| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-10页 |
| 缩略词 | 第10-11页 |
| 第1章 引言 | 第11-23页 |
| ·RIPs的分类 | 第11-12页 |
| ·RIPs在自然界的分布 | 第12-14页 |
| ·RIPs酶学活性 | 第14-15页 |
| ·RNA N-糖苷酶活性 | 第14页 |
| ·RNA水解酶活性 | 第14页 |
| ·其它酶学活性 | 第14-15页 |
| ·RIPs在细胞内的转运 | 第15-17页 |
| ·Ricin的逆向运输途径 | 第16页 |
| ·RIPs在神经系统的逆向运输 | 第16-17页 |
| ·其他转运途径 | 第17页 |
| ·Ⅱ型RIPs的类型 | 第17-18页 |
| ·RIPs诱导的细胞凋亡 | 第18-19页 |
| ·RIPs在医学上的应用 | 第19-21页 |
| ·过敏反应 | 第19页 |
| ·抗病毒活性 | 第19-20页 |
| ·RIPs抗肿瘤活性 | 第20-21页 |
| ·总结和展望 | 第21-22页 |
| ·本实验的目的和意义 | 第22-23页 |
| 第2章 茶树Ⅱ型RIP启动子克隆 | 第23-34页 |
| ·材料与仪器 | 第24-25页 |
| ·实验材料采集 | 第24页 |
| ·菌株和载体 | 第24页 |
| ·生化试剂与仪器 | 第24页 |
| ·培养基和溶液 | 第24-25页 |
| ·试验方法 | 第25-28页 |
| ·茶树基因组DNA的提取 | 第25页 |
| ·TAIL-PCR克隆启动子 | 第25-26页 |
| ·目的启动子DNA片段的回收 | 第26-27页 |
| ·连接 | 第27页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第27-28页 |
| ·菌液PCR检测 | 第28页 |
| ·结果与分析 | 第28-31页 |
| ·Pre TAIL-PCR结果分析 | 第28-29页 |
| ·Primary TAIL-PCR结果分析 | 第29页 |
| ·Secondary TAIL-PCR结果分析 | 第29-31页 |
| ·讨论和分析 | 第31-34页 |
| 第3章 CsRIPI A链基因的原核表达 | 第34-44页 |
| ·材料与仪器 | 第34-36页 |
| ·菌株和载体 | 第34页 |
| ·试剂与仪器 | 第34-35页 |
| ·培养基和溶液 | 第35-36页 |
| ·试验方法 | 第36-39页 |
| ·目的DNA片段的克隆 | 第36-37页 |
| ·CsRIPI全长基因、A链基因和pET28a载体的双酶切 | 第37页 |
| ·连接 | 第37页 |
| ·转化 | 第37页 |
| ·阳性克隆的PCR鉴定 | 第37-38页 |
| ·Ecoli.BL21的转化 | 第38页 |
| ·目的基因的诱导表达 | 第38页 |
| ·表达蛋白可溶性分析 | 第38-39页 |
| ·结果 | 第39-43页 |
| ·目的蛋白在不同时刻的表达 | 第42页 |
| ·表达蛋白可溶性分析 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| 第4章 CsRIPI基因的烟草转化及N-糖苷酶活性的鉴定 | 第44-55页 |
| ·材料与仪器 | 第45-47页 |
| ·实验材料准备 | 第45页 |
| ·菌株和载体 | 第45页 |
| ·生化试剂与仪器 | 第45-46页 |
| ·培养基和溶液 | 第46-47页 |
| ·试验方法 | 第47-51页 |
| ·CsRIPI全长基因和A链基因的扩增 | 第47-48页 |
| ·CsRIPI全长基因、A链基因和pBI121载体的双酶切 | 第48页 |
| ·连接 | 第48页 |
| ·大肠杆菌转化 | 第48页 |
| ·阳性克隆的PCR鉴定 | 第48-49页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第49页 |
| ·烟草叶盘转化 | 第49-50页 |
| ·CsRIPI基因表达蛋白N-糖苷酶活性的鉴定 | 第50-51页 |
| ·结果和讨论 | 第51-55页 |
| ·转基因烟草的PCR检测 | 第51-52页 |
| ·N-糖苷酶活性的鉴定结果 | 第52-55页 |
| 第5章 结论与展望 | 第55-57页 |
| ·结论 | 第55-56页 |
| ·展望 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-65页 |
| 攻读学位期间获得与学位论文相关的科研成果目录 | 第65页 |
