摘要 | 第9-11页 |
ABSTRACT | 第11-12页 |
第一章 引言 | 第13-18页 |
1. 东方蜜蜂微孢子虫 | 第13-16页 |
1.1 东方蜜蜂微孢子虫的生物学特征 | 第13-14页 |
1.2 东方蜜蜂微孢子虫的传播途径 | 第14页 |
1.3 东方蜜蜂微孢子虫孢子种类鉴别 | 第14页 |
1.4 东方蜜蜂微孢子虫影响蜂王健康 | 第14-15页 |
1.5 东方蜜蜂微孢子虫影响蜜蜂行为 | 第15页 |
1.6 东方蜜蜂微孢子虫调控基因表达和信息素分泌 | 第15页 |
1.7 东方蜜蜂微孢子虫与其它因素影响蜜蜂健康 | 第15-16页 |
1.8 东方蜜蜂微孢子虫的防治 | 第16页 |
2. 东方蜜蜂微孢子虫感染影响咽下腺发育的相关研究 | 第16-17页 |
2.1 蜜蜂咽下腺概述 | 第16页 |
2.2 生物因素影响蜜蜂咽下腺发育 | 第16-17页 |
2.3 非生物因素影响蜜蜂咽下腺发育 | 第17页 |
3. 研究内容及意义 | 第17-18页 |
第二章 东方蜜蜂微孢子虫感染对意蜂感染强度、存活率及个体发育影响评估 | 第18-28页 |
1. 东方蜜蜂微孢子虫种类鉴定 | 第18-21页 |
1.1 实验仪器及材料的准备 | 第18页 |
1.2 实验试剂、材料准备 | 第18页 |
1.3 实验样本收集 | 第18-19页 |
1.4 实验过程 | 第19-20页 |
1.5 实验结果 | 第20页 |
1.6 小结 | 第20-21页 |
2. 意蜂中东方蜜蜂微孢子虫感染强度评估 | 第21-24页 |
2.1 实验仪器及试剂的制备 | 第21-22页 |
2.2 微孢子虫感染量统计 | 第22-23页 |
2.3 数据处理 | 第23页 |
2.4 实验结果 | 第23-24页 |
2.5 小结与讨论 | 第24页 |
3. 东方蜜蜂微孢子虫感染影响意蜂存活率 | 第24-26页 |
3.1 实验方法及实验数据采集 | 第24-25页 |
3.2 实验数据处理 | 第25页 |
3.3 实验结果 | 第25页 |
3.4 小结与讨论 | 第25-26页 |
4. 东方蜜蜂微孢子虫感染影响意蜂个体及头部重量 | 第26-28页 |
4.1 实验仪器、材料及试剂 | 第26页 |
4.2 蜜蜂样本饲养 | 第26页 |
4.3 实验方法 | 第26页 |
4.4 数据处理 | 第26页 |
4.5 实验结果 | 第26-27页 |
4.6 小结与讨论 | 第27-28页 |
第三章 东方蜜蜂微孢子虫感染9天后意蜂咽下腺转录组测序 | 第28-36页 |
1. 实验样品收集 | 第28页 |
2. RNA-seq样品准备及检测 | 第28-30页 |
2.1 蜜蜂咽下腺样品准备 | 第28页 |
2.2 RNA样品制备及检测 | 第28页 |
2.3 RNA-seq测序文库构建及检测 | 第28-29页 |
2.4 RNA-seq数据质量评估 | 第29页 |
2.5 参考序列比对分析 | 第29页 |
2.6 基因差异表达分析 | 第29页 |
2.7 差异基因GO富集分析 | 第29-30页 |
2.8 差异基因KEGG富集分析 | 第30页 |
3. 测序结果 | 第30-34页 |
3.1 基因表达差异分析 | 第30页 |
3.2 GO富集与KEGG富集分析 | 第30-34页 |
4. 小结与讨论 | 第34-36页 |
第四章 测序差异基因荧光定量验证 | 第36-44页 |
1. 实验材料及试剂的制备 | 第36-37页 |
1.1 实验仪器 | 第36页 |
1.2 实验材料 | 第36页 |
1.3 实验样本 | 第36-37页 |
2. 实验方法 | 第37-39页 |
2.1 Trizol法提取样本总RNA | 第37页 |
2.2 使用一步法对RNA进行反转录 | 第37-38页 |
2.3 Primer 5软件设计差异基因引物 | 第38页 |
2.4 差异基因荧光定量验证 | 第38-39页 |
3. 数据处理 | 第39页 |
4. 实验结果 | 第39-43页 |
4.1 测序结果差异基因验证 | 第39页 |
4.2 不同日龄蜜蜂咽下腺中差异基因表达量验证 | 第39-43页 |
5. 小结与讨论 | 第43-44页 |
第五章 东方蜜蜂微孢子虫感染影响意蜂咽下腺发育及王浆主蛋白基因表达 | 第44-49页 |
1. 东方蜜蜂微孢子虫感染影响腺泡体积 | 第44-46页 |
1.1 实验仪器及材料 | 第44页 |
1.2 标准尺设定 | 第44页 |
1.3 实验样本 | 第44页 |
1.4 数据统计与分析 | 第44-45页 |
1.5 实验结果 | 第45页 |
1.6 小结与讨论 | 第45-46页 |
2. 东方蜜蜂微孢子虫感染影响咽下腺王浆主蛋白基因表达 | 第46-49页 |
2.1 数据处理 | 第46页 |
2.2 实验结果 | 第46-48页 |
2.3 小结与讨论 | 第48-49页 |
第六章 东方蜜蜂微孢子虫感染影响意蜂咽下腺中总蛋白浓度及酶比活性 | 第49-56页 |
1. 东方蜜蜂微孢子虫感染影响咽下腺中总蛋白浓度 | 第49-52页 |
1.1 实验仪器 | 第49页 |
1.2 主要实验试剂 | 第49页 |
1.3 实验样本 | 第49页 |
1.4 蜜蜂咽下腺中总蛋白提取 | 第49-50页 |
1.5 酶标仪测定蜜蜂咽下腺总蛋白浓度 | 第50页 |
1.6 实验结果 | 第50-51页 |
1.7 小结与讨论 | 第51-52页 |
2. 东方蜜蜂微孢子虫感染影响蜜蜂咽下腺中代谢酶比活性 | 第52-56页 |
2.1 实验仪器 | 第52页 |
2.2 实验试剂 | 第52页 |
2.3 实验样本 | 第52页 |
2.4 实验方法及数据整理 | 第52-53页 |
2.5 实验数据处理 | 第53页 |
2.6 实验结果 | 第53-55页 |
2.7 小结与讨论 | 第55-56页 |
第七章 讨论与展望 | 第56-57页 |
1. 讨论 | 第56页 |
2. 展望 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-62页 |
附录A 凝胶电泳图 | 第62-64页 |
附录B 基因引物序列 | 第64-67页 |
附录C 部分差异基因功能注释表 | 第67-68页 |
致谢 | 第68页 |