| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 目录 | 第10-14页 |
| 1 前言 | 第14-23页 |
| 1.1 迟缓爱德华氏菌的流行病学研究 | 第14页 |
| 1.2 迟缓爱德华氏菌毒力因子的研究 | 第14-18页 |
| 1.2.1 粘附和侵入 | 第15页 |
| 1.2.2 抵抗宿主的免疫杀伤机制 | 第15页 |
| 1.2.3 铁载体 | 第15-16页 |
| 1.2.4 毒素的产生 | 第16-17页 |
| 1.2.5 分泌系统 | 第17页 |
| 1.2.6 胞内寄生特性 | 第17-18页 |
| 1.2.7 密度感应（quorum sensing, QS） | 第18页 |
| 1.3 细菌侵袭素 | 第18-20页 |
| 1.3.1 侵袭素 | 第18-19页 |
| 1.3.2 侵袭机制 | 第19-20页 |
| 1.4 细菌粘附素和温度敏感性血凝素 | 第20-21页 |
| 1.4.1 菌毛粘附素 | 第20-21页 |
| 1.4.2 非菌毛粘附素 | 第21页 |
| 1.4.3 温度敏感性血凝素 | 第21页 |
| 1.5 本论文研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| 2 迟缓爱德华氏菌侵袭素基因的功能研究 | 第23-53页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-26页 |
| 2.1.1 菌株及质粒 | 第23-24页 |
| 2.1.2 培养基及培养方法 | 第24-25页 |
| 2.1.3 试剂及工具酶 | 第25页 |
| 2.1.4 仪器 | 第25-26页 |
| 2.1.5 细胞系 | 第26页 |
| 2.1.6 实验动物 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-43页 |
| 2.2.1 inv 基因序列分析 | 第26-29页 |
| 2.2.2 inv 基因缺失突变株的构建及筛选 | 第29-35页 |
| 2.2.3 Δinv 缺失突变株的互补株 inv+的构建 | 第35-37页 |
| 2.2.4 侵袭素基因 inv 在野生株 H1、缺失突变株Δinv 和回复突变株 inv+中表达情况的荧光定量 PCR 检测 | 第37-39页 |
| 2.2.5 生长曲线测定 | 第39页 |
| 2.2.6 生物被膜实验 | 第39-40页 |
| 2.2.7 溶血活性检测 | 第40页 |
| 2.2.8 侵染 EPC 细胞的吸附率、内化率检测 | 第40-41页 |
| 2.2.9 致病性实验 | 第41页 |
| 2.2.10 脂多糖 LPS 的提取及 SDS-PAGE 电泳分析 | 第41-42页 |
| 2.2.11 ECP 检测 | 第42-43页 |
| 2.3 实验结果 | 第43-50页 |
| 2.3.1 inv 序列分析与进化树的构建 | 第43页 |
| 2.3.2 inv 缺失突变株的构建 | 第43-45页 |
| 2.3.3 回复突变株 inv+的构建 | 第45页 |
| 2.3.4 荧光定量 PCR 分析回复突变株中 inv 基因的表达情况 | 第45页 |
| 2.3.5 生长曲线 | 第45-46页 |
| 2.3.6 生物被膜检测 | 第46-47页 |
| 2.3.7 溶血活性性检测 | 第47-48页 |
| 2.3.8 侵染 EPC 细胞的吸附率、内化率检测 | 第48页 |
| 2.3.9 细菌对斑马鱼的致病性 | 第48页 |
| 2.3.10 脂多糖 LPS 的提取及 SDS-PAGE 电泳分析 | 第48-49页 |
| 2.3.11 ECP 检测 | 第49-50页 |
| 2.4 讨论 | 第50-51页 |
| 2.4.1 缺失突变株 Δinv 的构建 | 第50页 |
