摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
缩略词表 | 第10-12页 |
1 引言 | 第12-14页 |
2 试剂与设备 | 第14-22页 |
2.1 主要试剂 | 第14-15页 |
2.2 仪器与设备 | 第15-16页 |
2.3 主要溶剂的配制 | 第16-22页 |
3 方法 | 第22-32页 |
3.1 免疫组化 | 第22-23页 |
3.2 细胞培养 | 第23-24页 |
3.2.1 细胞传代 | 第23页 |
3.2.2 细胞计数 | 第23-24页 |
3.2.3 细胞复苏 | 第24页 |
3.2.4 细胞冻存 | 第24页 |
3.3 敲低TIPE稳定株的筛选 | 第24-25页 |
3.3.1 慢病毒颗粒的制作与收集 | 第24-25页 |
3.3.2 决定最优嘌呤霉素的浓度 | 第25页 |
3.3.3 慢病毒的感染与筛选 | 第25页 |
3.4 敲低TIPE水平的验证 | 第25-28页 |
3.4.1 WESTERNBLOT检测细胞中TIPE的蛋白表达 | 第25-27页 |
3.4.2 RT-PCR检测基因敲低水平 | 第27-28页 |
3.5 细胞功能方面检测 | 第28-31页 |
3.5.1 MTS实验检测细胞的增殖能力 | 第28-29页 |
3.5.2 检测细胞迁移能力 | 第29页 |
3.5.3 检测细胞侵袭能力 | 第29-30页 |
3.5.4 流式细胞术检测细胞凋亡 | 第30页 |
3.5.5 TUNEL实验测细胞凋亡 | 第30-31页 |
3.6 裸鼠成瘤 | 第31页 |
3.7 统计学分析 | 第31-32页 |
4 结果 | 第32-41页 |
4.1 TIPE 在子宫颈癌组织中的表达高于癌旁组织 | 第32页 |
4.2 TIPE基因敲低水平的验证 | 第32-33页 |
4.3 敲低TIPE影响子宫颈癌细胞的增殖能力 | 第33-34页 |
4.4 敲低TIPE影响子宫颈癌细胞的迁移能力 | 第34-35页 |
4.5 敲低TIPE影响子宫颈癌细胞的侵袭能力 | 第35-36页 |
4.6 敲低TIPE促进子宫颈癌细胞的凋亡 | 第36-38页 |
4.7 敲低TIPE上调p-JNK、Bax及 caspase-3等蛋白水平 | 第38-39页 |
4.8 敲低TIPE抑制子宫颈癌细胞在裸鼠体内的生长 | 第39-41页 |
5 讨论 | 第41-44页 |
6 结论 | 第44-46页 |
参考文献 | 第46-48页 |
综述 | 第48-58页 |
参考文献 | 第54-58页 |
致谢 | 第58-59页 |
读学位期间发表的学术论文及参加学术会议 | 第59-60页 |