摘要 | 第4-7页 |
ABSTRACT | 第7-10页 |
缩略语 | 第14-15页 |
1 前言 | 第15-23页 |
1.1 日本三角涡虫概述 | 第15-17页 |
1.2 涡虫再生研究进展 | 第17-18页 |
1.3 Sox家族概述 | 第18-21页 |
1.3.1 Sox家族的分类 | 第18-19页 |
1.3.2 Sox蛋白结构特征 | 第19-20页 |
1.3.3 SoxB家族基因的生物学功能 | 第20-21页 |
1.4 立题依据与意义 | 第21-23页 |
2 材料与方法 | 第23-31页 |
2.1 实验材料 | 第23-25页 |
2.1.1 实验材料的采集与培养 | 第23页 |
2.1.2 实验主要设备 | 第23-24页 |
2.1.3 实验所需使用的主要试剂 | 第24页 |
2.1.4 实验主要试剂的配制 | 第24页 |
2.1.5 实验引物 | 第24-25页 |
2.2 实验方法与步骤 | 第25-31页 |
2.2.1 日本三角涡虫总RNA的提取 | 第26页 |
2.2.2 5′-cDNA模板、3′-cDNA模板以及一般反转录模板的制备 | 第26页 |
2.2.3 日本三角涡虫总RNA的提取与qPCR模板的制备 | 第26-27页 |
2.2.4 RACE技术扩增基因的全长 | 第27页 |
2.2.5 qPCR扩增 | 第27页 |
2.2.6 DjSoxB家族结构预测和系统进化树构建 | 第27页 |
2.2.7 DjSoxB家族三个基因的原位杂交 | 第27-28页 |
2.2.8 DjSoxB家族三个基因的RNA干扰 | 第28-31页 |
3 结果 | 第31-79页 |
3.1 总RNA的提取 | 第31-32页 |
3.1.1 5 ′-cDNA模板、3′-cDNA模板以及一般反转录模板的检测 | 第31-32页 |
3.2 用于qPCR扩增的总RNA的提取 | 第32-33页 |
3.2.1 用于qPCR扩增的反转录模板的检测 | 第33页 |
3.3 SoxB家族三基因的全长的扩增及序列分析 | 第33-48页 |
3.3.1 DjSoxB1基因全长的扩增及序列分析 | 第33-40页 |
3.3.2 DjSoxB2基因全长的扩增及序列分析 | 第40-45页 |
3.3.3 DjSoxB3基因生物信息学分析 | 第45页 |
3.3.4 DjSoxB家族三基因对应蛋白质的同源性分析 | 第45-48页 |
3.4 DjSoxB家族三基因在整体和再生涡虫中的表达模式 | 第48-55页 |
3.4.1 DjSoxB1基因整体原位杂交结果 | 第49-52页 |
3.4.2 DjSoxB1基因在再生过程中的表达模式 | 第52页 |
3.4.3 DjSoxB2基因整体原位杂交结果 | 第52-55页 |
3.4.4 DjSoxB2基因在再生过程中的表达模式 | 第55页 |
3.5 DjSoxB家族三基因RNA干扰结果 | 第55-79页 |
3.5.1 DjSoxB1基因RNA干扰结果 | 第55-61页 |
3.5.2 DjSoxB2基因RNA干扰结果 | 第61-67页 |
3.5.3 DjSoxB3基因RNA干扰结果 | 第67-73页 |
3.5.4 DjSoxB1与DjSoxB2RNA共干扰结果 | 第73-76页 |
3.5.5 DjSoxB2与DjSoxB3RNA共干扰结果 | 第76-79页 |
4 讨论 | 第79-87页 |
5 结论 | 第87-89页 |
参考文献 | 第89-97页 |
致谢 | 第97-99页 |
攻读硕士学位期间发表的论文和参与的课题 | 第99-101页 |