| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 中英文缩略词表 | 第9-11页 |
| 第1章 前言 | 第11-13页 |
| 第2章 材料与方法 | 第13-23页 |
| 2.1 材料 | 第13-15页 |
| 2.1.1 细胞来源 | 第13页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第13页 |
| 2.1.3 主要试剂及耗材 | 第13-14页 |
| 2.1.4 实验试剂配制 | 第14-15页 |
| 2.2 实验方法 | 第15-17页 |
| 2.2.1 细胞复苏 | 第15页 |
| 2.2.2 细胞传代培养 | 第15页 |
| 2.2.3 细胞计数 | 第15页 |
| 2.2.4 细胞冻存 | 第15页 |
| 2.2.5 实验分组 | 第15-16页 |
| 2.2.6 FLIPL-siRNA 质粒构建 | 第16页 |
| 2.2.7 FLIPL-siRNA 转染 | 第16-17页 |
| 2.2.8 引物序列设计 | 第17页 |
| 2.3 FLIPL-siRNA 转染 PC3 细胞后 FLIPLmRNA,caspase-8 mRNA 的表达水平 | 第17-19页 |
| 2.3.1 总 RNA 提取 | 第17-18页 |
| 2.3.2 逆转录合成 cDNA | 第18页 |
| 2.3.3 荧光定量 PCR 反应 | 第18-19页 |
| 2.4 FLIPL-siRNA 转染 PC3 细胞后 FLIPL蛋白水平的变化 | 第19-21页 |
| 2.4.1 细胞总蛋白提取 | 第19页 |
| 2.4.2 SDS-聚丙烯酞胺凝胶电泳（SDS-PAGE） | 第19-20页 |
| 2.4.3 转膜 | 第20页 |
| 2.4.4 封闭 | 第20页 |
| 2.4.5 洗膜与杂交 | 第20页 |
| 2.4.6 显色 | 第20-21页 |
| 2.5 MTT 法检测 FLIPL-siRNA 转染后 PC3 细胞的生长抑制作用 | 第21页 |
| 2.6 Annexin V-FITC/PI 双染标记细胞凋亡检测 | 第21-22页 |
| 2.7 FLIPL-siRNA 转染后 PC3 细胞侵袭性检测 | 第22页 |
| 2.7.1 Transwell 小室制备 | 第22页 |
| 2.7.2 细胞侵袭模型的建立 | 第22页 |
| 2.8 统计学处理 | 第22-23页 |
| 第3章 结果 | 第23-28页 |
| 3.1 FLIPLmRNA，caspase-8 mRNA 在 PC3 细胞中的表达水平及 FLIPL-siRNA的筛选 | 第23-25页 |
| 3.1.1 扩增曲线结果 | 第23页 |
| 3.1.2 QPCR 测定 FLIPLmRNA 表达水平 | 第23-24页 |
| 3.1.3 FLIPL-siRNA 对 PC3 细胞 caspase-8 mRNA 表达水平影响 | 第24-25页 |
| 3.2 FLIPL蛋白在 PC3 细胞中的表达 | 第25页 |
| 3.3 FLIPL-siRNA 对 PC3 细胞生物学特征的影响 | 第25-28页 |
| 3.3.1 FLIPL-siRNA 对 PC3 细胞的生长抑制作用 | 第25-26页 |
| 3.3.2 FLIPL-siRNA 对 PC3 细胞凋亡的影响 | 第26-27页 |
| 3.3.3 FLIPL-siRNA 对 PC3 细胞侵袭性的影响 | 第27-28页 |
| 第4章 讨论 | 第28-32页 |
| 4.1 FLIP 基因的研究进展 | 第28页 |
| 4.2 靶向 siRNA 能有效抑制 FLIP 基因的表达 | 第28-29页 |
| 4.3 抑制 FLIP 基因表达可上调 caspase-8 的表达 | 第29页 |
| 4.4 FLIP 表达水平对 PCa 化疗，内分泌治疗敏感性的影响 | 第29-30页 |
| 4.4.1 FLIP 与 PCa 化疗 | 第29页 |
| 4.4.2 FLIP 与 PCa 内分泌治疗 | 第29-30页 |
| 4.5 siRNA 抑制 FLIP 基因表达对 PC3 细胞生物学特征的影响 | 第30-31页 |
| 4.6 FLIP 基因作为 PCa 基因治疗靶点的可行性有待进一步研究 | 第31-32页 |
| 第5章 结论 | 第32-33页 |
| 致谢 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-36页 |
| 附图 | 第36-38页 |
| 综述 | 第38-44页 |
| 参考文献 | 第42-44页 |
