致谢 | 第6-7页 |
中文摘要 | 第7-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
1 引言 | 第13-16页 |
2 文献综述 | 第16-28页 |
2.1 拟南芥GIS基因家族 | 第16-18页 |
2.1.1 锌指蛋白及其分类 | 第16-17页 |
2.1.2 植物C2H2锌指蛋白功能 | 第17-18页 |
2.2 表皮毛的功能 | 第18-19页 |
2.3 烟草腺毛结构功能 | 第19-24页 |
2.3.1 烟草特异性表达 | 第21-22页 |
2.3.2 烟草腺毛特异启动子 | 第22-23页 |
2.3.3 烟草腺毛共享使用特异性启动子的策略和例子 | 第23页 |
2.3.4 腺毛的表达可作为挖掘基因功能的工具 | 第23-24页 |
2.3.5 烟草腺毛工程的其他例子 | 第24页 |
2.4 烟草鲜叶分泌物与香气物质 | 第24-26页 |
2.5 本研究的目的和意义 | 第26-28页 |
3 拟南芥GIS家族基因的克隆载体构建和烟草组织转化 | 第28-46页 |
3.1 材料与方法 | 第28-39页 |
3.1.1 植物材料与生化试剂 | 第28-29页 |
3.1.1.1 试验材料 | 第28页 |
3.1.1.2 菌株 | 第28页 |
3.1.1.3 质粒 | 第28页 |
3.1.1.4 酶及试剂 | 第28-29页 |
3.1.2 实验方法 | 第29-39页 |
3.1.2.1 序列分析 | 第29页 |
3.1.2.2 植物RNA提取 | 第29-30页 |
3.1.2.3 cDNA第一条链的合成 | 第30页 |
3.1.2.4 引物设计及PCR扩增 | 第30-31页 |
3.1.2.5 克隆载体的构建 | 第31-35页 |
3.1.2.6 构建过量表达载体 | 第35-36页 |
3.1.2.7 构建GUS启动子载体 | 第36-37页 |
3.1.2.8 农杆菌介导的烟草愈伤组织转化 | 第37-39页 |
3.1.2.8.1 农杆菌EH105感受态细胞的制备 | 第37页 |
3.1.2.8.2 目的载体转化农杆菌EHA105(电转化) | 第37-38页 |
3.1.2.8.3 烟草的遗传转化 | 第38页 |
3.1.2.8.4 PCR检测烟草转基因植株 | 第38-39页 |
3.2 结果分析 | 第39-45页 |
3.2.1 GIS, GIS2-ZFP6基因序列的分析 | 第39-41页 |
3.2.3 表达载体构建 | 第41-45页 |
3.2.3.1 基因克隆与过量表达载体构建 | 第42页 |
3.2.3.2 启动子载体的构建 | 第42-43页 |
3.2.3.3 农杆菌介导的烟草转化 | 第43-44页 |
3.2.3.4 PCR检测烟草转基因植株 | 第44-45页 |
3.3 讨论 | 第45-46页 |
3.3.1 GIS,GIS2和ZFP6烟草同源基因功能推测 | 第45页 |
3.3.2 农杆菌介导的烟草转基因研究 | 第45-46页 |
4 腺毛特异性表达分析——GUS染色 | 第46-49页 |
4.1 材料与方法 | 第46页 |
4.1.1 试验材料与生化试剂 | 第46页 |
4.1.1.1 试验材料 | 第46页 |
4.1.1.2 生化试剂 | 第46页 |
4.1.2 实验方法 | 第46页 |
4.2 不同时期染色结果分析 | 第46-49页 |
5 不同时期腺毛数量测定 | 第49-56页 |
5.1 材料与方法 | 第49页 |
5.1.1 材料 | 第49页 |
5.1.2 实验方法 | 第49页 |
5.2 结果分析 | 第49-56页 |
6 叶面分泌物测定 | 第56-62页 |
6.1 材料与方法 | 第56-57页 |
6.1.1 试验材料与生化试剂 | 第56页 |
6.1.1.1 试验材料 | 第56页 |
6.1.1.2 生化试剂 | 第56页 |
6.1.2 实验方法 | 第56-57页 |
6.2 结果分析 | 第57-62页 |
7 结论与后续展望 | 第62-63页 |
8 转基因烟草在农业推广中的应用前景 | 第63-65页 |
参考文献 | 第65-71页 |
个人简历 | 第71-72页 |
攻读农业推广硕士学位期间的科研成果 | 第72页 |