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应用TaqMan-MGB探针实时定量PCR技术检测猪KIT基因型的研究

中文摘要第1-12页
英文摘要第12-14页
文献综述第14-28页
 1 毛色形成的细胞生物学第14-16页
 2 猪毛色相关位点及编码基因介绍第16-20页
 3 猪显性白位点(Dominant white / I locus)研究现状第20-22页
 4 多拷贝基因拷贝数的常用检测方法第22-24页
 5 KIT 内含子17 第一核苷酸剪切突变的检测方法第24-25页
 6 实时荧光定量PCR与TaqMan-MGB探针第25-27页
 7 本研究的目的和意义第27-28页
第一部分:应用MGB 荧光探针技术检测猪KIT 拷贝数变异第28-43页
 1 材料与方法第28-35页
   ·试验材料第28-29页
     ·试验动物和样品采集第28页
     ·主要仪器第28页
     ·主要试剂及来源第28-29页
     ·缓冲液及主要试剂配制第29页
     ·主要数据库及生物软件第29页
   ·试验方法第29-35页
     ·基因组DNA 的提取第29页
     ·测定基因组DNA 浓度第29-30页
     ·探针、引物的设计与合成第30-31页
     ·实时定量PCR第31-32页
     ·预试验(MGB探针特异性和稳定性分析)第32页
     ·标准曲线的建立第32页
     ·待测样品KIT拷贝数的定量检测第32页
     ·2~(-ΔΔCt) 方法用于待测样品 KIT 拷贝数的确定第32-34页
     ·统计学分析第34-35页
 2 结果与分析第35-40页
   ·猪基因组DNA第35页
   ·预实验(MGB 探针检测效果分析)第35-37页
   ·标准曲线第37-38页
   ·未知样品KIT拷贝数的定量检测第38-40页
 3 讨论第40-43页
   ·MGB 探针实时荧光定量 PCR 方法第41-42页
   ·猪 KIT 拷贝数变异分析第42-43页
第二部分 猪KIT 内含子17 剪切突变比例的研究第43-61页
 1 材料与方法第43-50页
   ·试验材料第43-44页
     ·试验动物和样品采集第43页
     ·主要仪器第43页
     ·主要试剂及来源第43页
     ·缓冲液及主要试剂配制第43-44页
     ·主要数据库及生物软件第44页
   ·试验方法第44-50页
     ·基因组DNA 的提取与纯化第44-45页
     ·目的片段PCR扩增引物的设计第45-46页
     ·PCR 扩增及其产物的回收测序第46-47页
     ·目的突变检测的探针、引物设计第47-48页
     ·定量PCR扩增第48页
     ·预试验(MGB 探针特异性和稳定性分析)第48页
     ·标准曲线的建立第48页
     ·未知样品KIT内含子17剪切突变比例的检测第48-49页
     ·2~(-ΔΔCt)方法用于待测样品KIT 内含子17 剪切突变比例的确定第49-50页
     ·统计学分析第50页
 2 结果与分析第50-58页
   ·猪基因组 DNA第50-51页
   ·PCR 扩增及测序结果第51-52页
   ·预实验(MGB 探针检测效果分析)第52-53页
   ·标准曲线第53-54页
   ·未知样品KIT内含子17剪切突变比例的检测第54-56页
   ·未知样品 KIT 基因型的确定第56-58页
 3 讨论第58-61页
   ·未知样品KIT内含子17剪切突变比例第58-59页
   ·猪的 KIT 基因型第59-61页
结论第61-62页
参考文献第62-70页
致谢第70页

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