| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 缩略语表 | 第8-12页 |
| 第一章 引言 | 第12-24页 |
| 1.1 心肌缺血再灌注损伤 | 第12-15页 |
| 1.1.1 心肌缺血再灌注损伤的发生发展 | 第12-13页 |
| 1.1.2 心肌缺血再灌注损伤的机制研究 | 第13-15页 |
| 1.1.3 心肌缺血再灌注损伤的调控 | 第15页 |
| 1.2 HBOCs的研究进展 | 第15-18页 |
| 1.2.1 HBOCs的特点及分类 | 第15-16页 |
| 1.2.2 pPolyHb | 第16-18页 |
| 1.3 线粒体自噬与I/R损伤 | 第18-20页 |
| 1.3.1 线粒体自噬的保护作用 | 第18页 |
| 1.3.2 线粒体自噬通路—PINKl/Parkin通路 | 第18-20页 |
| 1.3.3 pPolyHb与线粒体自噬 | 第20页 |
| 1.4 PI3K-Akt信号通路 | 第20-22页 |
| 1.4.1 PI3K-Akt信号通路与细胞凋亡 | 第20-22页 |
| 1.4.2 PI3K-Akt信号通路的保护作用 | 第22页 |
| 1.5 本文研究的目的及意义 | 第22-24页 |
| 第二章 pPolyHb对心肌缺血再灌注损伤的影响 | 第24-34页 |
| 2.1 引言 | 第24页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第24-25页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第24-25页 |
| 2.2.2 仪器设备 | 第25页 |
| 2.3 实验方法 | 第25-27页 |
| 2.3.1 H9C2大鼠心肌细胞培养 | 第25-26页 |
| 2.3.2 构建H9C2心肌细胞缺氧复氧损伤模型 | 第26页 |
| 2.3.3 培养观察H9C2大鼠心肌细胞状态 | 第26页 |
| 2.3.4 H9C2细胞生存活力的检测 | 第26页 |
| 2.3.5 乳酸脱氢酶(LDH)活性检测 | 第26页 |
| 2.3.6 肌酸激酶(CK)活性检测 | 第26-27页 |
| 2.4 结果分析 | 第27-32页 |
| 2.4.1 H9C2心肌细胞形态改变 | 第27-28页 |
| 2.4.2 检测H9C2细胞生存活力 | 第28-30页 |
| 2.4.3 LDH活性检测结果 | 第30-31页 |
| 2.4.4 肌酸激酶(CK)活性检测结果 | 第31-32页 |
| 2.5 讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 pPolyHb通过PI3K-Akt信号通路对缺血再灌注损伤的影响 | 第34-46页 |
| 3.1 引言 | 第34页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第34-35页 |
| 3.2.1 实验材料 | 第34-35页 |
| 3.2.2 仪器设备 | 第35页 |
| 3.3 主要溶液配制 | 第35-36页 |
| 3.4 实验方法 | 第36-38页 |
| 3.4.1 实验分组 | 第36页 |
| 3.4.2 AnnexinV-FITC检测细胞凋亡 | 第36页 |
| 3.4.3 Westernblot检测凋亡相关蛋白和信号通路蛋白的表达 | 第36-38页 |
| 3.5 结果分析 | 第38-44页 |
| 3.5.1 AnnexinV-FITC/PI双染法检测各个实验组大鼠心肌细胞凋亡率 | 第38-40页 |
| 3.5.2 Westernblotting检测蛋白Bax、Bcl-2蛋白的表达 | 第40-42页 |
| 3.5.3 Westernblotting检测蛋白Caspase-3蛋白的表达 | 第42-43页 |
| 3.5.4 检测各实验组总Akt蛋白,p-Akt蛋白的表达 | 第43-44页 |
| 3.6 讨论 | 第44-46页 |
| 第四章 pPolyHb对心肌细胞缺血再灌注炎症因子及NF-κBp65表达的影响 | 第46-52页 |
| 4.1 引言 | 第46页 |
| 4.2 实验材料与仪器 | 第46-47页 |
| 4.2.1 实验材料 | 第46-47页 |
| 4.2.2 仪器设备 | 第47页 |
| 4.3 实验方法 | 第47-48页 |
| 4.3.1 ELISA方法测定炎症因子TNF-α,IL-1β和TGF-β表达 | 第47页 |
| 4.3.2 Westernblot法检测NF-κB信号通路中P65蛋白表达 | 第47-48页 |
| 4.4 结果分析 | 第48-51页 |
| 4.4.1 pPolyHb对H9C2心肌细胞缺血再灌注损伤释放炎症因子的影响 | 第48-50页 |
| 4.4.2 检测NF-κB信号通路中P-65蛋白表达 | 第50-51页 |
| 4.5 讨论 | 第51-52页 |
| 第五章 pPolyHb诱导线粒体自噬机制研究 | 第52-64页 |
| 5.1 引言 | 第52页 |
| 5.2 实验材料与仪器 | 第52-53页 |
| 5.2.1 实验材料 | 第52-53页 |
| 5.2.2 仪器设备 | 第53页 |
| 5.3 实验方法 | 第53-54页 |
| 5.3.1 实验分组 | 第53-54页 |
| 5.3.2 pPolyHb预处理对大鼠肌细胞中I/R诱导的线粒体自噬的影响 | 第54页 |
| 5.3.3 线粒体自噬通路被抑制后p-Akt蛋白的表达 | 第54页 |
| 5.4 结果分析 | 第54-61页 |
| 5.4.1 pPolyHb复氧对I/R过程中H9C2心肌细胞自噬蛋白表达的影响 | 第54-57页 |
| 5.4.2 线粒体自噬抑制后对细胞凋亡的影响 | 第57-58页 |
| 5.4.3 线粒体自噬抑制后凋亡蛋白Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达结果 | 第58-60页 |
| 5.4.4 线粒体自噬通路被抑制后p-Akt蛋白的表达结果 | 第60-61页 |
| 5.5 讨论 | 第61-64页 |
| 结论 | 第64-66页 |
| 参考文献 | 第66-74页 |
| 攻读硕士学位期间取得的科研成果 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76-77页 |
