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产磷脂酶C菌株的筛选及其酶学性质的研究

摘要第1-6页
Abstract第6-12页
第一章 前言第12-19页
   ·磷脂酶C研究进展第13-17页
     ·磷脂酶分类第13-14页
     ·磷脂酶C种类与分布第14-15页
     ·磷脂酶C活性测定方法第15页
     ·微生物磷脂酶C分离纯化第15-16页
     ·磷脂酶C生物学功能及应用现状第16-17页
   ·研究目的及意义第17-19页
第二章 产磷脂酶C菌株筛选及初步鉴定第19-27页
 1 材料与方法第19-22页
   ·材料第19-20页
     ·菌种来源第19页
     ·主要试剂及培养基第19-20页
     ·主要仪器第20页
   ·方法第20-22页
     ·产磷脂酶C菌株初筛第20页
     ·产磷脂酶C菌株复筛第20-21页
     ·磷脂酶C酶活力测定第21页
     ·生物量测定第21页
     ·菌株分类鉴定第21-22页
       ·个体形态学观察第21-22页
       ·菌落的形态特征第22页
       ·菌株生理生化特征第22页
 2 结果与分析第22-26页
   ·初筛第22页
   ·复筛第22-24页
   ·产磷脂酶C菌株分类鉴定第24-26页
 3 讨论第26-27页
   ·产磷脂酶C菌株筛选第26页
   ·产磷脂酶C菌株分类鉴定第26-27页
第三章 产磷脂酶C菌株产酶条件优化第27-38页
 1 材料与方法第27-28页
   ·材料第27页
     ·菌株来源第27页
     ·主要试剂及培养基第27页
     ·主要仪器第27页
   ·方法第27-28页
     ·菌株培养第27页
     ·粗酶液制备第27-28页
     ·酶活测定第28页
     ·生物量测定第28页
     ·培养基组成的确定第28页
     ·培养条件的确定第28页
 2 结果与分析第28-36页
   ·培养基第28-31页
     ·碳源第28-29页
     ·氮源第29页
     ·无机盐第29-30页
     ·均匀设计法优化培养基第30-31页
   ·培养条件第31-36页
     ·接种量第31-32页
     ·转速第32-33页
     ·装液量第33页
     ·温度第33-34页
     ·初始pH第34-35页
     ·培养时间第35-36页
     ·产酶条件优化前后PLC酶活定性测定第36页
 3 讨论第36-38页
   ·培养基的设计与优化第36-37页
   ·不同培养条件对产酶影响第37-38页
第四章 磷脂酶C分离纯化第38-48页
 1 材料与方法第38-43页
   ·材料第38-40页
     ·菌株第38页
     ·主要试剂及培养基第38页
     ·主要试剂配置第38-39页
     ·主要仪器第39-40页
   ·方法第40-43页
     ·蛋白质浓度的测定第40页
     ·粗酶液制备第40页
     ·酶活测定第40页
     ·磷脂酶C分离纯化第40-42页
     ·纯度及相对分子量鉴定第42-43页
 2 结果与分析第43-47页
   ·硫酸铵分级盐析第43页
   ·DEAE-52离子交换层析第43-44页
   ·琼脂糖凝胶6B层析第44-45页
   ·Sephadex G-75凝胶过滤第45页
   ·磷脂酶C的纯化结果第45-46页
   ·纯度及相对分子量鉴定第46-47页
 3 讨论第47-48页
第五章 磷脂酶C部分酶学性质第48-56页
 1 材料与方法第48-50页
   ·材料第48-49页
     ·菌株第48页
     ·主要试剂及培养基第48页
     ·主要仪器第48-49页
   ·方法第49-50页
     ·酶活测定第49页
     ·B.cereus Z-13磷脂酶C最适反应温度第49页
     ·B.cereus Z-13磷脂酶C最适反应pH第49页
     ·B.cereuS Z-13磷脂酶C热稳定性第49页
     ·B.cereus Z-13磷脂酶C pH稳定性第49页
     ·金属离子对B.cereus Z-13磷脂酶C酶活力的影响第49页
     ·磷脂酶C酶促魔芋飞粉产神经酰胺研究第49-50页
 2 结果与分析第50-54页
   ·最适作用温度第50页
   ·最适作用pH第50-51页
   ·热稳定性第51-52页
   ·酸碱稳定性第52页
   ·金属离子对酶活力的影响第52-53页
   ·降解前后魔芋飞粉粗提物中神经酰胺含量分析第53-54页
 3 讨论第54-56页
   ·磷脂酶C反应的影响因素第54-55页
   ·非水相中的磷脂酶C酶催化反应第55-56页
第六章 研究结论、创新点、下一步工作设想第56-57页
 1. 研究结论第56页
 2. 本论文创新点第56页
 3. 下一步工作设想第56-57页
参考文献第57-62页
致谢第62-63页
作者简介第63页

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