| 缩略语表 | 第6-7页 |
| 中文摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 文献回顾 | 第15-46页 |
| 综述一：骨肉瘤治疗的进展 | 第15-21页 |
| 1. 骨肉瘤发病的流行病学 | 第15-16页 |
| 2. 新辅助化疗 | 第16-17页 |
| 3. 手术治疗 | 第17-21页 |
| 综述二：骨肉瘤转移的分子机制及研究进展 | 第21-33页 |
| 1. 迁移和侵袭 | 第22页 |
| 2. 肿瘤细胞在循环系统中存活 | 第22-23页 |
| 3. 肿瘤细胞的抗凋亡作用 | 第23-25页 |
| 4. 肿瘤细胞逃避免疫监视 | 第25-26页 |
| 5. 肿瘤细胞停留并渗出血管 | 第26-28页 |
| 6. 肿瘤细胞的粘附 | 第28-29页 |
| 7. 肿瘤休眠现象（假说） | 第29-31页 |
| 8. 肿瘤血管的生成和肿瘤细胞增殖 | 第31-33页 |
| 综述三： MicroRNA 为抗癌治疗提供了新希望 | 第33-41页 |
| 1. miRNAs 与癌症的发生 | 第34-36页 |
| 2. MiRNAs 与肿瘤转移的关系 | 第36-37页 |
| 3. 使用 miRNAs 的新型治疗方法 | 第37-41页 |
| 综述四： Ezrin 在肿瘤组织中的表达及意义 | 第41-46页 |
| 1. ezrin 在结直肠癌中的研究 | 第41-42页 |
| 2. ezrin 在胃癌中的研究 | 第42页 |
| 3. ezrin 在妇科肿瘤中的研究 | 第42-43页 |
| 4. ezrin 在乳腺癌中的研究 | 第43页 |
| 5. ezrin 在膀胱癌和前列腺癌中的研究 | 第43-44页 |
| 6. 展望及启示 | 第44-46页 |
| 实验一 人类骨肉瘤组织中 Ezrin 的表达 | 第46-53页 |
| 1. 材料及方法 | 第46-47页 |
| 1.1 实验对象 | 第46页 |
| 1.2 实验试剂及仪器 | 第46-47页 |
| 1.3 试剂的配置 | 第47页 |
| 2. 方法及步骤 | 第47-49页 |
| 2.1 HE 染色方法及步骤 | 第47-48页 |
| 2.2 免疫组织化学方法及步骤 | 第48页 |
| 2.3 图像分析方法 | 第48页 |
| 2.4 统计学方法 | 第48-49页 |
| 3 结果 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-52页 |
| 5 小结 | 第52-53页 |
| 实验二 肿瘤细胞 F5M2 与 F4 的生长特性的比较 | 第53-67页 |
| 1 材料及设备 | 第53-55页 |
| 1.1 细胞来源 | 第53页 |
| 1.2 试剂及耗材 | 第53-54页 |
| 1.3 设备 | 第54-55页 |
| 1.4 试剂的配置 | 第55页 |
| 2 方法及步骤 | 第55-58页 |
| 2.1 MTT 法测细胞的增殖速度 | 第55-56页 |
| 2.2 划痕实验 | 第56页 |
| 2.3 Transwell 小室的迁移和侵袭实验 | 第56-57页 |
| 2.3.1 迁移实验（ Migration ） | 第56-57页 |
| 2.3.2 侵袭实验（ Invasion） | 第57页 |
| 2.4 流式细胞仪检测细胞的凋亡 | 第57-58页 |
| 2.5 统计学方法 | 第58页 |
| 3 结果 | 第58-64页 |
| 3.1 MTT 实验 | 第58-59页 |
| 3.2 划痕实验 | 第59-60页 |
| 3.3 transwell 小室实验 | 第60-63页 |
| 3.4 流式细胞仪测定细胞的凋亡 | 第63-64页 |
| 4 讨论 | 第64-66页 |
| 5 小结 | 第66-67页 |
| 实验三 miR- 183 瞬时转染 F5M2 细胞模型的建立及鉴定 | 第67-78页 |
| 1 材料及设备 | 第67-71页 |
| 1.1 细胞来源 | 第67页 |
| 1.2 试剂 | 第67-69页 |
| 1.3 设备 | 第69-70页 |
| 1.4 试剂的配置 | 第70-71页 |
| 2 方法及步骤 | 第71-74页 |
| 2.1 细胞的分组 | 第71页 |
| 2.2 细胞传代 | 第71页 |
| 2.3 细胞转染 | 第71-72页 |
| 2.4 转染后细胞传代 | 第72页 |
| 2.5 Real time - PCR 方法及步骤 | 第72-74页 |
| 2.5.1 总 RNA 的提取 | 第72-73页 |
| 2.5.2 反转录生成 cDNA | 第73页 |
| 2.5.3 RT-PCR | 第73-74页 |
| 2.5.4 real time PCR | 第74页 |
| 2.6 统计学方法 | 第74页 |
| 3 结果 miR -183 | 第74-76页 |
| 3.1 转染效率的检测 | 第74-75页 |
| 3.2 实时定量 PCR 柱状图 | 第75-76页 |
| 4 讨论 | 第76-77页 |
| 5 小结 | 第77-78页 |
| 实验四 瞬时转染外源性 miR - 183 对骨肉瘤细胞 F5M2 生物学行为的影响 | 第78-101页 |
| 1 材料及设备 | 第78-82页 |
| 1.1 细胞来源及分组 | 第78页 |
| 1.2 试剂及耗材 | 第78-80页 |
| 1.3 设备 | 第80-81页 |
| 1.4 试剂的配置 | 第81-82页 |
| 2 方法及步骤 | 第82-87页 |
| 2.1 MTT 法测细胞的增殖 | 第82页 |
| 2.2 划痕实验 | 第82-83页 |
| 2.3 Transwell 小室的迁移和侵袭实验 | 第83-84页 |
| 2.3.1 迁移实验( Migration ) | 第83页 |
| 2.3.2 侵袭实验( Invasion) | 第83-84页 |
| 2.4 流式细胞仪测定细胞的凋亡 | 第84-85页 |
| 2.5 免疫细胞化学 ( ICC) | 第85-86页 |
| 2.5.1 细胞爬片的制备 | 第85页 |
| 2.5.2 免疫化学细胞染色 | 第85-86页 |
| 2.6 Westernblting 实验 | 第86-87页 |
| 2.6.1 蛋白质的提取 | 第86页 |
| 2.6.2 蛋白电泳 | 第86页 |
| 2.6.3 转膜 | 第86-87页 |
| 2.6.4 抗体杂交及发光检测 | 第87页 |
| 2.7 统计学方法 | 第87页 |
| 3 结果 | 第87-92页 |
| 3.1 细胞增殖 | 第87-88页 |
| 3.2 划痕实验 | 第88页 |
| 3.3 transwell 小室实验 | 第88-89页 |
| 3.4 细胞凋亡 | 第89页 |
| 3.5 转染后细胞中 miR- 183 的表达水平 | 第89页 |
| 3.6 免疫细胞化学染色 | 第89-91页 |
| 3.7 Western bloting | 第91页 |
| 3.8 相关性分析 | 第91-92页 |
| 4 讨论 | 第92-99页 |
| 5 小结 | 第99-101页 |
| 全文总结 | 第101-102页 |
| 参考文献 | 第102-125页 |
| 个人简历和研究成果 | 第125-127页 |
| 致谢 | 第127页 |
