摘要 | 第5-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 文献综述 | 第11-20页 |
1.1 林可霉素简介 | 第11页 |
1.1.1 林可霉素分子结构 | 第11页 |
1.1.2 林可霉素抑菌机理 | 第11页 |
1.2 林可霉素合成基因簇 | 第11-13页 |
1.3 林可霉素生物合成途径 | 第13-15页 |
1.3.1 氨基酸部分的合成 | 第13-14页 |
1.3.2 糖基部分的合成 | 第14页 |
1.3.3 糖基与氨基酸的缩合 | 第14-15页 |
1.4 不同因素对林可霉素发酵的影响 | 第15-18页 |
1.4.1 优良菌种 | 第15-16页 |
1.4.2 优化培养基 | 第16页 |
1.4.3 碳源影响 | 第16页 |
1.4.4 氮源影响 | 第16页 |
1.4.5 磷酸盐影响 | 第16页 |
1.4.6 pH影响 | 第16-17页 |
1.4.7 溶氧及搅拌转速影响 | 第17页 |
1.4.8 含硫物质对发酵的影响 | 第17页 |
1.4.9 金属离子影响 | 第17-18页 |
1.4.10 氨基酸影响 | 第18页 |
1.4.11 代谢调控影响 | 第18页 |
1.5 课题研究目的与意义 | 第18-20页 |
第2章 材料与方法 | 第20-36页 |
2.1 实验材料 | 第20-23页 |
2.1.1 菌种 | 第20页 |
2.1.2 原料与试剂 | 第20-21页 |
2.1.3 培养基配方 | 第21-22页 |
2.1.4 实验仪器 | 第22-23页 |
2.2 培养方法 | 第23-24页 |
2.2.1 摇瓶培养方法 | 第23-24页 |
2.2.2 15 L发酵罐培养方法 | 第24页 |
2.2.3 藤黄八叠培养方法 | 第24页 |
2.3 参数测定方法 | 第24-36页 |
2.3.1 测定菌体浓度 | 第24页 |
2.3.2 胞外还原糖测定方法 | 第24-25页 |
2.3.3 胞外氮含量测定方法 | 第25页 |
2.3.4 胞外铵离子含量测定方法 | 第25-26页 |
2.3.5 胞外无机磷含量测定方法 | 第26-27页 |
2.3.6 林可霉素A生物效价测定方法 | 第27-28页 |
2.3.7 高效液相色谱(HPLC)法测定林可霉素A与林可霉素B | 第28-29页 |
2.3.8 葡萄糖酸的测定 | 第29-30页 |
2.3.9 钻离子测定 | 第30页 |
2.3.10 胞内葡萄糖激酶(GK)酶活测定 | 第30-33页 |
2.3.11 胞内NADPH/NADH测定 | 第33-34页 |
2.3.12 胞内代谢物测定 | 第34-36页 |
第3章 响应面法同时优化林可霉素A产量与林可霉素B含量 | 第36-48页 |
3.1 前言 | 第36页 |
3.2 响应面实验与结果 | 第36-47页 |
3.2.1 Plackett-Burman (PB)实验与结果 | 第36-38页 |
3.2.2 Box-Behnken实验设计与结果 | 第38-42页 |
3.2.3 15 L发酵罐发酵试验 | 第42-43页 |
3.2.4 15 L发酵罐林可霉素B组分优化试验 | 第43-44页 |
3.2.5 发酵过程参数变化情况 | 第44-47页 |
3.3 本章小结 | 第47-48页 |
第4章 葡萄糖酸钙工艺研究 | 第48-58页 |
4.1 前言 | 第48页 |
4.2 结果与分析 | 第48-57页 |
4.2.1 摇瓶中葡萄糖酸钙添加量优化 | 第48-49页 |
4.2.2 摇瓶中葡萄糖酸钙添加时间优化 | 第49页 |
4.2.3 15 L发酵罐试验 | 第49-57页 |
4.3 本章小结 | 第57-58页 |
第5章 葡萄糖酸钙对林可霉素合成途径酶活、代谢物及还原力的影响 | 第58-74页 |
5.1 前言 | 第58页 |
5.2 葡萄糖酸钙对关键酶酶活的影响 | 第58-62页 |
5.2.1 林可链霉菌细胞破碎条件优化 | 第58-59页 |
5.2.2 添加葡萄糖酸钙对葡萄糖激酶酶活的影响 | 第59-60页 |
5.2.3 添加葡萄糖酸钙对6-磷酸葡萄糖脱氢酶酶活的影响 | 第60-61页 |
5.2.4 添加葡萄糖酸钙对异柠檬酸脱氢酶酶活的影响 | 第61-62页 |
5.3 林可链霉菌胞内代谢物测定方法建立 | 第62-72页 |
5.3.1 胞内代谢物测定流程 | 第62页 |
5.3.2 半合成培养基筛选与菌体培养 | 第62-64页 |
5.3.3 快速取样与菌体淬灭法比较 | 第64-65页 |
5.3.4 胞内代谢物提取方法比较 | 第65-67页 |
5.3.5 胞内代谢物标准曲线绘制 | 第67-68页 |
5.3.6 添加葡萄糖酸钙对胞内代谢物的影响 | 第68-71页 |
5.3.7 添加葡萄糖酸钙对还原力的影响 | 第71-72页 |
5.4 本章小结 | 第72-74页 |
第6章 结论与展望 | 第74-76页 |
6.1 结论 | 第74-75页 |
6.2 展望 | 第75-76页 |
参考文献 | 第76-81页 |
致谢 | 第81-82页 |
发表论文 | 第82-83页 |
附录 | 第83-87页 |