| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 引言 | 第9-15页 |
| 1 小麦叶锈病的危害及研究现状 | 第9页 |
| 2 小麦抗叶锈病基因的研究进展 | 第9-10页 |
| 3 NBS profiling 技术及其在植物上的应用 | 第10-11页 |
| 4 抗病基因同源序列法研究进展及对克隆抗病基因的意义 | 第11-12页 |
| 5 NBS-LRR 类抗病基因结构特点 | 第12-13页 |
| 6 生物信息学的发展及其在克隆抗病基因中的应用 | 第13-14页 |
| 7 本研究的主要内容及意义 | 第14-15页 |
| 第一章 利用 NBS profiling 技术筛选小麦抗病同源基因 | 第15-36页 |
| 1 材料与方法 | 第15-26页 |
| 1.1 材料、试剂及仪器 | 第15-17页 |
| 1.1.1 材料 | 第15-16页 |
| 1.1.2 主要试剂及仪器 | 第16-17页 |
| 1.2 试验方法 | 第17-26页 |
| 1.2.1 总 DNA 的制备 | 第17页 |
| 1.2.2 小麦抗叶锈病近等基因系 TcLr35 及感病亲本 Thatcher 接种试验 | 第17页 |
| 1.2.3 小麦叶片总 RNA 的提取及 cDNA 双链的合成 | 第17-19页 |
| 1.2.4 NBS profiling | 第19-22页 |
| 1.2.5 多态性条带的统计与分析 | 第22页 |
| 1.2.6 抗感之间差异片段的克隆、测序 | 第22-26页 |
| 2 结果与分析 | 第26-33页 |
| 2.1 基因组 DNA 的提取 | 第26页 |
| 2.2 酶切连接液检测 | 第26-27页 |
| 2.3 NBS profiling | 第27-33页 |
| 2.3.1 基因组 NBS profiling 扩增结果 | 第27页 |
| 2.3.2 聚类分析 | 第27-28页 |
| 2.3.3 小麦叶片总 RNA 的提取 | 第28-29页 |
| 2.3.4 双链 cDNA 的合成 | 第29-30页 |
| 2.3.5 线性扩增结果 | 第30页 |
| 2.3.6 指数扩增结果 | 第30-31页 |
| 2.3.7 转录组 NBS profiling 扩增结果 | 第31页 |
| 2.3.8 抗感之间差异片段的克隆、测序 | 第31-33页 |
| 3 讨论 | 第33-36页 |
| 3.1 试验材料的选择 | 第33页 |
| 3.2 NBS profiling 方法 | 第33-34页 |
| 3.3 后续工作 | 第34-36页 |
| 第二章 利用 RGA 法筛选 TcLr35 小麦中抗病同源基因 | 第36-50页 |
| 1 材料与方法 | 第36-41页 |
| 1.1 材料、试剂及仪器 | 第36-37页 |
| 1.1.1 材料 | 第36页 |
| 1.1.2 主要试剂及仪器 | 第36页 |
| 1.1.3 引物设计 | 第36-37页 |
| 1.2 试验方法 | 第37-41页 |
| 1.2.1 小麦抗叶锈病近等基因系 TcLr35 接种试验 | 第37页 |
| 1.2.2 小麦叶片总 RNA 的提取及 cDNA 第一链的合成 | 第37-38页 |
| 1.2.3 TcLr35 抗病基因同源片段的克隆及 RT-PCR 验证 | 第38-39页 |
| 1.2.4 生物信息学分析 | 第39页 |
| 1.2.5 系统发育树构建与分析 | 第39-40页 |
| 1.2.6 半定量 RT-PCR 分析 | 第40-41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-48页 |
| 2.1 RT-PCR 方法分离小麦 TcLr35 抗病基因同源片段 | 第41页 |
| 2.2 TcLr35 抗病基因同源片段的电子克隆及 RT-PCR 验证 | 第41-42页 |
| 2.3 生物信息学分析 | 第42-47页 |
| 2.3.1 同源比对及理化性质分析 | 第42-44页 |
| 2.3.2 氨基酸二级结构及其功能结构域分析 | 第44页 |
| 2.3.3 TcLr35-S11A11 编码蛋白结构域及功能位点分析 | 第44-46页 |
| 2.3.4 TcLr35-S11A11 编码蛋白的序列分析 | 第46-47页 |
| 2.4 系统发育分析 | 第47页 |
| 2.5 半定量 RT-PCR 分析 | 第47-48页 |
| 3 讨论 | 第48-50页 |
| 3.1 常用抗病基因克隆方法的比较 | 第48页 |
| 3.2 小麦 TcLr35 中 TcLr35-S11A11 抗病相关基因分析 | 第48-49页 |
| 3.3 后续工作 | 第49-50页 |
| 全文结论 | 第50-51页 |
| 参考文献 | 第51-57页 |
| 附录 | 第57-60页 |
| 在读期间发表的学术论文 | 第60-61页 |
| 作者简介 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
