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肾上腺素通过调节NF-κB信号参与胰腺癌细胞PANC-1凋亡敏感性的研究

缩略语表第8-12页
中文摘要第12-15页
Abstract第15-17页
前言第18-19页
文献回顾第19-34页
    1 胰腺癌的危险因素第19-24页
    2 精神应激和胰腺癌第24-25页
    3 胰腺癌的分子机制第25-27页
    4 NF-κB 和癌症第27-29页
    5 NF-κB 相关 miRNA第29-31页
    6 RNA 结合蛋白 QKI第31-34页
第一部分 肾上腺素对胰腺癌细胞的影响第34-40页
    引言第34页
    1 材料、试剂与仪器第34-35页
        1.1 实验材料第34页
        1.2 主要试剂第34-35页
        1.3 主要仪器第35页
    2 方法第35-37页
        2.1 细胞培养与处理第35页
        2.2 流式细胞仪检测细胞周期第35-36页
        2.3 四唑盐(MTT)比色法检测细胞生长情况第36页
        2.4 Annexin-Ⅴ-FITC/PI 双染检测细胞凋亡第36页
        2.5 免疫印迹法(western-blotting)检测细胞凋亡第36-37页
            2.5.1 细胞总蛋白的获取第36页
            2.5.2 SDS-PAGE 电泳和转移第36-37页
            2.5.3 western-blotting第37页
    3 结果第37-39页
        3.1 肾上腺素影响 PANC-1 细胞的周期分布第37页
        3.2 肾上腺素对细胞增殖的影响第37-38页
        3.3 肾上腺素对顺铂诱导的细胞凋亡的影响第38-39页
    4 讨论第39-40页
第二部分 肾上腺素通过活化 NF-κB 促进细胞增殖和减少凋亡第40-45页
    引言第40页
    1 材料、试剂与仪器第40-41页
        1.1 实验材料第40页
        1.2 主要试剂第40-41页
        1.3 主要仪器第41页
    2 方法第41-42页
        2.1 胞浆/胞核蛋白分离提取(NE-PER 胞浆胞核提取试剂盒)第41页
        2.2 免疫印迹法(western-blotting)第41-42页
            2.2.1 蛋白的处理第41页
            2.2.2 SDS-PAGE 电泳和转移第41页
            2.2.3 western-blotting第41-42页
        2.3 BAY 11-7082 的使用和细胞处理第42页
        2.4 MTT 和凋亡检测第42页
    3 结果第42-44页
        3.1 肾上腺素促进 NF-κB 的活化第42-43页
        3.2 抑制 NF-κB 的活性对肾上腺素诱导的 PANC-1 细胞增殖和抗凋亡的影响第43-44页
    4 讨论第44-45页
第三部分 miR-155 在肾上腺素-NF-κB 信号所致的细胞增殖和抗凋亡中的作用第45-53页
    引言第45页
    1 材料、试剂与仪器第45-46页
        1.1 实验材料第45页
        1.2 主要试剂第45-46页
        1.3 主要仪器第46页
    2 方法第46-48页
        2.1 RNA 的提取和反转录第46-47页
            2.1.1 RNA 提取第46页
            2.1.2 RNA 浓度测定第46页
            2.1.3 反转录第46-47页
        2.2 qRT-PCR 检测 MicroRNA 的表达第47页
            2.2.1 qRT-PCR 引物第47页
            2.2.2 反应体系第47页
            2.2.3 qRT-PCR 反应第47页
        2.3 细胞转染第47-48页
            2.3.1 用于转染的 RNAi duplexes第47页
            2.3.2 利用 LipofectamineTM2000 转染系统进行转染第47-48页
        2.4 MTT 和凋亡检测第48页
    3 结果第48-51页
        3.1 肾上腺素-NF-κB 信号对 miR-155 的影响第48页
        3.2 外源性 miR-155 对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响第48-50页
        3.3 抑制 miR-155 对胰腺癌细胞增殖和凋亡的影响第50-51页
    4 讨论第51-53页
第四部分 肾上腺素影响 NF-κB 信号的机制探讨第53-58页
    引言第53页
    1 材料、试剂与仪器第53-54页
        1.1 实验材料第53页
        1.2 主要试剂第53-54页
        1.3 主要仪器第54页
    2 方法第54-56页
        2.1 目的基因的 qRT-PCR 检测第54-56页
            2.1.1 qRT-PCR 引物第54-55页
            2.1.2 RNA 提取及浓度测定第55页
            2.1.3 反转录为 cDNA第55页
            2.1.4 qRT-PCR 反应体系第55页
            2.1.5 qRT-PCR 反应第55-56页
        2.2 细胞转染第56页
    3 结果第56-57页
        3.1 肾上腺素对 QKI 的影响第56页
        3.2 过表达 QKI 对 NF-κB 转录活性的影响第56-57页
    4 讨论第57-58页
小结第58-59页
参考文献第59-70页
个人简历和研究成果第70-71页
致谢第71页

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