| 摘要 | 第12-15页 |
| Abstract | 第15-18页 |
| 第一章 文献综述 | 第19-29页 |
| 1 前言 | 第19-20页 |
| 2 Adipokinetichormone及其受体研究进展 | 第20-23页 |
| 2.1 Adipokinetichormone的发现与结构特征 | 第20页 |
| 2.2 Adipokinetichormone受体 | 第20-21页 |
| 2.3 Adipokinetichormone信号通路 | 第21页 |
| 2.4 Adipokinetichormone信号系统的生理功能 | 第21-23页 |
| 3 Corazonin及其受体研究进展 | 第23-26页 |
| 3.1 Corazonin的发现与结构特征 | 第23-24页 |
| 3.2 Corazonin受体 | 第24页 |
| 3.3 Corazonin信号系统的生理功能 | 第24-26页 |
| 4 本论文研究目的与意义 | 第26-29页 |
| 第二章 桔小实蝇AKH和Crz及其受体cDNA的克隆与鉴定 | 第29-53页 |
| 第一节 桔小实蝇AKH及其受体cDNA的克隆与序列分析 | 第29-39页 |
| 1 材料与方法 | 第29-32页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第29页 |
| 1.2 主要仪器和试剂 | 第29-30页 |
| 1.3 总RNA的提取 | 第30页 |
| 1.4 去除基因组 | 第30-31页 |
| 1.5 反转录合成cDNA | 第31页 |
| 1.6 巢式PCR扩增 | 第31-32页 |
| 1.7 克隆及测序 | 第32页 |
| 1.8 序列比对及系统发育分析 | 第32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-38页 |
| 2.1 桔小实蝇AKH基因的序列分析 | 第32-34页 |
| 2.2 桔小实蝇AKHR基因的序列分析 | 第34-37页 |
| 2.3 系统发育分析 | 第37-38页 |
| 3 小结 | 第38-39页 |
| 第二节 桔小实蝇Crz及其受体cDNA的克隆与序列分析 | 第39-45页 |
| 1 材料与方法 | 第39页 |
| 2 结果与分析 | 第39-44页 |
| 2.1 桔小实蝇Crz基因的序列分析 | 第39-41页 |
| 2.2 桔小实蝇CrzR基因的序列分析 | 第41-43页 |
| 2.3 系统发育分析 | 第43-44页 |
| 3 小结 | 第44-45页 |
| 第三节 桔小实蝇AKH和Crz受体的异源表达及活性测定 | 第45-51页 |
| 1 材料与方法 | 第45-48页 |
| 1.1 主要仪器和试剂 | 第45-46页 |
| 1.2 表达载体构建 | 第46页 |
| 1.3 细胞培养及转染 | 第46-47页 |
| 1.4 胞内Ca~(2+)流检测 | 第47-48页 |
| 1.5 多肽合成 | 第48页 |
| 1.6 数据统计与分析 | 第48页 |
| 2 结果与分析 | 第48-50页 |
| 2.1 BdAKHR活性测定 | 第48-49页 |
| 2.2 BdCrzR活性测定 | 第49-50页 |
| 3 小结 | 第50-51页 |
| 本章讨论 | 第51-53页 |
| 第三章 桔小实蝇AKH和Crz及其受体的表达分布 | 第53-69页 |
| 第一节 桔小实蝇AKH及其受体的表达模式及亚细胞定位 | 第53-59页 |
| 1 材料与方法 | 第53-56页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第53页 |
| 1.2 主要仪器与试剂 | 第53-54页 |
| 1.3 样品准备 | 第54页 |
| 1.4 定量PCR分析 | 第54-55页 |
| 1.5 免疫组化分析 | 第55-56页 |
| 1.6 数据统计与分析 | 第56页 |
| 2 结果与分析 | 第56-58页 |
| 2.1 BdAKH在不同发育阶段和组织的表达模式 | 第56-57页 |
| 2.2 BdAKHR在不同发育阶段和组织的表达模式 | 第57页 |
| 2.3 BdAKH在幼虫心侧体/咽侧体的免疫组化分析 | 第57-58页 |
| 3 小结 | 第58-59页 |
| 第二节 桔小实蝇Crz及其受体的表达模式及亚细胞定位 | 第59-65页 |
| 1 材料与方法 | 第59页 |
| 2 结果与分析 | 第59-63页 |
| 2.1 BdCrz及其受体在不同发育阶段的表达模式 | 第59-60页 |
| 2.2 BdCrz及其受体不同组织表达模式 | 第60-62页 |
| 2.3 BdCrz在幼虫和成虫脑部的定位分析 | 第62-63页 |
| 3 小结 | 第63-65页 |
| 本章讨论 | 第65-69页 |
| 第四章 桔小实蝇AKH信号系统的生理功能研究 | 第69-89页 |
| 第一节 桔小实蝇AKH信号系统对幼虫生长发育的调控作用 | 第69-75页 |
| 1 材料与方法 | 第69-71页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第69页 |
| 1.2 主要仪器和试剂 | 第69页 |
