| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 图表目录 | 第7-8页 |
| 第一部分 piggyBac转座子大容量转基因研究 | 第8-44页 |
| 1.1 背景介绍 | 第8-20页 |
| 1.1.1 目前转基因研究的局限 | 第8-10页 |
| 1.1.2 基因治疗简介 | 第10-13页 |
| 1.1.3 转基因和基因治疗的载体分类 | 第13-14页 |
| 1.1.4 病毒载体的应用与不足 | 第14-16页 |
| 1.1.5 转座子在转基因和基因治疗中的应用 | 第16-19页 |
| 1.1.6 大片段转基因的必要性 | 第19-20页 |
| 1.2 材料与方法 | 第20-27页 |
| 1.2.1 质粒构建 | 第20页 |
| 1.2.2 PCR及序列分析 | 第20-21页 |
| 1.2.3 细胞学实验 | 第21-23页 |
| 1.2.4 小鼠培养与转基因表达分析 | 第23-24页 |
| 1.2.5 统计学分析 | 第24页 |
| 1.2.6 引物序列 | 第24-27页 |
| 1.3 结果与分析 | 第27-41页 |
| 1.3.1 P8[shuttle]及PB[BAC]的构建 | 第27-29页 |
| 1.3.2 PB在人类293细胞中介导BAC转座 | 第29-33页 |
| 1.3.3 PB在小鼠中介导BAC转基因 | 第33-36页 |
| 1.3.4 P8介导的BAC转基因在小鼠中表达的组织特异性 | 第36-37页 |
| 1.3.5 P8介导的转基因在小鼠中表达的位置效应分析 | 第37-39页 |
| 1.3.6 PB[BAC]转基因小鼠中RORY及RORYt的表达水平分析 | 第39-41页 |
| 1.4 讨论与展望 | 第41-44页 |
| 第二部分 Otg1突变导致代谢异常的机理研究 | 第44-68页 |
| 2.1 背景介绍 | 第44-55页 |
| 2.1.1 piggyBac转座系统在小鼠体内介导基因插入诱变 | 第44-45页 |
| 2.1.2 糖代谢平衡及调控 | 第45-47页 |
| 2.1.3 激素在血糖调节中的作用及分泌 | 第47-51页 |
| 2.1.4 高尔基体在多肽类激素分泌中的作用 | 第51-53页 |
| 2.1.5 Otg1蛋白的初步研究 | 第53-55页 |
| 2.2 材料与方法 | 第55-58页 |
| 2.2.1 小鼠品系和基因型鉴定 | 第55页 |
| 2.2.2 生长激素水平测定 | 第55页 |
| 2.2.3 cDNA克隆与shRNA构建 | 第55-56页 |
| 2.2.4 蛋白水平检测 | 第56-57页 |
| 2.2.5 统计学分析 | 第57-58页 |
| 2.3 结果与分析 | 第58-66页 |
| 2.3.1 Otg1缺失降低垂体中生长激素的分泌 | 第58-59页 |
| 2.3.2 Otg1缺失降低胰腺中胰岛素和胰高血糖素的产生 | 第59-61页 |
| 2.3.3 质谱寻找和Otg1相互作用的蛋白 | 第61-63页 |
| 2.3.4 Otg1可能通过CaMKll来调节激素的分泌 | 第63-66页 |
| 2.4 讨论与展望 | 第66-68页 |
| 参考文献 | 第68-77页 |
| 博士研究期间发表的文章 | 第77-78页 |
| 致谢 | 第78-80页 |
