| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 缩略符号说明 | 第12-14页 |
| 第一章 前言 | 第14-34页 |
| 1.1 TAT蛋白 | 第15-22页 |
| 1.1.1 TAT蛋白的结构特点 | 第16-17页 |
| 1.1.2 TAT蛋白的入胞机制 | 第17-19页 |
| 1.1.2.1 直接内化途径 | 第18页 |
| 1.1.2.2 内吞途径 | 第18-19页 |
| 1.1.3 TAT蛋白引发HIV的感染途径及其并发症 | 第19-21页 |
| 1.1.4 TAT穿膜肽的靶向抑制剂 | 第21-22页 |
| 1.2 糖胺聚糖 | 第22-25页 |
| 1.2.1 肝素/硫酸乙酰肝素 | 第23-25页 |
| 1.2.2 硫酸软骨素/硫酸皮肤素 | 第25页 |
| 1.2.3 透明质酸 | 第25页 |
| 1.2.4 硫酸角质素 | 第25页 |
| 1.3 糖胺聚糖与TAT穿膜肽相互作用的研究 | 第25-29页 |
| 1.4 糖胺聚糖与TAT穿膜肽相互作用的分析方法 | 第29-32页 |
| 1.4.1 凝胶迁移率变动分析方法 | 第29-30页 |
| 1.4.2 细胞摄取实验 | 第30-31页 |
| 1.4.3 核磁共振波谱 | 第31-32页 |
| 1.5 本课题创新点及研究意义 | 第32-34页 |
| 第二章 糖胺聚糖寡糖的制备 | 第34-39页 |
| 2.1 引言 | 第34页 |
| 2.2 实验仪器与试剂 | 第34-36页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第34-35页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第35-36页 |
| 2.3 实验方法 | 第36-37页 |
| 2.3.1 酶解缓冲液的制备 | 第36页 |
| 2.3.2 HS和DS样品的制备 | 第36页 |
| 2.3.3 肝素及其硫酸软骨素酶解方法 | 第36页 |
| 2.3.4 分离纯化糖胺聚糖寡糖 | 第36-37页 |
| 2.4 实验结果及讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 凝胶迁移率变动分析方法对糖胺聚糖与TAT穿膜肽相互作用的研究 | 第39-58页 |
| 3.1 引言 | 第39页 |
| 3.2 实验仪器与试剂 | 第39-41页 |
| 3.2.1 实验仪器 | 第39-40页 |
| 3.2.2 实验试剂 | 第40-41页 |
| 3.3 实验方法 | 第41-49页 |
| 3.3.1 AMAC标记糖胺聚糖的缓冲体系 | 第41页 |
| 3.3.2 AMAC标记糖胺聚糖的方法 | 第41-42页 |
| 3.3.3 琼脂糖凝胶电泳缓冲溶液 | 第42页 |
| 3.3.4 琼脂糖凝胶电泳方法 | 第42页 |
| 3.3.5 糖胺聚糖与TAT穿膜肽相互作用体系及配比 | 第42-49页 |
| 3.3.5.1 糖胺聚糖多糖与TAT穿膜肽配比 | 第42-45页 |
| 3.3.5.2 糖胺聚糖寡糖与TAT穿膜肽的相互作用配比 | 第45-47页 |
| 3.3.5.3 选择性脱硫酸基团的肝素四糖与TAT穿膜肽相互作用的配比 | 第47-48页 |
| 3.3.5.4 HEP-dp4,DS-dp8与TAT穿膜肽及其突变序列的相互作用配比 | 第48-49页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第49-58页 |
| 3.4.1 糖胺聚糖多糖与TAT穿膜肽的相互作用 | 第50-51页 |
| 3.4.2 糖胺聚糖寡糖与TAT穿膜肽的相互作用 | 第51-54页 |
| 3.4.3 选择性脱硫酸基团的肝素四糖与TAT穿膜肽的相互作用 | 第54页 |
| 3.4.4 HEP-dp4,DS-dp8与TAT穿膜肽及其突变序列肽段的相互作用 | 第54-58页 |
| 第四章 细胞摄取实验研究糖胺聚糖对TAT穿膜肽入胞的抑制作用 | 第58-70页 |
| 4.1 引言 | 第58页 |
| 4.2 实验仪器与试剂 | 第58-60页 |
| 4.2.1 实验仪器及耗材 | 第58-59页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第59-60页 |
| 4.3 实验方法 | 第60-62页 |
| 4.3.1 细胞培养 | 第60-62页 |
| 4.3.1.1 试剂配置 | 第60页 |
| 4.3.1.2 细胞复苏及传代 | 第60-61页 |
| 4.3.1.3 荧光显微镜初步观察TAT穿膜肽的入胞情况 | 第61页 |
| 4.3.1.4 流式细胞仪定量检测糖胺聚糖对FITC-TAT穿膜肽入胞情况的影响 | 第61-62页 |
| 4.3.1.5 高灵敏度激光共聚焦显微镜定性观察糖胺聚糖对FITC-TAT穿膜肽入胞情况的影响 | 第62页 |
| 4.4 实验结果及讨论 | 第62-70页 |
| 4.4.1 荧光显微镜初步观察TAT穿膜肽的入胞情况 | 第62-66页 |
| 4.4.2 流式细胞仪定量检测糖胺聚糖对FITC-TAT穿膜肽入胞情况的影响 | 第66-68页 |
| 4.4.3 高灵敏度激光共聚焦显微镜定性观察糖胺聚糖对FITC-TAT穿膜肽入胞情况的影响 | 第68-70页 |
| 第五章 核磁共振技术对糖胺聚糖与TAT穿膜肽相互作用的研究 | 第70-79页 |
| 5.1 引言 | 第70页 |
| 5.2 实验仪器与试剂 | 第70-71页 |
| 5.2.1 实验仪器 | 第70-71页 |
| 5.2.2 实验试剂 | 第71页 |
| 5.3 实验方法 | 第71-72页 |
| 5.3.1 氘代缓冲液的配置 | 第71-72页 |
| 5.3.2 相互作用体系的配置 | 第72页 |
| 5.4 实验结果与讨论 | 第72-79页 |
| 第六章 结论 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第87-88页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第88页 |
