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鸡毒支原体JN株的分离鉴定及PCR检测方法的建立

中文摘要第1-9页
Abstract第9-11页
引言第11-24页
实验一 鸡毒支原体JN 株的分离培养和鉴定第24-28页
 1 材料和方法第24-25页
   ·MG 平板凝集抗原及抗血清第24页
   ·病料第24页
   ·培养基第24页
   ·分离培养第24页
   ·初步鉴定第24-25页
     ·L-型细菌检验第24-25页
     ·菌体形态观察第25页
     ·四氮唑还原试验第25页
     ·菌落着色第25页
     ·生长抑制试验第25页
     ·鸡胚感染试验第25页
     ·鸡红细胞吸附试验第25页
 2 结果第25-26页
   ·分离培养第25页
   ·初步鉴定第25-26页
     ·L-型细菌检验第25页
     ·菌体形态观察第25页
     ·四氮唑还原试验第25-26页
     ·菌落着色第26页
     ·生长抑制试验第26页
     ·鸡胚感染试验第26页
     ·鸡红细胞吸附试验第26页
 3 讨论与小结第26-28页
实验二 鸡毒支原体JN 株的生物学特性及结构蛋白分析第28-32页
 1 材料与方法第28-29页
   ·MG 菌株第28页
   ·鸡血清及SPF 鸡胚第28页
   ·培养基第28页
   ·血清对MG 生长的影响第28页
   ·不同代次MG 在培养基上的生长稳定性第28-29页
   ·致病性试验第29页
   ·结构蛋白SDS-PAGE 分析第29页
 2 结果第29-31页
   ·血清对MG 生长的影响第29页
   ·MG 对鸡气管环的致病性试验结果第29-30页
   ·结构蛋白SDS-PAGE 结果第30-31页
 3 讨论与小结第31-32页
实验三 三种支原体多重PCR 检测方法的建立及应用第32-39页
 1 材料与方法第32-35页
   ·菌株第32页
   ·试剂第32页
   ·引物第32-33页
   ·培养物制备第33页
   ·DNA 提取第33-34页
   ·DNA 粗制物制备第34页
   ·单一PCR 反应第34页
   ·单管多重PCR 反应体系的优化及特异性分析第34-35页
   ·PCR 用于鸡毒支原体临床样品的检测第35页
 2 结果第35-37页
   ·多重PCR 最佳反应体系第35页
   ·多重PCR 扩增结果及特异性分析第35-37页
   ·PCR 对临床样品的检测结果第37页
 3 讨论和小结第37-39页
实验四 多重RT-PCR 诊断禽支原体与其他呼吸道病原方法建立及应用第39-46页
 1 材料和方法第39-43页
   ·病毒株第39页
   ·鸡胚第39页
   ·试剂第39页
   ·引物第39-40页
   ·支原体培养和病毒增殖第40页
   ·RNA、DNA 提取第40-41页
     ·MG、MS 的DNA 提取第40-41页
     ·AVI、NDV、IBV 的RNA 提取第41页
     ·ILTV 的DNA 提取第41页
   ·cDNA 的制备第41-42页
   ·单一PCR/单一RT-PCR 反应第42页
   ·单管多重RT-PCR 反应体系的优化第42-43页
 2 结果第43-44页
   ·单一PCR/RT-PCR 反应结果第43页
   ·多重RT-PCR 扩增结果及优化后的反应体系第43页
   ·多重RT-PCR 的扩增结果第43-44页
 3 结果与小结第44-46页
实验五 不同方法处理种蛋对控制鸡毒支原体病的效果试验第46-50页
 1 材料与方法第46-47页
   ·材料第46页
   ·方法第46-47页
     ·浸泡法第46-47页
     ·温差法第47页
     ·熏蒸法第47页
   ·检测方法第47页
 2 结果第47-48页
 3 讨论与小结第48-50页
结论第50-51页
参考文献第51-57页
致谢第57-58页
攻读学位期间发表的论文第58页

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