| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 前言 | 第12-16页 |
| 研究材料(资料、内容)与方法 | 第16-34页 |
| 1 主要仪器及试剂配制 | 第16-20页 |
| 1.1 实验主要仪器 | 第16-17页 |
| 1.2 实验试剂及配剂 | 第17页 |
| 1.2.1 肝癌细胞来源 | 第17页 |
| 1.2.2 慢病毒来源 | 第17页 |
| 1.3 实验主要试剂 | 第17-20页 |
| 2 实验步骤与方法 | 第20-33页 |
| 2.1 细胞培养 | 第20-22页 |
| 2.1.1 细胞培养条件 | 第20页 |
| 2.1.2 实验材料准备 | 第20页 |
| 2.1.3 细胞复苏 | 第20-21页 |
| 2.1.4 细胞传代 | 第21-22页 |
| 2.1.5 细胞换液 | 第22页 |
| 2.1.6 细胞冻存 | 第22页 |
| 2.2 构建HPSERNAiHepG2细胞株 | 第22-23页 |
| 2.2.1 细胞接种 | 第22页 |
| 2.2.2 细胞转染 | 第22-23页 |
| 2.2.3 换液、观察和筛选 | 第23页 |
| 2.3 细胞功能实验 | 第23-25页 |
| 2.3.1 平板克隆实验 | 第23-24页 |
| 2.3.2 细胞划痕实验 | 第24-25页 |
| 2.3.3 细胞迁移实验 | 第25页 |
| 2.3.4 侵袭实验 | 第25页 |
| 2.4 裸鼠皮下荷瘤实验 | 第25-26页 |
| 2.5 荧光定量qPCR实验 | 第26-30页 |
| 2.5.1 细胞RNA的提取 | 第26-27页 |
| 2.5.2 检测RNA浓度及质量 | 第27页 |
| 2.5.3 cDNA合成(逆转录反应) | 第27-28页 |
| 2.5.4 荧光定量PCR | 第28-30页 |
| 2.6 Western-Blot实验步骤 | 第30-33页 |
| 2.6.1 细胞总蛋白提取 | 第30页 |
| 2.6.2 二喹啉甲酸(BCA)蛋白定量 | 第30-31页 |
| 2.6.3 聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE电泳) | 第31-32页 |
| 2.6.4 转膜 | 第32-33页 |
| 2.6.5 封闭 | 第33页 |
| 2.6.6 抗体孵育 | 第33页 |
| 2.6.7 ECL化学发光及成像 | 第33页 |
| 3 统计学处理 | 第33-34页 |
| 结果 | 第34-43页 |
| 讨论 | 第43-47页 |
| 结论 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-54页 |
| 综述 | 第54-75页 |
| 参考文献 | 第65-75页 |
| 附录 | 第75-78页 |
| 作者简介及读研期间主要科研成果 | 第78-79页 |
| 致谢 | 第79页 |