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玉米籽粒发育基因Emp11及ZmSmk3的克隆及功能分析

摘要第7-8页
Abstract第8-9页
缩略词表第10-11页
1 前言第11-47页
    1.1 种子发育对作物产量及粮食安全具有重大意义第11-12页
    1.2 种子发育研究进展第12-36页
        1.2.1 拟南芥种子发育研究进展第12-18页
        1.2.2 水稻种子发育研究进展第18-22页
        1.2.3 玉米籽粒发育研究进展第22-36页
    1.3 PPR蛋白家族研究进展第36-40页
        1.3.1 PPR蛋白的生物学功能第37-38页
        1.3.2 影响玉米籽粒发育的PPR基因第38-40页
    1.4 mTERF蛋白家族研究进展第40-46页
        1.4.1 影响动物发育的MTERF基因第41-45页
        1.4.2 影响植物发育的mTERF基因第45-46页
    1.5 本研究的目的与意义第46-47页
2 材料与方法第47-54页
    2.1 实验材料第47-48页
        2.1.1 植物材料第47页
        2.1.2 菌株和载体第47-48页
    2.2 实验方法第48-54页
        2.2.1 细胞学观察第48-49页
        2.2.2 基因型鉴定第49页
        2.2.3 TAIL-PCR定位ZmSmk3第49-50页
        2.2.4 RNA的提取及基因表达分析第50页
        2.2.5 基因结构分析第50页
        2.2.6 亚细胞定位第50页
        2.2.7 原位杂交第50-51页
        2.2.8 线粒体复合体的分离及复合体Ⅰ的活性分析第51-52页
        2.2.9 WesternBlot第52页
        2.2.10 RNAi转基因第52页
        2.2.11 转录组测序第52-53页
        2.2.12 酵母双杂交点对点验证第53-54页
3 结果与分析第54-82页
    3.1 籽粒发育基因Emp11的克隆与功能解析第54-69页
        3.1.1 玉米Emp11籽粒突变体的表型鉴定第54-57页
        3.1.2 Emp11基因的克隆第57-61页
        3.1.3 Emp11基因的表达分析第61-62页
        3.1.4 Emp11影响线粒体基因nad1内含子的剪切第62-65页
        3.1.5 Emp11影响线粒体复合体Ⅰ的形成第65-67页
        3.1.6 B73BC_2F_2分离果穗上籽粒的缺陷表型部分恢复第67-69页
    3.2 籽粒发育基因ZmSmk3的克隆与功能解析第69-82页
        3.2.1 ZmSmk3基因的克隆第69-70页
        3.2.2 ZmSmk3基因的表达分析第70-72页
        3.2.3 ZmSmk3影响线粒体形态的完整第72页
        3.2.4 ZmSmk3影响线粒体复合体Ⅰ的形成第72-74页
        3.2.5 ZmSmk3影响线粒体基因nad4及nad1内含子的剪切第74-76页
        3.2.6 Zmsmk3突变体中淀粉合成及醇溶蛋白相关基因表达下调第76-79页
        3.2.7 ZmSmk3作用机理的探究第79页
        3.2.8 ZmSmk3对逆境的响应第79-82页
4 讨论第82-92页
    4.1 Emp11和ZmSmk3均影响线粒体基因内含子的剪切第82-84页
    4.2 Emp11和ZmSmk3均影响线粒体结构的完整性及氧化供能第84-85页
    4.3 Emp11和ZmSmk3对籽粒及植株的生长发育具有重要作用第85-87页
    4.4 PPR蛋白对植株生长发育的影响第87-89页
    4.5 mTERF对植株生长发育的影响第89-92页
参考文献第92-124页
附录第124-141页
    附录 A第124-140页
        附录一 石蜡切片观察籽粒发育第124页
        附录二 扫描电镜第124-125页
        附录三 CTAB提取DNA第125-126页
        附录四 Emp11相关引物第126-127页
        附录五 ZmSmk3相关引物第127-128页
        附录六 Trizol法提取植物基因组RNA第128页
        附录七 总RNA纯化第128-129页
        附录八 反转录体系及程序第129页
        附录九 qRT-PCR(Quantitative real timePCR)第129-130页
        附录十 亚细胞定位第130-131页
        附录十一 原位杂交第131-133页
        附录十二 Western Blotting鉴定目的蛋白第133-136页
        附录十三 差异表达基因的GO注释第136-140页
    附录 B第140-141页
        作者简历第140页
        硕博期间发表论文第140页
        待投稿论文第140-141页
致谢第141-143页

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