| 1.3 dsRNA的制备 | 第69-71页 |
| 1.4 RNAi | 第71页 |
| 1.5 多肽注射 | 第71页 |
| 1.6 表型观察与记录 | 第71页 |
| 1.7 数据统计与分析 | 第71页 |
| 2 结果与分析 | 第71-74页 |
| 2.1 沉默效率检测 | 第71-72页 |
| 2.2 BdAKH沉默后的幼虫化蛹时间及蛹重 | 第72-73页 |
| 2.3 AKH多肽注射后的幼虫化蛹时间及蛹重 | 第73-74页 |
| 3 小结 | 第74-75页 |
| 第二节 桔小实蝇AKH信号系统对成虫交配行为的调控作用 | 第75-85页 |
| 1 材料与方法 | 第75-77页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第75页 |
| 1.2 主要仪器和试剂 | 第75页 |
| 1.3 dsRNA的制备 | 第75-76页 |
| 1.4 RNAi | 第76页 |
| 1.5 不同营养条件的设置 | 第76页 |
| 1.6 行为学观察和记录 | 第76页 |
| 1.7 吊飞试验 | 第76-77页 |
| 1.8 甘油三酯含量的测定 | 第77页 |
| 1.9 尼罗红(Nile-red)染色 | 第77页 |
| 1.10 数据统计与分析 | 第77页 |
| 2 结果与分析 | 第77-84页 |
| 2.1 沉默效率检测 | 第77-78页 |
| 2.2 干扰BdAKHR表达对脂质含量的影响 | 第78-80页 |
| 2.3 干扰BdAKHR表达对雄虫交配行为的影响 | 第80页 |
| 2.4 干扰BdAKHR表达对雌虫交配行为和产卵量的影响 | 第80-81页 |
| 2.5 饥饿处理后的食物拯救效果测定 | 第81-82页 |
| 2.6 干扰BdAKHR表达后的飞行能力 | 第82-83页 |
| 2.7 饥饿条件下BdAKHR基因表达量的变化 | 第83-84页 |
| 3 小结 | 第84-85页 |
| 本章讨论 | 第85-89页 |
| 第五章 桔小实蝇Crz信号系统的生理功能研究 | 第89-105页 |
| 第一节 桔小实蝇Crz信号系统对幼虫变态发育的调控作用 | 第89-98页 |
| 1 材料与方法 | 第89-91页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第89页 |
| 1.2 主要仪器和试剂 | 第89页 |
| 1.3 dsRNA的制备 | 第89-90页 |
| 1.4 RNAi | 第90页 |
| 1.5 结扎及多肽注射 | 第90-91页 |
| 1.6 表型观察与记录 | 第91页 |
| 1.7 数据统计与分析 | 第91页 |
| 2 结果与分析 | 第91-96页 |
| 2.1 沉默效率检测 | 第91页 |
| 2.2 干扰 BdCrz 或 BdCrzR 表达对交配行为和产卵量的影响 | 第91-92页 |
| 2.3 干扰BdCrzR表达对蛹重的影响 | 第92-93页 |
| 2.4 多次注射dsRNA对化蛹率的影响 | 第93-95页 |
| 2.5 干扰BdCrzR表达对通路基因表达量的变化 | 第95页 |
| 2.6 结扎及多肽注射 | 第95-96页 |
| 3 小结 | 第96-98页 |
| 第二节 桔小实蝇Crz信号系统对成虫交配行为的调控作用 | 第98-103页 |
| 1 材料与方法 | 第98-99页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第98页 |
| 1.2 主要仪器和试剂 | 第98页 |
| 1.3 dsRNA的制备 | 第98页 |
| 1.4 RNAi | 第98页 |
| 1.5 行为学观察和记录 | 第98页 |
| 1.6 DAPI染色 | 第98-99页 |
| 1.7 数据统计与分析 | 第99页 |
| 2 结果与分析 | 第99-101页 |
| 2.1 沉默效率检测 | 第99-100页 |
| 2.2 干扰BdCrz或BdCrzR表达对交配行为和产卵量的影响 | 第100页 |
| 2.3 干扰BdCrz表达对雄虫精细胞转移的影响 | 第100-101页 |
| 3 小结 | 第101-103页 |
| 本章讨论 | 第103-105页 |
| 第六章 主要结果结论、创新点及研究展望 | 第105-109页 |
| 1 主要结果结论 | 第105-107页 |
| 1.1 克隆了桔小实蝇AKH和Crz及其受体的cDNA序列并验证受体的功能性 | 第105页 |
| 1.2 解析了桔小实蝇AKH和Crz及其受体基因的表达模式和亚细胞定位 | 第105-106页 |
| 1.3 桔小实蝇AKH信号系统影响幼虫的生长发育和成虫的交配行为 | 第106页 |
| 1.4 桔小实蝇Crz信号系统调控幼虫-蛹的转化及蛹的形成和雄虫交配及生殖行为 | 第106-107页 |
| 2 创新点 | 第107页 |
| 3 展望 | 第107-109页 |
| 参考文献 | 第109-125页 |
| 在读期间发表论文及参研课题情况 | 第125-127页 |
| 发表期刊论文目录 | 第125-126页 |
| 参会情况 | 第126页 |
| 申请专利 | 第126页 |
| 参研课题情况 | 第126-127页 |
| 致谢 | 第127-128页 |
