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林可霉素发酵工艺优化及代谢分析

摘要第5-6页
Abstract第6-7页
第1章 文献综述第11-20页
    1.1 林可霉素简介第11页
        1.1.1 林可霉素分子结构第11页
        1.1.2 林可霉素抑菌机理第11页
    1.2 林可霉素合成基因簇第11-13页
    1.3 林可霉素生物合成途径第13-15页
        1.3.1 氨基酸部分的合成第13-14页
        1.3.2 糖基部分的合成第14页
        1.3.3 糖基与氨基酸的缩合第14-15页
    1.4 不同因素对林可霉素发酵的影响第15-18页
        1.4.1 优良菌种第15-16页
        1.4.2 优化培养基第16页
        1.4.3 碳源影响第16页
        1.4.4 氮源影响第16页
        1.4.5 磷酸盐影响第16页
        1.4.6 pH影响第16-17页
        1.4.7 溶氧及搅拌转速影响第17页
        1.4.8 含硫物质对发酵的影响第17页
        1.4.9 金属离子影响第17-18页
        1.4.10 氨基酸影响第18页
        1.4.11 代谢调控影响第18页
    1.5 课题研究目的与意义第18-20页
第2章 材料与方法第20-36页
    2.1 实验材料第20-23页
        2.1.1 菌种第20页
        2.1.2 原料与试剂第20-21页
        2.1.3 培养基配方第21-22页
        2.1.4 实验仪器第22-23页
    2.2 培养方法第23-24页
        2.2.1 摇瓶培养方法第23-24页
        2.2.2 15 L发酵罐培养方法第24页
        2.2.3 藤黄八叠培养方法第24页
    2.3 参数测定方法第24-36页
        2.3.1 测定菌体浓度第24页
        2.3.2 胞外还原糖测定方法第24-25页
        2.3.3 胞外氮含量测定方法第25页
        2.3.4 胞外铵离子含量测定方法第25-26页
        2.3.5 胞外无机磷含量测定方法第26-27页
        2.3.6 林可霉素A生物效价测定方法第27-28页
        2.3.7 高效液相色谱(HPLC)法测定林可霉素A与林可霉素B第28-29页
        2.3.8 葡萄糖酸的测定第29-30页
        2.3.9 钻离子测定第30页
        2.3.10 胞内葡萄糖激酶(GK)酶活测定第30-33页
        2.3.11 胞内NADPH/NADH测定第33-34页
        2.3.12 胞内代谢物测定第34-36页
第3章 响应面法同时优化林可霉素A产量与林可霉素B含量第36-48页
    3.1 前言第36页
    3.2 响应面实验与结果第36-47页
        3.2.1 Plackett-Burman (PB)实验与结果第36-38页
        3.2.2 Box-Behnken实验设计与结果第38-42页
        3.2.3 15 L发酵罐发酵试验第42-43页
        3.2.4 15 L发酵罐林可霉素B组分优化试验第43-44页
        3.2.5 发酵过程参数变化情况第44-47页
    3.3 本章小结第47-48页
第4章 葡萄糖酸钙工艺研究第48-58页
    4.1 前言第48页
    4.2 结果与分析第48-57页
        4.2.1 摇瓶中葡萄糖酸钙添加量优化第48-49页
        4.2.2 摇瓶中葡萄糖酸钙添加时间优化第49页
        4.2.3 15 L发酵罐试验第49-57页
    4.3 本章小结第57-58页
第5章 葡萄糖酸钙对林可霉素合成途径酶活、代谢物及还原力的影响第58-74页
    5.1 前言第58页
    5.2 葡萄糖酸钙对关键酶酶活的影响第58-62页
        5.2.1 林可链霉菌细胞破碎条件优化第58-59页
        5.2.2 添加葡萄糖酸钙对葡萄糖激酶酶活的影响第59-60页
        5.2.3 添加葡萄糖酸钙对6-磷酸葡萄糖脱氢酶酶活的影响第60-61页
        5.2.4 添加葡萄糖酸钙对异柠檬酸脱氢酶酶活的影响第61-62页
    5.3 林可链霉菌胞内代谢物测定方法建立第62-72页
        5.3.1 胞内代谢物测定流程第62页
        5.3.2 半合成培养基筛选与菌体培养第62-64页
        5.3.3 快速取样与菌体淬灭法比较第64-65页
        5.3.4 胞内代谢物提取方法比较第65-67页
        5.3.5 胞内代谢物标准曲线绘制第67-68页
        5.3.6 添加葡萄糖酸钙对胞内代谢物的影响第68-71页
        5.3.7 添加葡萄糖酸钙对还原力的影响第71-72页
    5.4 本章小结第72-74页
第6章 结论与展望第74-76页
    6.1 结论第74-75页
    6.2 展望第75-76页
参考文献第76-81页
致谢第81-82页
发表论文第82-83页
附录第83-87页

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