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肠炎沙门氏菌鞭毛素fliC基因缺失突变株的构建及相关功能性分析

中文摘要第2-4页
Abstract第4-6页
目录第7-10页
符号说明第10-11页
文献综述第11-30页
    肠炎沙门氏菌感染现状第11-13页
    沙门氏菌鞭毛结构及功能第13-15页
    沙门氏菌鞭毛隶属于粘附素大类第15-16页
    鞭毛运动性与毒力第16-17页
    鞭毛与细菌的生物膜形成第17-18页
    鞭毛与细菌的粘附和侵袭第18-19页
    Ⅲ型分泌系统结构和功能第19-21页
    沙门菌菌毛第21-22页
    沙门菌毛的分类第22-23页
    参考文献第23-30页
研究一 肠炎沙门氏菌鞭毛主要编码基因fliC缺失突变株及相应回补株的构建第30-43页
    摘要第30页
    Abstract第30-31页
    1 材料第31-33页
        1.1 菌株、抗体及质粒第31-32页
        1.2 培养基和主要试剂第32页
        1.3 主要仪器第32-33页
    2 方法第33-38页
        2.1 fliC基因缺失引物的设计第33页
        2.2 融合PCR产物的制备和纯化第33-34页
        2.3 感受态细胞的制备及转化第34-35页
            2.3.1 感受态细胞的制备第34-35页
            2.3.2 质粒pKD46的转化第35页
            2.3.3 Red重组的诱导和感受态细胞的制备第35页
        2.4 电转化第35页
        2.5 消除质粒pKD46第35-36页
        2.6 一次同源重组菌ΔfliC::Cat的PCR鉴定第36页
        2.7 FLP位点专一性重组第36-37页
        2.8 第二次重组菌XΔfliC的鉴定第37页
        2.9 互补株的构建第37页
        2.10 半固体运动试验第37页
        2.11 负染和透射电镜(Transmission Electron Microscopy,TEM)观察第37-38页
        2.12 玻板凝集试验第38页
    3 结果第38-41页
        3.1 融合PCR产物的制备第38页
        3.2 同源重组菌的PCR鉴定第38-39页
        3.4 鉴定引物P3、P4扩增ΧΔ∥fliC菌株的序列分析第39页
        3.5 XΔfliC 缺失株的表型分析第39-41页
    4 讨论第41-42页
    参考文献第42-43页
研究二 鞭毛对肠炎沙门氏菌生物膜形成的影响分析第43-49页
    摘要第43页
    Abstract第43-44页
    1 材料第44页
        1.1 菌株第44页
        1.2 培养基和主要试剂第44页
        1.3 主要仪器第44页
    2 方法第44-45页
        2.1 野生株、突变株与相应回补株生长曲线测定第44页
        2.2 结晶紫染色法定性测定野生株、缺失株与相应回补株生物膜形成能力第44页
        2.3 结晶紫染色法定量测定野生株、缺失株与相应回补株生物膜形成第44-45页
    3 结果第45-47页
        3.1 野生株、突变株与相应回补株生长曲线测定第45页
        3.2 野生株、缺失株与相应回补株生物膜形成能力定性分析第45-46页
        3.3 野生株、缺失株与相应回补株生物膜形成能力定量分析第46-47页
    4 讨论第47-48页
    参考文献第48-49页
研究三 肠炎沙门氏菌鞭毛与肠上皮细胞Caco-2和IPEC-J2细胞的体外黏附作用第49-59页
    摘要第49页
    Abstract第49-51页
    1 材料第51-52页
        1.1 菌株及细胞系第51-52页
        1.2 培养基和主要试剂第52页
        1.3 主要仪器设备第52页
    2 方法第52-53页
        2.1 菌株的准备第52页
        2.2 Caco-2细胞粘附试验第52-53页
            2.2.1 Caco-2细胞的培养与传代第52-53页
            2.2.2 Caco-2细胞粘附试验第53页
        2.3 IPEC-2细胞粘附试验第53页
        2.4 数据处理第53页
    3 结果第53-55页
        3.1 Caco-2细胞粘附试验第53-54页
        3.2 IPEC-2细胞粘附试验第54-55页
    4 讨论第55-57页
    参考文献第57-59页
全文总结第59-60页
致谢第60-61页

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