| 个人简历 | 第3-6页 |
| 中文摘要 | 第6-9页 |
| 英文摘要 | 第9-13页 |
| 前言 | 第14-16页 |
| 1 实验材料和实验主要器材 | 第16-18页 |
| 1.1 实验材料 | 第16-17页 |
| 1.2 实验主要器材 | 第17-18页 |
| 2 实验方法 | 第18-27页 |
| 2.1 细胞的悬浮球培养及传代 | 第18-19页 |
| 2.2 糖原染色 | 第19页 |
| 2.3 细胞周期检测 | 第19-20页 |
| 2.4 流式分选肝癌干细胞标志物CD90的表达量 | 第20-21页 |
| 2.5 MTT法检测各组细胞加入LY294002后的增值率 | 第21页 |
| 2.6 流式细胞仪分选加入LY294002后CD90+的表达量变化 | 第21页 |
| 2.7 CD90+亚群细胞和CD90-亚群细胞中肝癌干细胞相关干细胞基因CD90、NANOG、SHP2的qPCR的表达 | 第21-24页 |
| 2.8 CD90+亚群细胞和CD90-亚群细胞中CD90、P-AKT、SHP2蛋白的免疫印迹表达 | 第24页 |
| 2.9 平板克隆实验 | 第24-25页 |
| 2.10 裸鼠体内成瘤实验 | 第25页 |
| 2.11 免疫组化步奏如下: | 第25-27页 |
| 2.12 统计学分析 | 第27页 |
| 3 结果 | 第27-42页 |
| 3.1 肝癌细胞株贴壁培养5天传代 | 第27-28页 |
| 3.2 肝癌细胞株成球培养7-9天可形稳定球状细胞并传代 | 第28-29页 |
| 3.3 糖原染色结果 | 第29-30页 |
| 3.4 细胞周期检测球形细胞和贴壁细胞的周期 | 第30-31页 |
| 3.5 流式细胞仪分析CD90+标记物在贴壁培养细胞和悬浮成球培养细胞中,分别的含量 | 第31-32页 |
| 3.6 LY294002加入CD90+亚群细胞和CD90-亚群细胞后分别增值率的变化 | 第32-33页 |
| 3.7 肝癌干细胞标志物CD90在悬浮成球细胞中含量及加入LY294002后CD90+表达量变化 | 第33-34页 |
| 3.8 CD90+亚群细胞和CD90-亚群细胞中肝癌干细胞相关基因CD90,NANOG,SHP2的qPCR表达量分析 | 第34-36页 |
| 3.9 CD90+亚群细胞和CD90-亚群细胞中CD90、P-AKT、AKT、SHP2蛋白的免疫印迹表达量 | 第36-37页 |
| 3.10 平板克隆形成实验 | 第37-39页 |
| 3.11 裸鼠体内成瘤实验 | 第39-41页 |
| 3.12 CD90+亚群细胞和CD90-亚群细胞和分别加入LY294002后的免疫组化 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-50页 |
| 参考文献 | 第50-57页 |
| 附录:主要中英文缩略词对照 | 第57-58页 |
| 综述 | 第58-73页 |
| 参考文献 | 第69-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第74页 |
