缩略词表 | 第5-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-10页 |
前言 | 第11-12页 |
文献回顾 | 第12-42页 |
第一部分 UVB 照射下 GPNMB 表达的变化 | 第42-58页 |
1 材料 | 第42-44页 |
1.1 细胞 | 第42页 |
1.2 主要试剂 | 第42-43页 |
1.3 主要仪器 | 第43-44页 |
1.4 引物 | 第44页 |
1.5 试剂配方 | 第44页 |
2 方法 | 第44-51页 |
2.1 黑色素细胞系 PIG1 的培养与保存 | 第44-45页 |
2.2 PIG1 细胞分组 UV 照射的培养 | 第45页 |
2.3 UVB照射方法及照射剂量的选择 | 第45-46页 |
2.4 MTT 法测定生长曲线 | 第46页 |
2.5 PIG1 细胞的裂解 | 第46页 |
2.6 DEPC 处理实验耗材以去除 RNA 酶 | 第46页 |
2.7 总 RNA 的提取 | 第46-47页 |
2.8 反转录制备 cDNA | 第47-48页 |
2.9 Real-time PCR 测定 mRNA 表达水平 | 第48页 |
2.10 蛋白质浓度的测定 | 第48-49页 |
2.11 变性(SDS)不连续凝胶电泳 | 第49页 |
2.12 免疫印迹和免疫检测(Western Blot) | 第49-50页 |
2.13 用第二抗体偶联物进行免疫检测 | 第50页 |
2.14 间接免疫荧光 | 第50-51页 |
2.15 统计学处理 | 第51页 |
3 结果 | 第51-53页 |
4 讨论 | 第53-58页 |
第二部分 GPNMB 对黑素体形成的影响 | 第58-68页 |
1 材料 | 第58页 |
1.1 主要试剂 | 第58页 |
1.2 主要仪器 | 第58页 |
2 方法 | 第58-61页 |
2.1 实时定量 RT-PCR | 第58页 |
2.2 siRNA 干涉 GPNMB | 第58-59页 |
2.3 细胞活力测定 | 第59页 |
2.4 免疫印迹(Western Blot) | 第59页 |
2.5 电镜检测 | 第59-60页 |
2.6 siRNA 干涉 GPNMB 后对 Tyr 的影响 | 第60页 |
2.7 统计学处理 | 第60-61页 |
3 结果 | 第61-63页 |
4 讨论 | 第63-68页 |
第三部分 GPNMB 在黑素体形成中作用机制的探讨 | 第68-73页 |
1 材料 | 第68页 |
2 方法 | 第68页 |
3 结果 | 第68-69页 |
4 讨论 | 第69-73页 |
小结 | 第73-74页 |
参考文献 | 第74-88页 |
个人简历和研究成果 | 第88-89页 |
致谢 | 第89页 |