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组蛋白脱乙酰化酶4与白藜芦醇对软骨细胞分化过程的影响及机制研究

缩略词表第6-10页
摘要第10-13页
Abstract第13-16页
第1章 前言第17-23页
    1.1 关节软骨第17-19页
        1.1.1 关节软骨组成及结构第17页
        1.1.2 软骨细胞分化过程第17-18页
        1.1.3 软骨细胞的稳态第18页
        1.1.4 软骨细胞的调控第18-19页
    1.2 软骨损伤的修复第19-21页
        1.2.1 软骨修复的传统技术第19-20页
        1.2.2 软骨修复技术的革新第20-21页
    1.3 本文所涉及的主要研究内容第21-23页
        1.3.1 HDAC4通过与HIF1α 相互作用促进MSCs软骨分化第21-22页
        1.3.2 白藜芦醇促进软骨细胞肥大化的作用机制研究第22-23页
第2章 HDAC4通过与HIF1α 互作促进MSCs软骨分化第23-46页
    2.1 材料第24-26页
        2.1.1 细胞及慢病毒第24页
        2.1.2 仪器设备第24页
        2.1.3 主要试剂及耗材第24-26页
    2.2 方法第26-33页
        2.2.1 细胞培养第26-27页
        2.2.2 细胞转染及细胞活性测定第27页
        2.2.3 MSCs成软骨分化及肥大化诱导第27-28页
        2.2.4 软骨及肥大分化相关基因mRNA水平检测第28-30页
        2.2.5 Western blot检测第30-32页
        2.2.6 甲苯胺蓝染色第32页
        2.2.7 免疫荧光染色第32页
        2.2.8 PLA探针法(Duolink In Situ)检测蛋白相互作用第32-33页
    2.3 结果与分析第33-43页
        2.3.1 过表达HDAC4细胞系及干扰HDAC4表达细胞系构建第33-36页
        2.3.2 过表达HDAC4促进MSCs成软骨分化第36-37页
        2.3.3 干扰HDAC4表达抑制MSCs成软骨分化第37-38页
        2.3.4 干扰HDAC4表达促进MSCs肥大分化第38页
        2.3.5 过表达HDAC4升高胞内HIF1α 含量第38-40页
        2.3.6 HDAC4与HIF1α 存在直接相互作用第40-41页
        2.3.7 干扰HIF1α 表达抑制MSCs软骨分化第41页
        2.3.8 激活HIF1α 表达促进MSCs软骨分化第41-42页
        2.3.9 干扰HDAC4入核抑制HIF1α 核积累第42-43页
    2.4 讨论与结论第43-46页
第3章 白藜芦醇促进软骨细胞肥大化的作用机制研究第46-62页
    3.1 材料第46-49页
        3.1.1 实验细胞系第46页
        3.1.2 仪器设备第46-47页
        3.1.3 主要试剂及耗材第47-49页
    3.2 方法第49-54页
        3.2.1 细胞培养第49页
        3.2.2 CCK8法测定RES细胞毒性第49页
        3.2.3 ATDC5细胞肥大化诱导第49-50页
        3.2.4 软骨细胞肥大分化相关基因mRNA水平检测第50-52页
        3.2.5 Western blot检测第52-53页
        3.2.6 甲苯胺蓝染色第53-54页
        3.2.7 免疫组织化学染色第54页
    3.3 结果与分析第54-60页
        3.3.1 CCK8检测RES对ATDC5细胞活性的影响第54-55页
        3.3.2 RES抑制ATDC5细胞胞外粘多糖表达第55-56页
        3.3.3 RES促进ATDC5细胞肥大化相关基因表达第56-58页
        3.3.4 RES通过上调 β-catenin和GIL2信号促进ATDC5细胞肥大化第58-60页
    3.4 讨论与结论第60-62页
第4章 全文总结第62-63页
参考文献第63-69页
在学期间取得的成果及发表的代表性论著第69-70页
致谢第70页

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