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核盘菌转录因子Ss-Fkh1基因功能研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
第一章 文献综述第12-25页
    1 核盘菌简介第12-17页
        1.1 核盘菌的分类,生活史及其侵染循环第13-15页
        1.2 菌核病病害症状第15-16页
        1.3 菌核病的危害及防治第16-17页
    2 核盘菌菌核发育第17-20页
        2.1 影响核盘菌菌核发育的因素第18-20页
    3 丝状真菌基因功能研究进展第20-23页
        3.1 RNA干扰技术第20-22页
        3.2 转座子标签技术第22页
        3.3 超表达技术第22页
        3.4 基因敲除第22-23页
    4 Forkhead-box转录因子研究进展第23-24页
    5 本研究的目的和意义第24-25页
第二章 核盘菌Ss-Fkh1基因克隆及RNA干扰载体的构建第25-37页
    1 材料第25-26页
        1.1 菌株及载体第25页
        1.2 主要仪器第25页
        1.3 主要试剂第25-26页
        1.4 培养基配制及试剂配制第26页
    2 方法第26-33页
        2.1 Ss-Fkh1基因克隆第26-31页
        2.2 Ss-Fkh1 RNA干扰载体的构建第31-33页
        2.3 Ss-Fkh1 RNA干扰载体的验证第33页
    3 结果与分析第33-35页
        3.1 PCR克隆连入两种载体的Ss-Fkh1片段第33-34页
        3.2 重组质粒酶切鉴定结果第34-35页
    4 小结第35-37页
第三章 筛选核盘菌Ss-Fkh1遗传转化子第37-48页
    1 材料第37-38页
        1.1 载体及菌株第37页
        1.2 主要试剂第37页
        1.3 主要试剂的配制第37-38页
    2 方法第38-43页
        2.1 制备核盘菌菌丝的原生质体第38-40页
        2.2 PEG-Ca Cl2介导核盘菌原生质体的遗传转化第40页
        2.3 2xCTAB提取液配制:第40页
        2.4 pSD-Ss-Fkh1、p S1-Ss-Fkh1, 沉默转化子的筛选第40-41页
        2.5 转化子PCR检测第41-43页
    3 结果与分析第43-47页
        3.1 菌丝培养第43-44页
        3.2 原生质体制备第44页
        3.3 转化子PCR初步检测第44-47页
    4.小结第47-48页
第四章 转录因子Ss-Fkh1的功能验证第48-65页
    1 材料第48-49页
        1.1 菌株第48页
        1.2 主要试剂第48页
        1.3 试剂配制第48-49页
    2 方法第49-53页
        2.1 野生型核盘菌中Ss-Fkh1表达量分析第49页
        2.2 沉默转化子菌丝形态观察第49页
        2.3 沉默转化子菌落形态观察第49页
        2.4 沉默转化子菌丝生长速率测定第49-50页
        2.5 野生型核盘菌与沉默转化子对峙培养第50页
        2.6 黑色素相关基因表达量分析第50-51页
        2.7 沉默转化子致病力的测定第51-52页
        2.8 沉默转化子对过氧化氢耐力测定第52页
        2.9 沉默转化子对高盐环境的耐力测定第52-53页
    3 结果与分析第53-63页
        3.1 野生型核盘菌中Ss-Fkh1表达量分析第53页
        3.2 沉默转化子菌丝形态观察第53-54页
        3.3 沉默转化子菌落形态观察结果第54-55页
        3.4 沉默转化子菌丝生长速率测定第55-56页
        3.5 野生型核盘菌与沉默转化子对峙培养第56-57页
        3.6 黑色素相关基因表达量分析第57-59页
        3.7 沉默转化子致病力的测定第59-60页
        3.8 沉默转化子对过氧化氢耐力测定第60-62页
        3.9 沉默转化子对高盐环境的耐力测定第62-63页
    4 小结第63-65页
结论第65-66页
参考文献第66-71页
致谢第71-72页

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