摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
缩略词 | 第10-11页 |
第1章 文献综述 | 第11-22页 |
1.1 卵转铁蛋白国内外研究概况 | 第11-14页 |
1.1.1 卵转铁蛋白的结构和理化性质 | 第11-12页 |
1.1.2 卵转铁蛋白的生理活性 | 第12-14页 |
1.1.2.1 转运铁离子 | 第12-13页 |
1.1.2.2 抗菌抗病毒活性 | 第13页 |
1.1.2.3 抗氧化作用 | 第13页 |
1.1.2.4 免疫调节功能 | 第13-14页 |
1.1.2.5 抗肿瘤作用 | 第14页 |
1.2 树突状细胞的生物学特性 | 第14-17页 |
1.2.1 DCs的来源和分布 | 第14-15页 |
1.2.2 DCs的表型 | 第15页 |
1.2.3 DCs对抗原的加工和递呈能力 | 第15-16页 |
1.2.3.1 外源性抗原的加工和呈递——溶酶体途径 | 第15-16页 |
1.2.3.2 内源性抗原的加工和递呈——蛋白酶体途径 | 第16页 |
1.2.3.3 交叉递呈 | 第16页 |
1.2.4 DCs的分泌物 | 第16-17页 |
1.2.5 DCs的迁移 | 第17页 |
1.2.6 DCs的免疫调节功能 | 第17页 |
1.2.7 DCs与免疫治疗 | 第17页 |
1.3 DCS的体外培养 | 第17-18页 |
1.3.1 骨髓源DCs培养方法的建立 | 第18页 |
1.3.2 树突状细胞培养中纯化方法的优化 | 第18页 |
1.4 树突状细胞的信号转导途径 | 第18-20页 |
1.5 卵转铁蛋白对树突状细胞成熟及免疫调节功能的研究进展 | 第20-21页 |
1.6 课题来源及研究目的与意义 | 第21-22页 |
1.6.1 课题来源 | 第21页 |
1.6.2 研究目的与意义 | 第21-22页 |
第2章 卵转铁蛋白对树突状细胞成熟的影响 | 第22-29页 |
2.1 试验材料与仪器 | 第22-23页 |
2.1.1 试验动物 | 第22页 |
2.1.2 试剂 | 第22页 |
2.1.3 主要仪器设备 | 第22-23页 |
2.2 试验方法 | 第23-24页 |
2.2.1 试剂配制 | 第23页 |
2.2.2 DCs的分离纯化 | 第23页 |
2.2.3 OVT对DCs细胞毒性试验 | 第23-24页 |
2.2.4 OVT对细胞表型的影响 | 第24页 |
2.2.5 统计学分析 | 第24页 |
2.3 结果与讨论 | 第24-28页 |
2.3.1 OVT对DCs的细胞毒性实验 | 第24-25页 |
2.3.2 OVT对DCs形态的影响 | 第25-26页 |
2.3.3 OVT对DCs表型的影响 | 第26-28页 |
2.4 小结 | 第28-29页 |
第3章 卵转铁蛋白对DCS刺激T细胞增殖的研究 | 第29-35页 |
3.1 试验材料与仪器 | 第29-30页 |
3.1.1 试验动物 | 第29页 |
3.1.2 试验试剂和耗材 | 第29-30页 |
3.1.3 试验设备 | 第30页 |
3.2 试验方法 | 第30-31页 |
3.2.1 OVT刺激DCs成熟 | 第30页 |
3.2.2 小鼠脾脏淋巴细胞的分离 | 第30页 |
3.2.3 成熟DCs引发混合淋巴细胞反应(MLRs) | 第30-31页 |
3.2.4 统计学分析 | 第31页 |
3.3 试验结果及讨论 | 第31-34页 |
3.3.1 不同浓度OVT刺激成熟的DCs引发同种异体T细胞增殖的能力 | 第31-32页 |
3.3.2 LPS与不同浓度OVT刺激成熟的DCs引发同种异体T细胞增殖的能力 | 第32-34页 |
3.4 小结 | 第34-35页 |
第4章 卵转铁蛋白对DCS细胞因子及信号分子的影响 | 第35-51页 |
4.1 试验材料与设备 | 第35-36页 |
4.1.1 试验动物 | 第35页 |
4.1.2 试验试剂及耗材 | 第35-36页 |
4.1.3 试验设备 | 第36页 |
4.2 试验方法 | 第36-40页 |
4.2.1 试验试剂配制 | 第36-37页 |
4.2.2 DCs细胞上清液中细胞因子的测定 | 第37-38页 |
4.2.3 成熟DCs蛋白的提取 | 第38页 |
4.2.4 蛋白含量的测定 | 第38页 |
4.2.5 蛋白变性 | 第38页 |
4.2.6 SDS-PAGE的制备 | 第38页 |
4.2.7 电泳 | 第38-39页 |
4.2.8 湿法转膜及检测 | 第39页 |
4.2.9 封闭 | 第39页 |
4.2.10孵育抗体和DAB显色 | 第39-40页 |
4.2.11凝胶成像分析及数据分析 | 第40页 |
4.3 结果与讨论 | 第40-50页 |
4.3.1 TNF-α 细胞因子的表达量 | 第40-41页 |
4.3.1.1 TNF-α 标曲的绘制 | 第40页 |
4.3.1.2 OVT单独刺激成熟的DCs产生TNF-α 的量 | 第40-41页 |
4.3.1.3 LPS与不同浓度OVT共刺激DCs产生TNF-α 的量 | 第41页 |
4.3.2 IL-10含量测定 | 第41-43页 |
4.3.2.1 IL-10标准曲线的绘制 | 第41-42页 |
4.3.2.2 OVT单独刺激DCs产生IL-10的量 | 第42页 |
4.3.2.3 LPS与不同浓度OVT共刺激DCs产生IL-10的量 | 第42-43页 |
4.3.3 IL-12p70含量的测定 | 第43-45页 |
4.3.3.1 IL-12p70标准曲线绘制 | 第43-44页 |
4.3.3.2 不同浓度OVT单独刺激DCs产生IL-12p70的量 | 第44页 |
4.3.3.3 LPS与不同浓度OVT共刺激DCs产生IL-12p70的量 | 第44-45页 |
4.3.4 MAPK信号传导路径中三种蛋白质及其磷酸化蛋白含量测定 | 第45-50页 |
4.3.4.1 总蛋白提取纯度及完整性检测 | 第45-46页 |
4.3.4.2 p38MAPK和p-p38MAPK蛋白凝胶成像图和定量分析 | 第46-47页 |
4.3.4.3 JNK和p-JNK蛋白含量的凝胶成像图和定量分析 | 第47-48页 |
4.3.4.4 ERK和p-ERK蛋白含量的凝胶成像图和定量分析 | 第48-50页 |
4.4 小结 | 第50-51页 |
结论与展望 | 第51-52页 |
1 结论 | 第51页 |
2 展望 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-60页 |
致谢 | 第60-61页 |
攻读硕士学位期间的研究成果 | 第61页 |
1、论文发表情况 | 第61页 |
2、参与科研项目情况 | 第61页 |