |
| 0.3.1 反义技术及其机制 | 第20-21页 |
| 0.3.2 反义基因技术在植物基因工程中的应用 | 第21-23页 |
| 0.4 本实验研究目的及意义 | 第23-24页 |
| 第1章 农杆菌介导的紫花苜蓿遗传转化体系的优化 | 第24-33页 |
| 1.1 主要仪器设备及试剂 | 第24-27页 |
| 1.1.1 主要仪器设备 | 第24页 |
| 1.1.2 试剂的配制 | 第24-25页 |
| 1.1.3 培养基 | 第25-27页 |
| 1.2 实验材料 | 第27页 |
| 1.3 实验方法 | 第27-29页 |
| 1.3.1 农杆菌介导的转化 | 第27页 |
| 1.3.2 叶龄的确定 | 第27-28页 |
| 1.3.3 预培养时间的确定 | 第28页 |
| 1.3.4 浸染时间的确定 | 第28页 |
| 1.3.5 共培养时间的确定 | 第28页 |
| 1.3.6 筛选压力的确定 | 第28-29页 |
| 1.3.7 头孢霉素抑菌浓度的确定 | 第29页 |
| 1.4 实验结果与讨论 | 第29-32页 |
| 1.4.1 叶龄的确定 | 第29页 |
| 1.4.2 预培养时间的确定 | 第29-30页 |
| 1.4.3 侵染时间的确定 | 第30页 |
| 1.4.4 共培养时间的确定 | 第30-31页 |
| 1.4.5 筛选压力的确定 | 第31页 |
| 1.4.6 头孢霉素抑菌浓度的确定 | 第31-32页 |
| 结论 | 第32-33页 |
| 第2章 4CL反义基因转化紫花苜蓿 | 第33-51页 |
| 2.1 主要仪器设备及试剂 | 第33-36页 |
| 2.1.1 主要仪器设备 | 第33页 |
| 2.1.2 试剂 | 第33-34页 |
| 2.1.3 试剂的配制 | 第34-35页 |
| 2.1.4 培养基 | 第35-36页 |
| 2.2 实验材料 | 第36-37页 |
| 2.2.1 外植体 | 第36页 |
| 2.2.2 菌种及质粒 | 第36-37页 |
| 2.3 实验方法 | 第37-43页 |
| 2.3.1 农杆菌的活化 | 第37页 |
| 2.3.2 农杆菌介导4CL反义基因转化紫花苜蓿 | 第37-39页 |
| 2.3.3 T0代植株分子检测 | 第39-43页 |
| 2.3.4 T0代转化植株木质素含量的测定 | 第43页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第43-50页 |
| 2.4.1 农杆菌介导4CL反义基因转化紫花苜蓿 | 第43-47页 |
| 2.4.2 T0代植株PCR检测结果 | 第47页 |
| 2.4.3 T0代植株测序结果 | 第47-49页 |
| 2.4.4 木质素含量的测定 | 第49-50页 |
| 结论 | 第50-51页 |
| 第3章 T1代转基因紫花苜蓿的培养与检测 | 第51-60页 |
| 3.1 主要仪器设备及试剂 | 第51-52页 |
| 3.1.1 仪器设备 | 第51页 |
| 3.1.2 试剂的配制 | 第51-52页 |
| 3.2 实验方法 | 第52-55页 |
| 3.2.1 T1代植株的培养 | 第52页 |
| 3.2.2 T1代植株的表型观察 | 第52页 |
| 3.2.3 T1植株木质素含量的测定 | 第52页 |
| 3.2.4 T1代植株PCR检测及测序 | 第52-53页 |
| 3.2.5 T1代植株RT-PCR检测 | 第53-55页 |
| 3.3 实验结果与讨论 | 第55-59页 |
| 3.3.1 TI代植株PCR检测结果 | 第55-56页 |
| 3.3.2 TI代植株测序结果 | 第56-57页 |
| 3.3.3 T1代植株RT-PCR检测结果 | 第57-58页 |
| 3.3.4 T1代植株的生长状况 | 第58-59页 |
| 3.3.5 T1代植株木质素含量 | 第59页 |
| 结论 | 第59-60页 |
| 第4章 结论 | 第60-62页 |
| 4.1 农杆菌介导的紫花苜蓿遗传转化体系的优化 | 第60页 |
| 4.2 4CL反义基因转化紫花苜蓿 | 第60-61页 |
| 4.3 T1代转基因紫花苜蓿的培养与检测 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 缩写符号说明 | 第67-68页 |
| 攻读学位期间发表学术论文及参加科研情况 | 第68-69页 |
