| 中文摘要 | 第10-13页 |
| 英文摘要 | 第13-15页 |
| 前言 | 第16-18页 |
| 第一部分 ccRCC患者组织和细胞株中miR-4521,FAM129A的表达水平检测及二者相关性分析 | 第18-32页 |
| 材料与方法 | 第18-23页 |
| 1.实验材料 | 第18-20页 |
| 1.1.临床样本及细胞株 | 第18页 |
| 1.2.实验仪器与试剂 | 第18-20页 |
| 2.实验方法 | 第20-23页 |
| 2.1.qRT-PCR检测ccRCC临床样本中miR-4521和FAM129A表达水平 | 第20-21页 |
| 2.2.WB检测ccRCC临床样本中FAM129A的表达 | 第21-22页 |
| 2.3.免疫组织化学（IHC）检测FAM129A在ccRCC临床样本中的表达 | 第22-23页 |
| 2.4.qRT-PCR检测miR-4521、FAM129A在786-O、ACHN及HK-2中的表达 | 第23页 |
| 2.5.统计学分析 | 第23页 |
| 结果 | 第23-28页 |
| 1.miR-4521,FAM129A在ccRCC临床样本中表达水平及相应性分析 | 第23-26页 |
| 2.miR-4521和FAM129A在ccRCC中表达水平及相关性分析 | 第26-27页 |
| 3.miR-4521和FAM129A在ccRCC细胞株中的表达水平 | 第27-28页 |
| 讨论 | 第28-29页 |
| 结论 | 第29-30页 |
| 参考文献 | 第30-32页 |
| 第二部分 过表达miR-4521对FAM129A影响以及二者靶向关系分析 | 第32-42页 |
| 材料与方法 | 第32-36页 |
| 1.实验材料 | 第32-33页 |
| 1.1.细胞株及菌株 | 第32页 |
| 1.2.实验仪器与试剂 | 第32-33页 |
| 2.实验方法 | 第33-36页 |
| 2.1.在ccRCC细胞中瞬时转染过表达miR-4521 | 第33页 |
| 2.2.miR-4521过表达对FAM129A表达水平的影响 | 第33页 |
| 2.3.双荧光素酶报告基因载体的扩增 | 第33-35页 |
| 2.4.双荧光素酶报告实验检测miR-4521与FAM129A的靶向结合 | 第35-36页 |
| 2.5.统计学分析 | 第36页 |
| 结果 | 第36-40页 |
| 1.瞬时转染过表达miR-4521对ccRCC细胞株中miR-4521和FAM129A水平的影响 | 第36-37页 |
| 2.双荧光素酶报告基因检测miR-4521和FAM129A靶向结合 | 第37-40页 |
| 讨论 | 第40页 |
| 结论 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-42页 |
| 第三部分 miR-4521调控786-O和ACHN细胞恶性表型及作用机制研究 | 第42-52页 |
| 材料与方法 | 第42-44页 |
| 1.实验材料 | 第42-43页 |
| 1.1.细胞株及培养条件 | 第42页 |
| 1.2.实验仪器与试剂 | 第42-43页 |
| 2.实验方法 | 第43-44页 |
| 2.0.在786-O和ACHN细胞中瞬时转染过表达miR-4521 | 第43页 |
| 2.1.MTT法检测miR-4521过表达对786-O和ACHN增殖能力影响 | 第43页 |
| 2.2.Transwell小室法检测miR-4521过表达对786-O和ACHN迁移能力影响 | 第43-44页 |
| 2.3.Transwell小室法检测miR-4521过表达对786-O和ACHN侵袭能力影响 | 第44页 |
| 2.4.流式细胞仪检测过表达miR-4521对786-O和ACHN细胞凋亡能力的影响 | 第44页 |
| 2.5.miR-4521过表达对TIMP-1/MMP2/MMP9和MDM2/p53/Bcl2/Bax蛋白水平影响 | 第44页 |
| 2.6.统计学分析 | 第44页 |
| 结果 | 第44-48页 |
| 1.miR-4521过表达降低786-O和ACHN体外增殖能力 | 第44-45页 |
| 2.miR-4521过表达减弱786-O和ACHN体外迁移和侵袭能力 | 第45-46页 |
| 3.miR-4521过表达促进786-O和ACHN凋亡 | 第46-47页 |
| 4.miR-4521过表达对TIMP-1/MMP2/MMP9和MDM2/p53/Bcl2/Bax水平影响 | 第47-48页 |
| 讨论 | 第48-49页 |
| 结论 | 第49-50页 |
| 参考文献 | 第50-52页 |
| 第四部分 FAM129A敲降对786-O和ACHN细胞恶性表型的影响及作用机制 | 第52-61页 |
| 材料与方法 | 第52页 |
| 1.实验材料 | 第52页 |
| 1.1.细胞株及培养条件 | 第52页 |
| 1.2.实验仪器与试剂 | 第52页 |
| 2.实验方法 | 第52页 |
| 2.1.siRNA干扰FAM129A表达 | 第52页 |
| 结果 | 第52-57页 |
| 1.获得FAM129A敲降明显的siRNA | 第52-53页 |
| 2.FAM129A敲降降低786-O和ACHN体外增殖能力 | 第53页 |
| 3.FAM129A敲降减弱786-O和ACHN体外迁移和侵袭能力 | 第53-54页 |
| 4.FAM129A水平降低促进786-O和ACHN凋亡 | 第54-55页 |
| 5.FAM129A敲降影响TIMP-1/MMP2/MMP9和MDM2/p53/Bcl2/Bax表达水平 | 第55-57页 |
| 讨论 | 第57-58页 |
| 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-61页 |
| 综述 | 第61-69页 |
| 参考文献 | 第65-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
