摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第11-29页 |
1.1 引言 | 第11-13页 |
1.2 花粉外壁的结构 | 第13-14页 |
1.3 水稻花粉外壁的主要成分—孢粉素 | 第14-16页 |
1.4 花粉外壁的发育 | 第16-25页 |
1.4.1 胼胝质壁的形成与降解 | 第16-18页 |
1.4.2 初生外壁的形成决定孢粉素的沉积 | 第18-20页 |
1.4.3 花粉外壁孢粉素的合成 | 第20-24页 |
1.4.4 花粉外壁前体物质的运输 | 第24-25页 |
1.5 花药绒毡层的发育影响花粉外壁的发育 | 第25-26页 |
1.6 花药绒毡层中调控花药角质层和花粉外壁发育的相关基因 | 第26-27页 |
1.7 本课题主要的研究目的及意义 | 第27-29页 |
第二章 实验方法和结果讨论 | 第29-72页 |
2.1 实验材料 | 第29-34页 |
2.1.1 水稻材料 | 第29页 |
2.1.2 菌株 | 第29页 |
2.1.3 质粒载体 | 第29-30页 |
2.1.4 试剂,产品及服务 | 第30-31页 |
2.1.5 常用试剂配制及培养基的配制 | 第31-34页 |
2.1.6 主要仪器设备 | 第34页 |
2.2 实验方法 | 第34-48页 |
2.2.1 突变体的获得及定位群体的筛选 | 第34页 |
2.2.2 水稻总DNA的提取(CTAB法) | 第34-35页 |
2.2.3 水稻花药RNA的提取(Trizol法) | 第35页 |
2.2.4 图位克隆 | 第35-36页 |
2.2.5 半薄切片技术 | 第36-37页 |
2.2.6 超薄切片技术 | 第37-38页 |
2.2.7 扫描电镜技术 | 第38-39页 |
2.2.8 质粒的提取、酶切及目的片段的回收纯化 | 第39页 |
2.2.9 大肠杆菌DH5a感受态细胞的转化 | 第39页 |
2.2.10 农杆菌EHA105感受态细胞的转化 | 第39页 |
2.2.11 载体的构建 | 第39-40页 |
2.2.12 进化树的构建 | 第40页 |
2.2.13 水稻的组织培养和遗传转化 | 第40-41页 |
2.2.14 水稻花药表面蜡质角质含量的测定 | 第41-44页 |
2.2.15 原位杂交技术 | 第44-47页 |
2.2.16 GUS染色技术 | 第47页 |
2.2.17 GFP转基因植株共聚焦显微镜观察 | 第47-48页 |
2.3 实验结果 | 第48-69页 |
2.3.1 dpw3突变体表现为雄性不育 | 第48-49页 |
2.3.2 dpw3突变体小孢子从第10期开始发育异常 | 第49-51页 |
2.3.3 dpw3突变体的花粉外壁孢粉素沉积异常 | 第51-55页 |
2.3.4 dpw3突变体花药表面角质的含量明显减少 | 第55-59页 |
2.3.5 DPW3基因的遗传定位 | 第59-61页 |
2.3.6 DPW3基因的互补验证 | 第61-62页 |
2.3.7 DPW3基因编码一个脂类转运蛋白 | 第62-64页 |
2.3.8 DPW3基因的进化分析 | 第64-65页 |
2.3.9 DPW3基因在花药中表达 | 第65-66页 |
2.3.10 DPW3基因在小孢子外壁特异性表达 | 第66-67页 |
2.3.11 DPW3蛋白定位在雄性生殖细胞的胞质中 | 第67-69页 |
2.4 讨论 | 第69-72页 |
第三章 总结与展望 | 第72-75页 |
3.1 研究的结论 | 第72-73页 |
3.2 研究展望 | 第73-75页 |
参考文献 | 第75-81页 |
附录1 本研究中用到的主要的引物序列 | 第81-83页 |
致谢 | 第83-85页 |
攻读硕士期间已发表或将发表的学术论文 | 第85页 |