摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-8页 |
1 绪论 | 第12-21页 |
1.1 研究目的与意义 | 第12-13页 |
1.2 国内外研究进展 | 第13-21页 |
1.2.1 白桦三萜化合物 | 第13-14页 |
1.2.2 植物次级代谢途径的调控 | 第14-16页 |
1.2.3 bHLH转录因子对次生产物合成的调控 | 第16-21页 |
2 白桦BpbHLH7和BpbHLH8基因克隆及生物信息学分析 | 第21-35页 |
2.1 材料与方法 | 第21-23页 |
2.1.1 实验材料 | 第21页 |
2.1.2 实验试剂 | 第21页 |
2.1.3 实验方法 | 第21-23页 |
2.2 结果与分析 | 第23-33页 |
2.2.1 BpHLH7 cDNA全长克隆及生物信息学分析 | 第23-28页 |
2.2.2 BpbHLH8 cDNA全长克隆及生物信息学分析 | 第28-33页 |
2.3 讨论 | 第33-34页 |
2.4 本章小结 | 第34-35页 |
3 白桦BpbHLH7和BpbHLH8基因表达模式分析 | 第35-42页 |
3.1 材料与方法 | 第35-36页 |
3.1.1 植物材料 | 第35页 |
3.1.2 植物激素诱导处理 | 第35页 |
3.1.3 主要酶及化学试剂 | 第35页 |
3.1.4 实验方法 | 第35-36页 |
3.2 结果与分析 | 第36-39页 |
3.2.1 白桦BpbHLH7和BpbHLH8不同月份表达变化 | 第36页 |
3.2.2 白桦BpbHLH7和BpbHLH8组织特异性表达 | 第36-37页 |
3.2.3 BpbHLH7和BpbHLH8基因对植物激素诱导的响应 | 第37-39页 |
3.3 讨论 | 第39-41页 |
3.4 本章小结 | 第41-42页 |
4 白桦BpbHLH7和BpbHLH8基因的启动子克隆与分析 | 第42-54页 |
4.1 材料与方法 | 第42-45页 |
4.1.1 菌种与载体 | 第42页 |
4.1.2 植物材料 | 第42页 |
4.1.3 主要试剂 | 第42页 |
4.1.4 实验方法 | 第42-45页 |
4.2 结果与分析 | 第45-52页 |
4.2.1 BpbHLH7和BpbHLH8基因启动子序列克隆 | 第45页 |
4.2.2 BpbHLH7和BpbHLH8基因启动子序列分析 | 第45-50页 |
4.2.3 pCXGUS-P-PBpbHLH7和pCXGUS-P-PBpbHLH8植物瞬时表达载体的构建和鉴定 | 第50-51页 |
4.2.4 pCXGUS-P-PBpbHLH7和pCXGUS-P-PBpbHLH8载体转化农杆菌的鉴定 | 第51页 |
4.2.5 GUS组织化学染色 | 第51-52页 |
4.3 讨论 | 第52页 |
4.4 本章小结 | 第52-54页 |
5 白桦BpbHLH7和BpbHLH8基因在酿酒酵母中的表达 | 第54-63页 |
5.1 材料及试剂 | 第54-57页 |
5.1.1 菌株和载体 | 第54页 |
5.1.2 主要试剂 | 第54页 |
5.1.3 实验方法 | 第54-57页 |
5.2 结果与分析 | 第57-61页 |
5.2.1 酵母重组子的获得 | 第57-58页 |
5.2.2 重组酵母鲨烯产量的检测 | 第58-60页 |
5.2.3 重组酵母总三萜产量的检测 | 第60页 |
5.2.4 重组酵母鲨烯环氧酶活性的检测 | 第60-61页 |
5.3 讨论 | 第61-62页 |
5.4 本章小结 | 第62-63页 |
6 白桦BpbHLH8过表达及干扰农杆菌工程菌瞬时侵染对白桦三萜合成的影响 | 第63-78页 |
6.1 材料与试剂 | 第63-66页 |
6.1.1 实验材料 | 第63页 |
6.1.2 实验试剂 | 第63页 |
6.1.3 试验方法 | 第63-66页 |
6.2 结果与分析 | 第66-75页 |
6.2.1 pCAMBIA1303-BpbHLH8植物过表达载体的构建和鉴定 | 第66-67页 |
6.2.2 pCAMBIA1303-BpbHLH8过表达载体转化农杆菌的鉴定 | 第67页 |
6.2.3 白桦BpbHLH8基因干扰片段的选择与引物的设计 | 第67-68页 |
6.2.4 BpbHLH8干扰片段的获得以及pRNAi-GG-BpbHLH8干扰载体的构建 | 第68页 |
6.2.5 pRNAi-GG-BpbHLH8干扰载体转化农杆菌的鉴定 | 第68-69页 |
6.2.6 GUS组织化学染色 | 第69-70页 |
6.2.7 pCAMBIA1303-BpbHLH8和pRNAi-GG-BpbHLH8农杆菌介导瞬时侵染白桦组培苗表型分析 | 第70-73页 |
6.2.8 瞬时侵染白桦苗三萜合成关键基因的表达变化 | 第73-74页 |
6.2.9 pCAMBIA1303-BpbHLH8农杆菌瞬时侵染白桦苗三萜含量测定 | 第74-75页 |
6.3 讨论 | 第75-77页 |
6.4 本章小结 | 第77-78页 |
结论 | 第78-80页 |
参考文献 | 第80-94页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第94-95页 |
致谢 | 第95-96页 |