| 摘要 | 第4-9页 |
| Abstract | 第9-15页 |
| 1 引言 | 第24-70页 |
| 1.1 抗虫基因来源及杀虫机理 | 第25-34页 |
| 1.1.1 微生物来源的抗虫基因－Bt 基因 | 第25-28页 |
| 1.1.2 植物来源的抗虫基因 | 第28-33页 |
| 1.1.3 动物来源的抗虫基因 | 第33-34页 |
| 1.2 农杆菌介导的遗传转化 | 第34-36页 |
| 1.2.1 农杆菌（Agrobacterium） | 第34-35页 |
| 1.2.2 Ti 质粒及 T-DNA | 第35-36页 |
| 1.3 多基因聚合的复合性状转基因植物发展趋势 | 第36-38页 |
| 1.4 获得基因叠加的主要方法 | 第38-41页 |
| 1.4.1 二次转化法 | 第38-39页 |
| 1.4.2 杂交聚合法 | 第39-40页 |
| 1.4.3 共转化法 | 第40-41页 |
| 1.5 转基因植物的筛选鉴定方法 | 第41-49页 |
| 1.5.1 选择标记基因与报告基因 | 第42-44页 |
| 1.5.2 DNA 水平的分子鉴定 | 第44-46页 |
| 1.5.3 外源基因在转录水平的分子鉴定 | 第46-47页 |
| 1.5.4 外源基因在翻译水平的分子鉴定 | 第47-49页 |
| 1.6 抗虫基因在杨树中的应用研究现状 | 第49-54页 |
| 1.6.1 单 Bt 基因在杨树中的应用 | 第49-52页 |
| 1.6.2 蛋白酶抑制剂等其它抗虫基因在杨树中的应用 | 第52-54页 |
| 1.7 转双价或多价抗虫杨研究 | 第54-61页 |
| 1.7.1 Bt 基因与慈姑蛋白酶抑制剂 API 基因联合策略 | 第55-56页 |
| 1.7.2 Bt 基因和豇豆胰蛋白酶抑制剂 CpTI 基因联合策略 | 第56-57页 |
| 1.7.3 Bt 基因和马铃薯蛋白酶抑制剂基因联合策略 | 第57-58页 |
| 1.7.4 Bt 基因和水稻巯基蛋白酶抑制剂基因 OC-I 联合策略 | 第58页 |
| 1.7.5 蛋白酶抑制剂基因之间的联合策略 | 第58-59页 |
| 1.7.6 Bt 基因和半夏凝集素基因 pta 联合策略 | 第59页 |
| 1.7.7 Bt 基因和蜘蛛杀虫肽联合策略 | 第59-60页 |
| 1.7.8 双 Bt 基因联合策略 | 第60-61页 |
| 1.8 转双价或多价抗虫基因植物对昆虫的致死效应 | 第61-64页 |
| 1.9 本课题研究的目的及意义 | 第64-70页 |
| 2 转单、双 BT 基因 741 杨外源基因表达及抗虫性对比研究 | 第70-110页 |
| 2.1 材料 | 第70-75页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第70-71页 |
| 2.1.2 培养基 | 第71-72页 |
| 2.1.3 测试昆虫 | 第72-74页 |
| 2.1.4 主要试剂及试剂盒 | 第74页 |
| 2.1.5 主要仪器 | 第74-75页 |
| 2.2 实验方法 | 第75-92页 |
| 2.2.1 适宜分化和生根培养基筛选 | 第75页 |
| 2.2.2 转基因植株炼苗移栽及田间管理 | 第75-76页 |
| 2.2.3 转基因植株的 PCR 检测 | 第76-80页 |
| 2.2.4 转基因 741 杨的 RT-PCR 和荧光定量 PCR 检测 | 第80-84页 |
| 2.2.5 转基因植株 Bt 毒蛋白测定 | 第84-89页 |
| 2.2.6 转基因植株的抗虫性检测 | 第89-92页 |
| 2.3 结果与分析 | 第92-109页 |
| 2.3.1 适宜分化培养基的确定 | 第92-93页 |
| 2.3.2 适宜生根培养基的确定 | 第93-94页 |
| 2.3.3 生根苗移栽及管理 | 第94-95页 |
| 2.3.4 转基因 741 杨外源基因的 PCR 检测 | 第95-96页 |
| 2.3.5 转基因植株的 RT-PCR 和荧光定量 PCR 检测 | 第96-98页 |
| 2.3.6 转基因植株 Bt 毒蛋白的 ELISA 检测 | 第98-99页 |
| 2.3.7 转基因株系对柳蓝叶甲的致死效应对比 | 第99-107页 |
| 2.3.8 转基因株系对美国白蛾的致死效应对比 | 第107-109页 |
| 2.4 小结 | 第109-110页 |
| 3 巨霸杨双 BT 基因遗传转化及转基因植株的检测 | 第110-127页 |
| 3.1 材料 | 第110-113页 |
| 3.1.1 菌种和质粒 | 第110页 |
| 3.1.2 植物材料 | 第110-111页 |
| 3.1.3 培养基 | 第111-112页 |
| 3.1.4 主要试剂、酶和试剂盒 | 第112-113页 |
| 3.1.5 主要仪器设备 | 第113页 |
| 3.2 试验方法 | 第113-119页 |
| 3.2.1 试验药品的配制 | 第113-114页 |
| 3.2.2 巨霸杨再生体系的建立 | 第114-115页 |
| 3.2.3 潮霉素（Hyg）对叶片分化及茎尖生长的影响 | 第115-116页 |
| 3.2.4 农杆菌介导的巨霸杨遗传转化 | 第116-117页 |
| 3.2.5 转基因植株的抗性鉴定 | 第117-118页 |
| 3.2.6 转基因植株的 DNA 水平检测 | 第118-119页 |
| 3.3 结果与分析 | 第119-126页 |
| 3.3.1 无菌组培苗建立 | 第119-120页 |
| 3.3.2 叶片再生体系的确立 | 第120-121页 |
| 3.3.3 潮霉素（Hyg）对叶片分化及茎尖生长的影响 | 第121-123页 |
| 3.3.4 转双 Bt 基因巨霸杨植株的获得 | 第123-124页 |
| 3.3.5 转基因植株的抗性鉴定 | 第124-125页 |
| 3.3.6 转基因植株的 PCR 检测 | 第125-126页 |
| 3.4 小结 | 第126-127页 |
| 4 讨论 | 第127-134页 |
| 4.1 RT-PCR 与荧光定量 PCR 技术结合 | 第127-128页 |
| 4.2 多抗虫基因聚合的抗虫效应 | 第128-129页 |
| 4.3 转基因植株中外源基因的表达与沉默 | 第129-130页 |
| 4.4 农杆菌介导遗传转化的影响因素 | 第130-131页 |
| 4.5 抗生素在转基因研究中的作用 | 第131-132页 |
| 4.6 筛选标记潮霉素的使用浓度 | 第132-134页 |
| 5 结论 | 第134-138页 |
| 参考文献 | 第138-166页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第166-167页 |
| 作者简介 | 第167-168页 |
| 致谢 | 第168-170页 |
