缩略词表 | 第6-10页 |
摘要 | 第10-13页 |
Abstract | 第13-16页 |
第1章 前言 | 第17-23页 |
1.1 关节软骨 | 第17-19页 |
1.1.1 关节软骨组成及结构 | 第17页 |
1.1.2 软骨细胞分化过程 | 第17-18页 |
1.1.3 软骨细胞的稳态 | 第18页 |
1.1.4 软骨细胞的调控 | 第18-19页 |
1.2 软骨损伤的修复 | 第19-21页 |
1.2.1 软骨修复的传统技术 | 第19-20页 |
1.2.2 软骨修复技术的革新 | 第20-21页 |
1.3 本文所涉及的主要研究内容 | 第21-23页 |
1.3.1 HDAC4通过与HIF1α 相互作用促进MSCs软骨分化 | 第21-22页 |
1.3.2 白藜芦醇促进软骨细胞肥大化的作用机制研究 | 第22-23页 |
第2章 HDAC4通过与HIF1α 互作促进MSCs软骨分化 | 第23-46页 |
2.1 材料 | 第24-26页 |
2.1.1 细胞及慢病毒 | 第24页 |
2.1.2 仪器设备 | 第24页 |
2.1.3 主要试剂及耗材 | 第24-26页 |
2.2 方法 | 第26-33页 |
2.2.1 细胞培养 | 第26-27页 |
2.2.2 细胞转染及细胞活性测定 | 第27页 |
2.2.3 MSCs成软骨分化及肥大化诱导 | 第27-28页 |
2.2.4 软骨及肥大分化相关基因mRNA水平检测 | 第28-30页 |
2.2.5 Western blot检测 | 第30-32页 |
2.2.6 甲苯胺蓝染色 | 第32页 |
2.2.7 免疫荧光染色 | 第32页 |
2.2.8 PLA探针法(Duolink In Situ)检测蛋白相互作用 | 第32-33页 |
2.3 结果与分析 | 第33-43页 |
2.3.1 过表达HDAC4细胞系及干扰HDAC4表达细胞系构建 | 第33-36页 |
2.3.2 过表达HDAC4促进MSCs成软骨分化 | 第36-37页 |
2.3.3 干扰HDAC4表达抑制MSCs成软骨分化 | 第37-38页 |
2.3.4 干扰HDAC4表达促进MSCs肥大分化 | 第38页 |
2.3.5 过表达HDAC4升高胞内HIF1α 含量 | 第38-40页 |
2.3.6 HDAC4与HIF1α 存在直接相互作用 | 第40-41页 |
2.3.7 干扰HIF1α 表达抑制MSCs软骨分化 | 第41页 |
2.3.8 激活HIF1α 表达促进MSCs软骨分化 | 第41-42页 |
2.3.9 干扰HDAC4入核抑制HIF1α 核积累 | 第42-43页 |
2.4 讨论与结论 | 第43-46页 |
第3章 白藜芦醇促进软骨细胞肥大化的作用机制研究 | 第46-62页 |
3.1 材料 | 第46-49页 |
3.1.1 实验细胞系 | 第46页 |
3.1.2 仪器设备 | 第46-47页 |
3.1.3 主要试剂及耗材 | 第47-49页 |
3.2 方法 | 第49-54页 |
3.2.1 细胞培养 | 第49页 |
3.2.2 CCK8法测定RES细胞毒性 | 第49页 |
3.2.3 ATDC5细胞肥大化诱导 | 第49-50页 |
3.2.4 软骨细胞肥大分化相关基因mRNA水平检测 | 第50-52页 |
3.2.5 Western blot检测 | 第52-53页 |
3.2.6 甲苯胺蓝染色 | 第53-54页 |
3.2.7 免疫组织化学染色 | 第54页 |
3.3 结果与分析 | 第54-60页 |
3.3.1 CCK8检测RES对ATDC5细胞活性的影响 | 第54-55页 |
3.3.2 RES抑制ATDC5细胞胞外粘多糖表达 | 第55-56页 |
3.3.3 RES促进ATDC5细胞肥大化相关基因表达 | 第56-58页 |
3.3.4 RES通过上调 β-catenin和GIL2信号促进ATDC5细胞肥大化 | 第58-60页 |
3.4 讨论与结论 | 第60-62页 |
第4章 全文总结 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-69页 |
在学期间取得的成果及发表的代表性论著 | 第69-70页 |
致谢 | 第70页 |