| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 缩略词表 | 第8-13页 |
| 第一章 前言 | 第13-25页 |
| 第一节 上皮细胞与E-cadherin | 第13-15页 |
| 第二节 上皮间质细胞转化 | 第15-17页 |
| 第三节 EMT转录调控因子Snail及其泛素连接酶 | 第17-18页 |
| 第四节 SCF泛素连接酶复合体 | 第18-20页 |
| 第五节 F-box蛋白家族成员FBXO11 | 第20-22页 |
| 第六节 研究的目的和理论意义 | 第22-25页 |
| 第二章 材料与方法 | 第25-39页 |
| 第一节 实验材料 | 第25-30页 |
| 1、试剂 | 第25-26页 |
| 2、引物 | 第26-27页 |
| 3、慢性病毒shRNA序列 | 第27页 |
| 4、细胞与菌株 | 第27页 |
| 5、重组质粒 | 第27页 |
| 6、缓冲液 | 第27-30页 |
| 7、仪器 | 第30页 |
| 第二节 实验方法 | 第30-39页 |
| 1、GST融合蛋白表达和纯化 | 第30-31页 |
| 2、GST pull down实验 | 第31页 |
| 3、免疫共沉淀（Co-Immunoprecipitation）和免疫印迹（WesternBlotting） | 第31-32页 |
| 4、慢病毒感染细胞（lentivirus Infection） | 第32页 |
| 5、His-tagged融合蛋白表达和纯化 | 第32-33页 |
| 6、秀丽隐杆线虫实验 | 第33页 |
| 7、构建FBXO11缺陷型小鼠 | 第33-34页 |
| 8、细胞培养与处理 | 第34-35页 |
| 9、慢病毒shRNA消耗与实时定量PCR | 第35页 |
| 10、Snail蛋白降解实验 | 第35页 |
| 11、测量Snail半衰期 | 第35页 |
| 12、体内泛素化 | 第35-36页 |
| 13、Transwell细胞体外侵袭实验 | 第36页 |
| 14、细胞划痕愈合迁移实验 | 第36-37页 |
| 15、免疫染色 | 第37页 |
| 16、小鼠肿瘤模型 | 第37页 |
| 17、诱导细胞EMT模型 | 第37-39页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第39-85页 |
| 第一节 实验结果 | 第39-82页 |
| 3.1、FBXO11与Snai1和Snai2相互作用 | 第39-45页 |
| 3.2、FBXO11促进泛素依赖的Snai1和Snai2的降解 | 第45-50页 |
| 3.3、间质细胞中过量表达FBXO11激活上皮细胞表型 | 第50-54页 |
| 3.4、消耗内源性FBXO11稳定上皮细胞Snai1蛋白并能诱导EMT以及肿瘤侵袭 | 第54-66页 |
| 3.5、EMT诱导信号下调FBXO11表达，并且人类癌症中FBXO11表达减少与间质细胞标示物和不良临床结果相一致 | 第66-69页 |
| 3.6、在小鼠中FBXO11失活导致新生致死，E-cadherin表达下降以及表皮发育缺陷 | 第69-74页 |
| 3.7、FBXO11缺失突变体小鼠显示表皮Snai1/2 蛋白丰度增加 | 第74-78页 |
| 3.8、FBXO11-Snail调控在进化上保守并且在秀丽隐杆线虫中FBXO11缺失表型由Snail因子引起 | 第78-82页 |
| 第二节 讨论 | 第82-85页 |
| 第四章 结论 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-95页 |
| 攻博期间发表的学术论文 | 第95-97页 |
| 致谢 | 第97页 |
