摘要 | 第8-9页 |
英文摘要 | 第9-10页 |
1 前言 | 第11-17页 |
1.1 研究目的与意义 | 第11-12页 |
1.2 国内外研究动态 | 第12-17页 |
1.2.1 隐花色素的发现 | 第12页 |
1.2.2 蓝光受体CRY的功能 | 第12-13页 |
1.2.3 其他高等植物中蓝光受体的研究进展 | 第13-15页 |
1.2.4 ABA在调节植物生长发育中的作用 | 第15-16页 |
1.2.5 BICs与CRYs的交互作用 | 第16-17页 |
2 材料与方法 | 第17-28页 |
2.1 试验材料 | 第17-19页 |
2.1.1 植物材料 | 第17页 |
2.1.2 菌株、载体、酶、抗体和试剂盒及其它试剂 | 第17页 |
2.1.3 引物 | 第17-19页 |
2.1.4 抗生素 | 第19页 |
2.2 试验方法 | 第19-27页 |
2.2.1 甜高粱和拟南芥培养 | 第19页 |
2.2.2 载体构建 | 第19-22页 |
2.2.3 农杆菌转化及转基因阳性苗的鉴定 | 第22-24页 |
2.2.4 荧光定量PCR分析 | 第24-25页 |
2.2.5 下胚轴处理 | 第25页 |
2.2.6 ABA和NaCl胁迫处理 | 第25页 |
2.2.7 酵母转化及酵母双杂交 | 第25-27页 |
2.3 数据统计与分析 | 第27-28页 |
3 结果与分析 | 第28-42页 |
3.1 SbCRY2基因的克隆和载体构建 | 第28-30页 |
3.1.1 甜高粱总RNA的提取 | 第28页 |
3.1.2 SbCRY2基因PCR扩增 | 第28-29页 |
3.1.3 pEGAD-Myc-SbCRY2植物表达载体的构建 | 第29页 |
3.1.4 重组载体pEGAD-Myc-SbCRY2的农杆菌转化 | 第29-30页 |
3.2 农杆菌介导的拟南芥遗传转化及阳性植株的鉴定 | 第30-31页 |
3.2.1 Basta抗性筛选SbCRY2转基因阳性植株 | 第30页 |
3.2.2 Westernblot鉴定表达SbCRY2蛋白的转基因阳性植株 | 第30-31页 |
3.3 SbCRY2基因的功能研究 | 第31-37页 |
3.3.1 SbCRY2蛋白一级结构及其与其它物种的CRY2s蛋白的亲缘关系分析 | 第31-33页 |
3.3.2 SbCRY2基因的组织特异性表达分析 | 第33页 |
3.3.3 SbCRY2蓝光特异性地调节转基因拟南芥的去黄化反应 | 第33-34页 |
3.3.4 SbCRY2在短日照下调控开花时间 | 第34-35页 |
3.3.5 SbCRY2过表达的转基因拟南芥种子萌发对ABA超敏感 | 第35页 |
3.3.6 SbCRY2调节转基因拟南芥对盐胁迫的响应 | 第35-36页 |
3.3.7 SbCRY2调节转基因拟南芥ABA信号转导相关基因的表达 | 第36-37页 |
3.4 甜高粱SbCRYS与SbBICS蛋白相互作用的验证 | 第37-42页 |
3.4.1 SbBIC1、SbBIC2基因CDS序列的克隆与分析 | 第37-38页 |
3.4.2 SbBIC1和SbBIC2蛋白一级结构及其与其它物种的BICs蛋白的亲缘关系分析 | 第38-39页 |
3.4.3 SbBIC1和SbBIC2与SbCRYs蓝光依赖的蛋白质相互作用 | 第39-40页 |
3.4.4 SbBIC1和SbBIC2与AtCRY1和AtCRY2蓝光依赖的蛋白质相互作用 | 第40-42页 |
4 讨论 | 第42-44页 |
4.1 甜高粱SbCRY2在调节去黄化反应中发挥一个蓝光受体的功能 | 第42页 |
4.2 SbCRY2在短日照下促进转基因拟南芥开花 | 第42页 |
4.3 SbCRY2调节转基因拟南芥种子萌发对ABA的敏感性 | 第42-43页 |
4.4 甜高粱SbBIC2与甜高粱和拟南芥蓝光受体发生蓝光依赖的蛋白质相互作用 | 第43-44页 |
5 结论 | 第44-45页 |
致谢 | 第45-46页 |
参考文献 | 第46-55页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第55页 |