摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
1 前言 | 第11-47页 |
1.1 种子发育对作物产量及粮食安全具有重大意义 | 第11-12页 |
1.2 种子发育研究进展 | 第12-36页 |
1.2.1 拟南芥种子发育研究进展 | 第12-18页 |
1.2.2 水稻种子发育研究进展 | 第18-22页 |
1.2.3 玉米籽粒发育研究进展 | 第22-36页 |
1.3 PPR蛋白家族研究进展 | 第36-40页 |
1.3.1 PPR蛋白的生物学功能 | 第37-38页 |
1.3.2 影响玉米籽粒发育的PPR基因 | 第38-40页 |
1.4 mTERF蛋白家族研究进展 | 第40-46页 |
1.4.1 影响动物发育的MTERF基因 | 第41-45页 |
1.4.2 影响植物发育的mTERF基因 | 第45-46页 |
1.5 本研究的目的与意义 | 第46-47页 |
2 材料与方法 | 第47-54页 |
2.1 实验材料 | 第47-48页 |
2.1.1 植物材料 | 第47页 |
2.1.2 菌株和载体 | 第47-48页 |
2.2 实验方法 | 第48-54页 |
2.2.1 细胞学观察 | 第48-49页 |
2.2.2 基因型鉴定 | 第49页 |
2.2.3 TAIL-PCR定位ZmSmk3 | 第49-50页 |
2.2.4 RNA的提取及基因表达分析 | 第50页 |
2.2.5 基因结构分析 | 第50页 |
2.2.6 亚细胞定位 | 第50页 |
2.2.7 原位杂交 | 第50-51页 |
2.2.8 线粒体复合体的分离及复合体Ⅰ的活性分析 | 第51-52页 |
2.2.9 WesternBlot | 第52页 |
2.2.10 RNAi转基因 | 第52页 |
2.2.11 转录组测序 | 第52-53页 |
2.2.12 酵母双杂交点对点验证 | 第53-54页 |
3 结果与分析 | 第54-82页 |
3.1 籽粒发育基因Emp11的克隆与功能解析 | 第54-69页 |
3.1.1 玉米Emp11籽粒突变体的表型鉴定 | 第54-57页 |
3.1.2 Emp11基因的克隆 | 第57-61页 |
3.1.3 Emp11基因的表达分析 | 第61-62页 |
3.1.4 Emp11影响线粒体基因nad1内含子的剪切 | 第62-65页 |
3.1.5 Emp11影响线粒体复合体Ⅰ的形成 | 第65-67页 |
3.1.6 B73BC_2F_2分离果穗上籽粒的缺陷表型部分恢复 | 第67-69页 |
3.2 籽粒发育基因ZmSmk3的克隆与功能解析 | 第69-82页 |
3.2.1 ZmSmk3基因的克隆 | 第69-70页 |
3.2.2 ZmSmk3基因的表达分析 | 第70-72页 |
3.2.3 ZmSmk3影响线粒体形态的完整 | 第72页 |
3.2.4 ZmSmk3影响线粒体复合体Ⅰ的形成 | 第72-74页 |
3.2.5 ZmSmk3影响线粒体基因nad4及nad1内含子的剪切 | 第74-76页 |
3.2.6 Zmsmk3突变体中淀粉合成及醇溶蛋白相关基因表达下调 | 第76-79页 |
3.2.7 ZmSmk3作用机理的探究 | 第79页 |
3.2.8 ZmSmk3对逆境的响应 | 第79-82页 |
4 讨论 | 第82-92页 |
4.1 Emp11和ZmSmk3均影响线粒体基因内含子的剪切 | 第82-84页 |
4.2 Emp11和ZmSmk3均影响线粒体结构的完整性及氧化供能 | 第84-85页 |
4.3 Emp11和ZmSmk3对籽粒及植株的生长发育具有重要作用 | 第85-87页 |
4.4 PPR蛋白对植株生长发育的影响 | 第87-89页 |
4.5 mTERF对植株生长发育的影响 | 第89-92页 |
参考文献 | 第92-124页 |
附录 | 第124-141页 |
附录 A | 第124-140页 |
附录一 石蜡切片观察籽粒发育 | 第124页 |
附录二 扫描电镜 | 第124-125页 |
附录三 CTAB提取DNA | 第125-126页 |
附录四 Emp11相关引物 | 第126-127页 |
附录五 ZmSmk3相关引物 | 第127-128页 |
附录六 Trizol法提取植物基因组RNA | 第128页 |
附录七 总RNA纯化 | 第128-129页 |
附录八 反转录体系及程序 | 第129页 |
附录九 qRT-PCR(Quantitative real timePCR) | 第129-130页 |
附录十 亚细胞定位 | 第130-131页 |
附录十一 原位杂交 | 第131-133页 |
附录十二 Western Blotting鉴定目的蛋白 | 第133-136页 |
附录十三 差异表达基因的GO注释 | 第136-140页 |
附录 B | 第140-141页 |
作者简历 | 第140页 |
硕博期间发表论文 | 第140页 |
待投稿论文 | 第140-141页 |
致谢 | 第141-143页 |