| 2.4.2 inv 过量表达菌株的构建 | 第50页 |
| 2.4.3 inv 对生物被膜形成的影响 | 第50页 |
| 2.4.4 inv 对溶血活性的影响 | 第50-51页 |
| 2.4.5 inv 对 EPC 细胞的吸附和内化的影响 | 第51页 |
| 2.4.6 inv 对致病性的影响 | 第51页 |
| 2.5 小结 | 第51-53页 |
| 3 迟缓爱德华氏菌粘附素基因功能的研究 | 第53-65页 |
| 3.1 实验材料 | 第53-55页 |
| 3.1.1 菌株及质粒 | 第53-54页 |
| 3.1.2 培养基及培养方法 | 第54页 |
| 3.1.3 试剂和仪器 | 第54页 |
| 3.1.4 细胞系 | 第54页 |
| 3.1.5 实验动物 | 第54-55页 |
| 3.2 实验方法 | 第55-58页 |
| 3.2.1 adh 基因序列分析 | 第55页 |
| 3.2.2 adh 基因缺失突变株的构建及筛选 | 第55-57页 |
| 3.2.3 生长曲线测定 | 第57页 |
| 3.2.4 药敏实验 | 第57-58页 |
| 3.2.5 生物被膜实验 | 第58页 |
| 3.2.6 溶血活性检测 | 第58页 |
| 3.2.7 侵染 EPC 细胞的吸附率、内化率检测 | 第58页 |
| 3.2.8 细菌对斑马鱼的致病性试验 | 第58页 |
| 3.3 实验结果 | 第58-63页 |
| 3.3.1 adh 序列分析与进化树的构建 | 第58-59页 |
| 3.3.2 adh 缺失突变株的构建 | 第59-60页 |
| 3.3.3 生长曲线 | 第60-61页 |
| 3.3.4 药敏实验 | 第61页 |
| 3.3.5 生物被膜检测 | 第61-62页 |
| 3.3.6 溶血活性 | 第62-63页 |
| 3.3.7 侵染 EPC 细胞 | 第63页 |
| 3.3.8 细菌对斑马鱼的攻毒试验 | 第63页 |
| 3.4 讨论 | 第63-64页 |
| 3.5 小结 | 第64-65页 |
| 4 迟缓爱德华氏菌温度敏感性血凝素基因功能的研究 | 第65-77页 |
| 4.1 实验材料 | 第65-67页 |
| 4.1.1 菌株及质粒 | 第65-66页 |
| 4.1.2 培养基及培养方法 | 第66页 |
| 4.1.3 试剂和仪器 | 第66页 |
| 4.1.4 细胞系 | 第66页 |
| 4.1.5 实验动物 | 第66-67页 |
| 4.2 实验方法 | 第67-70页 |
| 4.2.1 tsh 基因序列分析 | 第67页 |
| 4.2.2 tsh 基因缺失突变株的构建及筛选 | 第67-69页 |
| 4.2.3 生长曲线测定 | 第69-70页 |
| 4.2.4 药敏实验 | 第70页 |
| 4.2.5 生物被膜实验 | 第70页 |
| 4.2.6 溶血活性检测 | 第70页 |
| 4.2.7 侵染 EPC 细胞的吸附率、内化率检测 | 第70页 |
| 4.2.8 细菌对斑马鱼的致病性试验 | 第70页 |
| 4.3 实验结果 | 第70-75页 |
| 4.3.1 tsh 序列分析与进化树的构建 | 第70-71页 |
| 4.3.2 tsh 缺失突变株的构建 | 第71-72页 |
| 4.3.3 生长曲线 | 第72-73页 |
| 4.3.4 药敏实验 | 第73页 |
| 4.3.5 生物被膜检测 | 第73-74页 |
| 4.3.6 溶血活性检测 | 第74-75页 |
| 4.3.7 侵染 ECP 细胞 | 第75页 |
| 4.3.8 细菌对斑马鱼的攻毒试验 | 第75页 |
| 4.4 讨论 | 第75-76页 |
| 4.5 小结 | 第76-77页 |
| 5 全文总结 | 第77-78页 |
| 参考文献 | 第78-86页 |
| 附录 | 第86-88页 |
| 致谢 | 第88-89页 |
| 个人简历 | 第89页 |
| 发表的学术论文 | 第89-90页 |
