中文摘要 | 第2-4页 |
Abstract | 第4-6页 |
目录 | 第7-10页 |
符号说明 | 第10-11页 |
文献综述 | 第11-30页 |
肠炎沙门氏菌感染现状 | 第11-13页 |
沙门氏菌鞭毛结构及功能 | 第13-15页 |
沙门氏菌鞭毛隶属于粘附素大类 | 第15-16页 |
鞭毛运动性与毒力 | 第16-17页 |
鞭毛与细菌的生物膜形成 | 第17-18页 |
鞭毛与细菌的粘附和侵袭 | 第18-19页 |
Ⅲ型分泌系统结构和功能 | 第19-21页 |
沙门菌菌毛 | 第21-22页 |
沙门菌毛的分类 | 第22-23页 |
参考文献 | 第23-30页 |
研究一 肠炎沙门氏菌鞭毛主要编码基因fliC缺失突变株及相应回补株的构建 | 第30-43页 |
摘要 | 第30页 |
Abstract | 第30-31页 |
1 材料 | 第31-33页 |
1.1 菌株、抗体及质粒 | 第31-32页 |
1.2 培养基和主要试剂 | 第32页 |
1.3 主要仪器 | 第32-33页 |
2 方法 | 第33-38页 |
2.1 fliC基因缺失引物的设计 | 第33页 |
2.2 融合PCR产物的制备和纯化 | 第33-34页 |
2.3 感受态细胞的制备及转化 | 第34-35页 |
2.3.1 感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
2.3.2 质粒pKD46的转化 | 第35页 |
2.3.3 Red重组的诱导和感受态细胞的制备 | 第35页 |
2.4 电转化 | 第35页 |
2.5 消除质粒pKD46 | 第35-36页 |
2.6 一次同源重组菌ΔfliC::Cat的PCR鉴定 | 第36页 |
2.7 FLP位点专一性重组 | 第36-37页 |
2.8 第二次重组菌XΔfliC的鉴定 | 第37页 |
2.9 互补株的构建 | 第37页 |
2.10 半固体运动试验 | 第37页 |
2.11 负染和透射电镜(Transmission Electron Microscopy,TEM)观察 | 第37-38页 |
2.12 玻板凝集试验 | 第38页 |
3 结果 | 第38-41页 |
3.1 融合PCR产物的制备 | 第38页 |
3.2 同源重组菌的PCR鉴定 | 第38-39页 |
3.4 鉴定引物P3、P4扩增ΧΔ∥fliC菌株的序列分析 | 第39页 |
3.5 XΔfliC 缺失株的表型分析 | 第39-41页 |
4 讨论 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-43页 |
研究二 鞭毛对肠炎沙门氏菌生物膜形成的影响分析 | 第43-49页 |
摘要 | 第43页 |
Abstract | 第43-44页 |
1 材料 | 第44页 |
1.1 菌株 | 第44页 |
1.2 培养基和主要试剂 | 第44页 |
1.3 主要仪器 | 第44页 |
2 方法 | 第44-45页 |
2.1 野生株、突变株与相应回补株生长曲线测定 | 第44页 |
2.2 结晶紫染色法定性测定野生株、缺失株与相应回补株生物膜形成能力 | 第44页 |
2.3 结晶紫染色法定量测定野生株、缺失株与相应回补株生物膜形成 | 第44-45页 |
3 结果 | 第45-47页 |
3.1 野生株、突变株与相应回补株生长曲线测定 | 第45页 |
3.2 野生株、缺失株与相应回补株生物膜形成能力定性分析 | 第45-46页 |
3.3 野生株、缺失株与相应回补株生物膜形成能力定量分析 | 第46-47页 |
4 讨论 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-49页 |
研究三 肠炎沙门氏菌鞭毛与肠上皮细胞Caco-2和IPEC-J2细胞的体外黏附作用 | 第49-59页 |
摘要 | 第49页 |
Abstract | 第49-51页 |
1 材料 | 第51-52页 |
1.1 菌株及细胞系 | 第51-52页 |
1.2 培养基和主要试剂 | 第52页 |
1.3 主要仪器设备 | 第52页 |
2 方法 | 第52-53页 |
2.1 菌株的准备 | 第52页 |
2.2 Caco-2细胞粘附试验 | 第52-53页 |
2.2.1 Caco-2细胞的培养与传代 | 第52-53页 |
2.2.2 Caco-2细胞粘附试验 | 第53页 |
2.3 IPEC-2细胞粘附试验 | 第53页 |
2.4 数据处理 | 第53页 |
3 结果 | 第53-55页 |
3.1 Caco-2细胞粘附试验 | 第53-54页 |
3.2 IPEC-2细胞粘附试验 | 第54-55页 |
4 讨论 | 第55-57页 |
参考文献 | 第57-59页 |
全文总结 | 第59-60页 |
致谢 | 第60-61页 |