| 摘要 | 第3-7页 |
| ABSTRACT | 第7-11页 |
| 第一章 研究背景及文献综述 | 第16-29页 |
| 1.1 人类心脏发育的研究历史 | 第16-21页 |
| 1.2 模式动物与人类心脏发育研究 | 第21-26页 |
| 1.2.1 果蝇模型与心脏发育 | 第22-24页 |
| 1.2.2 斑马鱼模型与心脏发育 | 第24-25页 |
| 1.2.3 小鼠模型与心脏发育 | 第25-26页 |
| 1.3 POPDC家族 | 第26-27页 |
| 1.3.1 POPDC家族的分类 | 第26页 |
| 1.3.2 果蝇bves基因 | 第26页 |
| 1.3.3 斑马鱼POPDC基因 | 第26页 |
| 1.3.4 小鼠POPDC基因 | 第26页 |
| 1.3.5 POPDC跨膜蛋白家族的功能 | 第26-27页 |
| 1.4 本文研究意义与研究目标 | 第27-29页 |
| 第二章 果蝇bves基因敲除与功能研究 | 第29-48页 |
| 2.1 前言 | 第29-30页 |
| 2.1.1 果蝇bves基因 | 第29-30页 |
| 2.2 材料与方法 | 第30-33页 |
| 2.2.1 生物信息学分析的主要软件与数据库 | 第30-31页 |
| 2.2.2 果蝇品系 | 第31页 |
| 2.2.3 工具酶与试剂盒 | 第31-32页 |
| 2.2.4 菌株和质粒 | 第32页 |
| 2.2.5 抗体 | 第32页 |
| 2.2.6 主要实验仪器 | 第32-33页 |
| 2.3 实验方法 | 第33-41页 |
| 2.3.1 常用试剂及培养基配制 | 第33-34页 |
| 2.3.2 果蝇bves基因CRISPR打靶位点选择 | 第34页 |
| 2.3.3 果蝇bves基因bves CRISPR靶质粒构建 | 第34-35页 |
| 2.3.4 果蝇胚胎显微注射 | 第35-41页 |
| 2.4 结果 | 第41-48页 |
| 2.4.1 果蝇bves基因敲除系的建立 | 第41-44页 |
| 2.4.2 果蝇bves基因敲除系的表型分析 | 第44-45页 |
| 2.4.3 bves基因敲除杂合子果蝇成体心脏生理学分析 | 第45-46页 |
| 2.4.4 小结 | 第46-48页 |
| 第三章 斑马鱼POPDC3基因敲低与敲入分析 | 第48-66页 |
| 3.1 前言 | 第48-49页 |
| 3.2 材料和方法 | 第49-56页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第49-51页 |
| 3.2.2 分子克隆常用的实验方法 | 第51-56页 |
| 3.3 结果及分析 | 第56-66页 |
| 3.3.1 POPDC家族基因结构进化分析 | 第56-57页 |
| 3.3.2 斑马鱼POPDC家族基因功能分析 | 第57-60页 |
| 3.3.3 斑马鱼POPDC3基因敲入系的构建 | 第60-63页 |
| 3.3.4 POPDC3-CRISPR敲入斑马鱼突变体的筛选 | 第63-64页 |
| 3.3.5 小结 | 第64-66页 |
| 第四章 小鼠POPDC3基因敲除系的建立与初步研究 | 第66-78页 |
| 4.1 前言 | 第66-67页 |
| 4.2 材料与方法 | 第67-70页 |
| 4.2.1 材料、试剂与设备 | 第67-68页 |
| 4.2.2 实验方法 | 第68-70页 |
| 4.3 结果 | 第70-78页 |
| 4.3.1 小鼠POPDC家族关系和进化分析 | 第70-72页 |
| 4.3.2. 小鼠POPDC3基因敲除系的建立 | 第72-75页 |
| 4.3.3 小鼠POPDC3基因敲除系的初步分析 | 第75-76页 |
| 4.3.4 小结 | 第76-78页 |
| 第五章 讨论 | 第78-84页 |
| 5.1 POPDC家族基因敲除纯合子是否致死的问题 | 第78页 |
| 5.2 POPDC家族基因的进化保守性 | 第78-80页 |
| 5.3 POPDC家族基因的心脏功能进化 | 第80-82页 |
| 5.3.1 果蝇bves基因对心脏发育的调控作用 | 第80页 |
| 5.3.2 斑马鱼POPDC家族成员对心脏发育的调控作用 | 第80-81页 |
| 5.3.3 小鼠POPDC家族成员对心脏发育的调控作用 | 第81-82页 |
| 5.3.4 人类POPDC家族成员对心脏疾病发生的调控作用 | 第82页 |
| 5.4 POPDC家族基因的调控机制进化 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-95页 |
| 附录 | 第95-99页 |
| 附录一 | 第95-97页 |
| 附录二 | 第97-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
