| 中文摘要 | 第7-8页 |
| ABSTRACT | 第8页 |
| 缩略语 | 第9-10页 |
| 1 前言 | 第10-25页 |
| 1.1 结核病的危害 | 第10页 |
| 1.2 结核分枝杆菌与结核病 | 第10-12页 |
| 1.2.1 肺结核病简介 | 第11-12页 |
| 1.2.2 肺外结核病简介 | 第12页 |
| 1.3 结核病的防治 | 第12-13页 |
| 1.4 结核病的检测手段 | 第13-23页 |
| 1.4.1 结核病的临床确诊 | 第15页 |
| 1.4.2 胸肺X光检查(CXR) | 第15-16页 |
| 1.4.3 结核菌素皮下测试(TST) | 第16-17页 |
| 1.4.4 抗酸杆菌(acid-fast bacillus,AFB)痰涂片法 | 第17-18页 |
| 1.4.5 培养基法(culture) | 第18-19页 |
| 1.4.6 核酸扩增(NAA)分析 | 第19-20页 |
| 1.4.7 血清学检测 | 第20-23页 |
| 1.5 本研究的目的和意义 | 第23页 |
| 1.6 本研究的主要内容 | 第23-25页 |
| 2 实验材料和方法 | 第25-40页 |
| 2.1 实验材料 | 第25-30页 |
| 2.1.1 实验所用菌株 | 第25-26页 |
| 2.1.2 实验所用抗生素及培养基 | 第26页 |
| 2.1.3 实验所用质粒 | 第26-27页 |
| 2.1.4 实验所用酶、试剂和试剂盒 | 第27页 |
| 2.1.5 实验所用PCR引物序列及片段大小 | 第27-28页 |
| 2.1.6 本研究中的缓冲液及相关试剂的配制 | 第28-30页 |
| 2.2 实验方法 | 第30-40页 |
| 2.2.1 分子生物学基本操作 | 第30页 |
| 2.2.2 结核分枝杆菌基因Rv2309A和Rv1040c、Rv3872等的PCR扩增 | 第30-31页 |
| 2.2.3 pET28a表达载体的改造 | 第31-32页 |
| 2.2.4 蛋白质表达载体pET-Rv2309A和pET-Rv1040c、pET-Rv3872等的构建 | 第32页 |
| 2.2.5 结核分枝杆菌Rv2309A和Rv1040c、Rv3872等蛋白质的诱导表达 | 第32-33页 |
| 2.2.6 结核分枝杆菌Rv2309A和Rv1040c、Rv3872等蛋白质的非变性纯化 | 第33-34页 |
| 2.2.7 结核分枝杆菌Rv2309A和Rv1040c、Rv3872等蛋白质的聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)检测 | 第34-35页 |
| 2.2.8 采用Bradford方法测定结核分枝杆菌Rv2309A和Rv1040c、Rv3872等蛋白质的浓度 | 第35-36页 |
| 2.2.9 间接酶联免疫吸附实验(间接法ELISA) | 第36-38页 |
| 2.2.10 使用商业试剂盒TB-DOT进行结核病的检测(对比实验1) | 第38页 |
| 2.2.11 使用商业试剂盒TB-CHECK-1进行结核病的检测(对比实验2) | 第38-40页 |
| 第三章 结果与分析 | 第40-53页 |
| 3.1 PCR扩增得到结核分枝杆菌基因Rv1040c、Rv2309A和Rv3872 | 第44-45页 |
| 3.2 构建并且验证了蛋白质表达载体pET-Rv1040c、pET-Rv2309A和pET-Rv3872 | 第45-46页 |
| 3.3 在大肠杆菌BL21(DE3)中诱导和试表达了结核分枝杆菌Rv1040c、Rv2309A和Rv3872蛋白质 | 第46-47页 |
| 3.4 用非变性方法纯化结核分枝杆菌Rv1040c、Rv2309A和Rv3872蛋白质 | 第47-48页 |
| 3.5 用Bradford方法定量Rv1040c、Rv2309A和Rv3872蛋白 | 第48页 |
| 3.6 通过酶联免疫吸附(间接ELISA)实验得到结核分枝杆菌Rv1040c、Rv2309A和Rv3872蛋白质作为单独抗原以及Rv1040c+Rv2309A、Rv2309A+Rv3872作为混合抗原诊断效果 | 第48-49页 |
| 3.7 采用商业试剂盒TB-DOT对相同的血清进行检测 | 第49-50页 |
| 3.8 采用商业试剂盒TB-CHECK-1对相同的血清进行检测 | 第50-51页 |
| 3.9 ELISA和TB-DOT,TB-CHECK-1结果分析 | 第51-53页 |
| 4 总结与讨论 | 第53-56页 |
| 4.1 总结 | 第53页 |
| 4.2 讨论 | 第53-56页 |
| 附录 | 第56-59页 |
| 参考文献 | 第59-72页 |
| 致谢 | 第72页 |
