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水稻花粉外壁孢粉素沉积相关基因DPW3(Defective Pollen Wall3)的克隆和功能分析

摘要第6-7页
ABSTRACT第7-8页
第一章 绪论第11-29页
    1.1 引言第11-13页
    1.2 花粉外壁的结构第13-14页
    1.3 水稻花粉外壁的主要成分—孢粉素第14-16页
    1.4 花粉外壁的发育第16-25页
        1.4.1 胼胝质壁的形成与降解第16-18页
        1.4.2 初生外壁的形成决定孢粉素的沉积第18-20页
        1.4.3 花粉外壁孢粉素的合成第20-24页
        1.4.4 花粉外壁前体物质的运输第24-25页
    1.5 花药绒毡层的发育影响花粉外壁的发育第25-26页
    1.6 花药绒毡层中调控花药角质层和花粉外壁发育的相关基因第26-27页
    1.7 本课题主要的研究目的及意义第27-29页
第二章 实验方法和结果讨论第29-72页
    2.1 实验材料第29-34页
        2.1.1 水稻材料第29页
        2.1.2 菌株第29页
        2.1.3 质粒载体第29-30页
        2.1.4 试剂,产品及服务第30-31页
        2.1.5 常用试剂配制及培养基的配制第31-34页
        2.1.6 主要仪器设备第34页
    2.2 实验方法第34-48页
        2.2.1 突变体的获得及定位群体的筛选第34页
        2.2.2 水稻总DNA的提取(CTAB法)第34-35页
        2.2.3 水稻花药RNA的提取(Trizol法)第35页
        2.2.4 图位克隆第35-36页
        2.2.5 半薄切片技术第36-37页
        2.2.6 超薄切片技术第37-38页
        2.2.7 扫描电镜技术第38-39页
        2.2.8 质粒的提取、酶切及目的片段的回收纯化第39页
        2.2.9 大肠杆菌DH5a感受态细胞的转化第39页
        2.2.10 农杆菌EHA105感受态细胞的转化第39页
        2.2.11 载体的构建第39-40页
        2.2.12 进化树的构建第40页
        2.2.13 水稻的组织培养和遗传转化第40-41页
        2.2.14 水稻花药表面蜡质角质含量的测定第41-44页
        2.2.15 原位杂交技术第44-47页
        2.2.16 GUS染色技术第47页
        2.2.17 GFP转基因植株共聚焦显微镜观察第47-48页
    2.3 实验结果第48-69页
        2.3.1 dpw3突变体表现为雄性不育第48-49页
        2.3.2 dpw3突变体小孢子从第10期开始发育异常第49-51页
        2.3.3 dpw3突变体的花粉外壁孢粉素沉积异常第51-55页
        2.3.4 dpw3突变体花药表面角质的含量明显减少第55-59页
        2.3.5 DPW3基因的遗传定位第59-61页
        2.3.6 DPW3基因的互补验证第61-62页
        2.3.7 DPW3基因编码一个脂类转运蛋白第62-64页
        2.3.8 DPW3基因的进化分析第64-65页
        2.3.9 DPW3基因在花药中表达第65-66页
        2.3.10 DPW3基因在小孢子外壁特异性表达第66-67页
        2.3.11 DPW3蛋白定位在雄性生殖细胞的胞质中第67-69页
    2.4 讨论第69-72页
第三章 总结与展望第72-75页
    3.1 研究的结论第72-73页
    3.2 研究展望第73-75页
参考文献第75-81页
附录1 本研究中用到的主要的引物序列第81-83页
致谢第83-85页
攻读硕士期间已发表或将发表的学术论文第85页

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