| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-20页 |
| 1.1 棉花黄萎病的概述 | 第12-13页 |
| 1.1.1 棉花黄萎病的发生危害与寄主范围 | 第12-13页 |
| 1.1.2 棉花黄萎病发病特点、病害循环 | 第13页 |
| 1.2 棉花黄萎病的致病机理 | 第13页 |
| 1.2.1 导管堵塞 | 第13页 |
| 1.2.2 致病毒素 | 第13页 |
| 1.3 微菌核研究概况 | 第13-14页 |
| 1.4 微菌核的时空分布研究概况 | 第14页 |
| 1.4.1 棉田土壤中大丽轮枝菌微菌核的空间分布 | 第14页 |
| 1.4.2 棉田土壤中大丽轮枝菌微菌核的动态分布 | 第14页 |
| 1.5 大丽轮枝菌微菌核的定量检测技术 | 第14-16页 |
| 1.5.1 选择性培养基平板计数法 | 第14-15页 |
| 1.5.2 分子生物学检测方法 | 第15-16页 |
| 1.6 环介导等温扩增技术(LAMP) | 第16-17页 |
| 1.6.1 基本原理 | 第16页 |
| 1.6.2 环介导等温扩增技术(LAMP)的应用 | 第16-17页 |
| 1.6.3 环介导等温扩增技术的特点 | 第17页 |
| 1.7 实时荧光定量PCR技术(qPCR) | 第17-18页 |
| 1.7.1 基本原理 | 第17-18页 |
| 1.7.2 实时荧光定量PCR技术的应用 | 第18页 |
| 1.7.3 实时荧光定量PCR的特点 | 第18页 |
| 1.8 本研究目的意义及技术路线 | 第18-20页 |
| 1.8.1 本研究目的意义 | 第18-19页 |
| 1.8.2 技术路线 | 第19-20页 |
| 第二章 大丽轮枝菌微菌核在棉田土壤中的分布动态 | 第20-26页 |
| 1 材料与方法 | 第20-21页 |
| 1.1 实验地点 | 第20页 |
| 1.2 供试菌株 | 第20页 |
| 1.3 供试土样 | 第20页 |
| 1.4 供试培养基及溶液 | 第20页 |
| 1.5 微菌核的培养与收集 | 第20-21页 |
| 1.6 微菌核在大丽轮枝菌选择性培养基(MSEA)上的萌发 | 第21页 |
| 1.7 土壤样品的采集和处理 | 第21页 |
| 1.8 选择性培养基法定量土壤中大丽轮枝菌微菌核 | 第21页 |
| 1.9 数据收集及处理 | 第21页 |
| 2 结果与分析 | 第21-24页 |
| 2.1 微菌核的萌发测定 | 第21-23页 |
| 2.2 微菌核在棉田土层中的垂直分布 | 第23页 |
| 2.3 土壤中微菌核的季节变化动态 | 第23-24页 |
| 3 结论与讨论 | 第24-26页 |
| 第三章 棉田土壤中微菌核密度与病害之间的相关性 | 第26-32页 |
| 1 材料与方法 | 第26-27页 |
| 1.1 供试土样的采集 | 第26-27页 |
| 1.1.1 土壤中微菌核的定量检测 | 第26页 |
| 1.1.2 田间病害调查 | 第26页 |
| 1.1.3 数据分析 | 第26-27页 |
| 1.2 不同抗病性品种对土壤中微菌核累积的影响 | 第27页 |
| 1.2.1 供试土样的采集 | 第27页 |
| 1.2.2 土壤中微菌核的定量检测 | 第27页 |
| 1.2.3 不同抗病性棉花材料的选择 | 第27页 |
| 2 结果与分析 | 第27-30页 |
| 2.1 土壤中微菌核数量与田间病害发生的相关性分析 | 第27-30页 |
| 2.2 不同抗病性棉花品种对土壤中微菌核累积的影响 | 第30页 |
| 3 结论与讨论 | 第30-32页 |
| 第四章 棉花黄萎病菌微菌核LAMP检测技术的构建及优化 | 第32-40页 |
| 1 材料与方法 | 第32-35页 |
| 1.1 实验材料 | 第32页 |
| 1.2 供试土样 | 第32页 |
| 1.3 实验仪器 | 第32页 |
| 1.4 试验试剂 | 第32-33页 |
| 1.5 引物来源 | 第33页 |
| 1.6 引物的处理 | 第33-34页 |
| 1.7 实验方法 | 第34页 |
| 1.7.1 棉花黄萎病菌基因组DNA的提取 | 第34页 |
| 1.7.2 LAMP反应体系和PCR反应体系 | 第34页 |
| 1.8 LAMP反应条件优化 | 第34-35页 |
| 1.8.1 Mg~(2+)浓度的优化 | 第34页 |
| 1.8.2 dNTPs浓度的优化 | 第34页 |
| 1.8.3 甜菜碱的优化 | 第34-35页 |
| 1.8.4 内外引物比的优化 | 第35页 |
| 1.8.5 反应时间的优化 | 第35页 |
| 1.8.6 反应温度的优化 | 第35页 |
| 1.9 特异性引物PCR | 第35页 |
| 1.10 LAMP检测灵敏度验证 | 第35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-39页 |
| 2.1 LAMP反应条件的优化 | 第35-38页 |
| 2.2 LAMP反应和特异性PCR反应的灵敏度比较 | 第38-39页 |
| 3 结论与讨论 | 第39-40页 |
| 第五章 环介导等温实时荧光定量扩增检测VerticilliudahliaeKleb.菌核 | 第40-49页 |
| 1 材料与方法 | 第40-42页 |
| 1.1 试验材料 | 第40页 |
| 1.2 试验方法 | 第40-42页 |
| 1.2.1 土壤中棉花黄萎病菌微菌核DNA提取方法 | 第40页 |
| 1.2.2 环介导等温实时荧光定量扩增的反应体系 | 第40-41页 |
| 1.2.3 不同浓度微菌核的制备 | 第41页 |
| 1.2.4 标准曲线的建立 | 第41页 |
| 1.2.5 环介导等温实时荧光定量扩增检测体系的特异性评价 | 第41页 |
| 1.2.6 环介导等温实时荧光定量扩增体系的灵敏性评价 | 第41页 |
| 1.2.7 环介导等温实时荧光定量扩增体系的重复性评价 | 第41-42页 |
| 1.2.8 数据收集及处理 | 第42页 |
| 1.3 环介导等温实时荧光定量扩增检测棉田土壤中微菌核 | 第42页 |
| 1.3.1 供试土样及DNA的提取 | 第42页 |
| 1.3.2 田间病害调查 | 第42页 |
| 1.3.3 环介导等温实时荧光定量扩增的反应体系 | 第42页 |
| 2 结果与分析 | 第42-48页 |
| 2.1 环介导等温实时荧光定量扩增检测体系的建立 | 第42-46页 |
| 2.2 棉田土壤中微菌核的环介导等温实时荧光定量检测 | 第46-48页 |
| 3 结论与讨论 | 第48-49页 |
| 第六章 主要结论 | 第49-50页 |
| 1 结论 | 第49页 |
| 2 创新点 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 作者简介 | 第56-57页 |
| 石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表 | 第57页 |
