中文摘要 | 第1-12页 |
英文摘要 | 第12-14页 |
文献综述 | 第14-28页 |
1 毛色形成的细胞生物学 | 第14-16页 |
2 猪毛色相关位点及编码基因介绍 | 第16-20页 |
3 猪显性白位点(Dominant white / I locus)研究现状 | 第20-22页 |
4 多拷贝基因拷贝数的常用检测方法 | 第22-24页 |
5 KIT 内含子17 第一核苷酸剪切突变的检测方法 | 第24-25页 |
6 实时荧光定量PCR与TaqMan-MGB探针 | 第25-27页 |
7 本研究的目的和意义 | 第27-28页 |
第一部分:应用MGB 荧光探针技术检测猪KIT 拷贝数变异 | 第28-43页 |
1 材料与方法 | 第28-35页 |
·试验材料 | 第28-29页 |
·试验动物和样品采集 | 第28页 |
·主要仪器 | 第28页 |
·主要试剂及来源 | 第28-29页 |
·缓冲液及主要试剂配制 | 第29页 |
·主要数据库及生物软件 | 第29页 |
·试验方法 | 第29-35页 |
·基因组DNA 的提取 | 第29页 |
·测定基因组DNA 浓度 | 第29-30页 |
·探针、引物的设计与合成 | 第30-31页 |
·实时定量PCR | 第31-32页 |
·预试验(MGB探针特异性和稳定性分析) | 第32页 |
·标准曲线的建立 | 第32页 |
·待测样品KIT拷贝数的定量检测 | 第32页 |
·2~(-ΔΔCt) 方法用于待测样品 KIT 拷贝数的确定 | 第32-34页 |
·统计学分析 | 第34-35页 |
2 结果与分析 | 第35-40页 |
·猪基因组DNA | 第35页 |
·预实验(MGB 探针检测效果分析) | 第35-37页 |
·标准曲线 | 第37-38页 |
·未知样品KIT拷贝数的定量检测 | 第38-40页 |
3 讨论 | 第40-43页 |
·MGB 探针实时荧光定量 PCR 方法 | 第41-42页 |
·猪 KIT 拷贝数变异分析 | 第42-43页 |
第二部分 猪KIT 内含子17 剪切突变比例的研究 | 第43-61页 |
1 材料与方法 | 第43-50页 |
·试验材料 | 第43-44页 |
·试验动物和样品采集 | 第43页 |
·主要仪器 | 第43页 |
·主要试剂及来源 | 第43页 |
·缓冲液及主要试剂配制 | 第43-44页 |
·主要数据库及生物软件 | 第44页 |
·试验方法 | 第44-50页 |
·基因组DNA 的提取与纯化 | 第44-45页 |
·目的片段PCR扩增引物的设计 | 第45-46页 |
·PCR 扩增及其产物的回收测序 | 第46-47页 |
·目的突变检测的探针、引物设计 | 第47-48页 |
·定量PCR扩增 | 第48页 |
·预试验(MGB 探针特异性和稳定性分析) | 第48页 |
·标准曲线的建立 | 第48页 |
·未知样品KIT内含子17剪切突变比例的检测 | 第48-49页 |
·2~(-ΔΔCt)方法用于待测样品KIT 内含子17 剪切突变比例的确定 | 第49-50页 |
·统计学分析 | 第50页 |
2 结果与分析 | 第50-58页 |
·猪基因组 DNA | 第50-51页 |
·PCR 扩增及测序结果 | 第51-52页 |
·预实验(MGB 探针检测效果分析) | 第52-53页 |
·标准曲线 | 第53-54页 |
·未知样品KIT内含子17剪切突变比例的检测 | 第54-56页 |
·未知样品 KIT 基因型的确定 | 第56-58页 |
3 讨论 | 第58-61页 |
·未知样品KIT内含子17剪切突变比例 | 第58-59页 |
·猪的 KIT 基因型 | 第59-61页 |
结论 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-70页 |
致谢 | 第70页 |