| 目录 | 第1-6页 |
| 图表索引 | 第6-7页 |
| 缩略语 | 第7-9页 |
| 中文摘要 | 第9-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 前言 | 第13-22页 |
| 1 慢性阻塞性肺疾病 | 第13-17页 |
| ·慢性阻塞性肺疾病发展现状 | 第13页 |
| ·慢性阻塞性肺疾病诱导因素及发病机制 | 第13-15页 |
| ·慢性阻塞性肺疾病的病理及病理生理学改变 | 第15-16页 |
| ·慢性阻塞性肺疾病的治疗 | 第16-17页 |
| 2 自噬 | 第17-18页 |
| ·自噬的发生过程及生物学功能 | 第17页 |
| ·自噬与慢性阻塞性肺疾病 | 第17-18页 |
| 3 Sirtuin 1与慢性阻塞性肺疾病 | 第18-19页 |
| 4 FoxO3a与慢性阻塞性肺疾病 | 第19页 |
| 5 白藜芦醇与慢性阻塞性肺疾病 | 第19-20页 |
| 6 Vam3简介 | 第20页 |
| 7 本文研究目标 | 第20-21页 |
| 8 技术路线 | 第21-22页 |
| 材料与方法 | 第22-42页 |
| 1 实验材料 | 第22-30页 |
| ·细胞系及组织标本 | 第22页 |
| ·实验动物 | 第22页 |
| ·主要试剂 | 第22-24页 |
| ·引物的合成与设计 | 第24-25页 |
| ·主要仪器设备 | 第25-26页 |
| ·生物学软件 | 第26页 |
| ·常用试剂的配制 | 第26-30页 |
| 2 实验方法 | 第30-42页 |
| ·烟雾凝集物收集及配制 | 第30-31页 |
| ·细胞的处理 | 第31-32页 |
| ·MTT法测定细胞生存率 | 第32-33页 |
| ·蛋白及细胞总RNA提取 | 第33-34页 |
| ·蛋白和RNA浓度测定 | 第34-35页 |
| ·Western Blot | 第35-36页 |
| ·逆转录与PCR扩增 | 第36-37页 |
| ·免疫沉淀 | 第37页 |
| ·免疫荧光 | 第37页 |
| ·ROS检测 | 第37-38页 |
| ·GSH-Px检测 | 第38-39页 |
| ·体内熏烟小鼠模型建立 | 第39页 |
| ·HE染色 | 第39-40页 |
| ·免疫组织化学 | 第40-41页 |
| ·结果判定 | 第41页 |
| ·统计分析 | 第41-42页 |
| 实验结果 | 第42-60页 |
| 1 白藜芦醇和Vam3对人支气管上皮细胞活力的影响 | 第42-43页 |
| 2 烟雾凝集物诱导人支气管上皮细胞自噬 | 第43-46页 |
| ·烟雾凝集物诱导人支气管上皮细胞自噬的剂量依赖性 | 第43-44页 |
| ·烟雾凝集物诱导人支气管上皮细胞自噬的时间依赖性 | 第44-45页 |
| ·烟雾凝集物诱导人支气管上皮细胞自噬 | 第45-46页 |
| 3 Vam3 抑制烟雾凝集物诱导的人支气管上皮细胞自噬 | 第46-48页 |
| 4 Vam3抑制烟雾凝集物诱导的人支气管上皮细胞中Sirt1的表达及活性下调 | 第48页 |
| 5 Vam3抑制烟雾凝集物诱导的自噬具有Sirt1依赖性 | 第48-50页 |
| ·Sirt1敲降效率检测 | 第49-50页 |
| ·Vam3不能抑制Sirt1敲降细胞的自噬 | 第50页 |
| 6 Vam3对烟雾凝集物处理的人支气管上皮细胞中Fox03a的影响 | 第50-54页 |
| ·Vam3下调人支气管上皮细胞Fox03a的乙酰化水平 | 第51-52页 |
| ·Vam3抑制人支气管上皮细胞Fox03a核转位 | 第52-53页 |
| ·Vam3上调人支气管上皮细胞Fox03a的磷酸化水平 | 第53-54页 |
| ·Vam3抑制烟雾凝集物诱导的人支气管上皮细胞中Fox03a的表达下调 | 第54页 |
| 7 Vam3抑制烟雾凝集物诱导的氧化应激反应 | 第54-56页 |
| ·Vam3抑制人支气管上皮细胞内ROS的生成 | 第54-55页 |
| ·Vam3上调人支气管上皮细胞内GSH-Px的水平 | 第55-56页 |
| 8 Vam3对熏烟小鼠肺部的影响 | 第56-60页 |
| ·Vam3逆转熏烟小鼠肺部的病理改变 | 第56-57页 |
| ·Vam3能够抑制熏烟小鼠肺部自噬并上调Sirt1、FoxO3a的表达 | 第57-60页 |
| 讨论 | 第60-65页 |
| 1 Vam3参与调节烟雾凝集物诱导的肺上皮细胞自噬 | 第61页 |
| 2 Vam3参与调节烟雾凝集物诱导的氧化应激 | 第61-62页 |
| 3 Vam3 调节Sirt1的表达及活性 | 第62-63页 |
| 4 Vam3调节FoxO3a的表达及活性 | 第63-64页 |
| 5 展望 | 第64-65页 |
| 小结 | 第65-66页 |
| 参考文献 | 第66-76页 |
| 基金资助 | 第76-77页 |
| 博士在读期间发表与待发表的文章 | 第77-78页 |
| 文献综述 | 第78-86页 |
| 参考文献 | 第83-86页 |
| 致谢 | 第86-87页 |
