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肝癌干样细胞的分离、培养及PI3K/AKT信号通路对肝癌细胞系MHCC-97H中CD90+干样细胞的影响

个人简历第3-6页
中文摘要第6-9页
英文摘要第9-13页
前言第14-16页
1 实验材料和实验主要器材第16-18页
    1.1 实验材料第16-17页
    1.2 实验主要器材第17-18页
2 实验方法第18-27页
    2.1 细胞的悬浮球培养及传代第18-19页
    2.2 糖原染色第19页
    2.3 细胞周期检测第19-20页
    2.4 流式分选肝癌干细胞标志物CD90的表达量第20-21页
    2.5 MTT法检测各组细胞加入LY294002后的增值率第21页
    2.6 流式细胞仪分选加入LY294002后CD90+的表达量变化第21页
    2.7 CD90+亚群细胞和CD90-亚群细胞中肝癌干细胞相关干细胞基因CD90、NANOG、SHP2的qPCR的表达第21-24页
    2.8 CD90+亚群细胞和CD90-亚群细胞中CD90、P-AKT、SHP2蛋白的免疫印迹表达第24页
    2.9 平板克隆实验第24-25页
    2.10 裸鼠体内成瘤实验第25页
    2.11 免疫组化步奏如下:第25-27页
    2.12 统计学分析第27页
3 结果第27-42页
    3.1 肝癌细胞株贴壁培养5天传代第27-28页
    3.2 肝癌细胞株成球培养7-9天可形稳定球状细胞并传代第28-29页
    3.3 糖原染色结果第29-30页
    3.4 细胞周期检测球形细胞和贴壁细胞的周期第30-31页
    3.5 流式细胞仪分析CD90+标记物在贴壁培养细胞和悬浮成球培养细胞中,分别的含量第31-32页
    3.6 LY294002加入CD90+亚群细胞和CD90-亚群细胞后分别增值率的变化第32-33页
    3.7 肝癌干细胞标志物CD90在悬浮成球细胞中含量及加入LY294002后CD90+表达量变化第33-34页
    3.8 CD90+亚群细胞和CD90-亚群细胞中肝癌干细胞相关基因CD90,NANOG,SHP2的qPCR表达量分析第34-36页
    3.9 CD90+亚群细胞和CD90-亚群细胞中CD90、P-AKT、AKT、SHP2蛋白的免疫印迹表达量第36-37页
    3.10 平板克隆形成实验第37-39页
    3.11 裸鼠体内成瘤实验第39-41页
    3.12 CD90+亚群细胞和CD90-亚群细胞和分别加入LY294002后的免疫组化第41-42页
4 讨论第42-50页
参考文献第50-57页
附录:主要中英文缩略词对照第57-58页
综述第58-73页
    参考文献第69-73页
致谢第73-74页
硕士期间发表的论文第74页

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