提要 | 第4-5页 |
前言 | 第5-7页 |
中文摘要 | 第7-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
英文缩写词表 | 第16-17页 |
第1章 文献综述 | 第17-23页 |
1.1 紧密连接蛋白 CLDNs 的功能 | 第17-19页 |
1.2 紧密连接蛋白 CLDNs 作用的相关研究进展 | 第19-21页 |
1.3 紧密连接蛋白 CLDN6 对肿瘤的作用及意义 | 第21-22页 |
1.4 展望和挑战 | 第22-23页 |
第2章 材料与方法 | 第23-41页 |
2.1 实验材料 | 第23-27页 |
2.1.1 主要仪器设备 | 第23-24页 |
2.1.2 主要试剂和耗材 | 第24-25页 |
2.1.3 配置实验试剂 | 第25-26页 |
2.1.4 引物设计合成及抗体 | 第26-27页 |
2.1.5 实验动物 | 第27页 |
2.1.6 细胞株 | 第27页 |
2.2 实验方法 | 第27-40页 |
2.2.1 细胞培养 | 第27-28页 |
2.2.2 检测 CLDN6 在细胞株中的表达 | 第28页 |
2.2.3 RT-PCR 方法检测 NCW460 和 SW1116 细胞株中 CLDN6 的表达 | 第28-29页 |
2.2.4 Western Blot 法检测 NCW460 和 SW1116 细胞株中 CLDN6 蛋白表达 | 第29-31页 |
2.2.5 CLDN6 稳定克隆的筛选及鉴定 | 第31-36页 |
2.2.6 实验分组 | 第36页 |
2.2.7 CLDN6 对 SW1116 细胞增殖的影响 | 第36页 |
2.2.8 CLDN6 对 SW1116 细胞凋亡的影响 | 第36-38页 |
2.2.9 CLDN6 对 SW1116 细胞转移的影响 | 第38-39页 |
2.2.10 CLDN6 对结肠癌细胞 SW1116 裸鼠体内成瘤能力的影响 | 第39-40页 |
2.2.11 阳性标准判定 | 第40页 |
2.3 统计学处理 | 第40-41页 |
第3章 结果 | 第41-54页 |
3.1 检测细胞株中 CLDN6 表达情况 | 第41-42页 |
3.1.1 RT-PCR 检测 CLDN6 的表达 | 第41页 |
3.1.2 Western Blot 法检测 CLDN6 的表达 | 第41-42页 |
3.2 SW1116 细胞稳定克隆的筛选及鉴定 | 第42-45页 |
3.2.1 单克隆细胞的挑取 | 第42-43页 |
3.2.2 RT-PCR 鉴定转染后 SW1116 细胞中 CLDN6 的表达 | 第43页 |
3.2.3 Western blot 法鉴定转染后 SW1116 细胞中 CLDN6 的表达 | 第43-44页 |
3.2.4 细胞免疫荧光染色法检测 SW1116 细胞 CLDN6 的定位 | 第44-45页 |
3.3 CLDN6 对结肠癌细胞 SW1116 增殖的影响 | 第45-47页 |
3.3.1 CCK8 法绘制细胞生长曲线 | 第45-46页 |
3.3.2 二维平板克隆形成实验检测 SW1116 细胞的二维克隆形成能力 | 第46-47页 |
3.4 CLDN6 对结肠癌细胞 SW1116 凋亡的影响 | 第47-49页 |
3.4.1 DAPI 法检测细胞凋亡 | 第47-49页 |
3.4.2 DNA Ladder 实验检测细胞凋亡 | 第49页 |
3.5 CLDN6 对 SW1116 细胞转移能力的影响 | 第49-52页 |
3.5.1 划痕实验检测细胞体外迁移能力 | 第49-51页 |
3.5.2 Transwell 小室法检测细胞体外侵袭能力 | 第51-52页 |
3.6 CLDN6 对 SW1116 细胞在裸鼠体内成瘤能力的影响 | 第52-54页 |
3.6.1 检测细胞在裸鼠体内的成瘤率、成瘤重量和成瘤体积 | 第52-53页 |
3.6.2 检测裸鼠肿瘤组织中 CLDN6 的表达 | 第53-54页 |
第4章 讨论 | 第54-59页 |
4.1 序言 | 第54-55页 |
4.2 CLDN6 对结肠癌细胞 SW1116 恶性表型的抑制作用 | 第55-59页 |
第5章 结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第66-67页 |
致谢 | 第67-68页 |