中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
第1章 绪论 | 第11-25页 |
1.1 脱氧核酶研究发展简史 | 第11页 |
1.2 脱氧核酶反应类型与分类 | 第11-19页 |
1.2.1 断裂型脱氧核酶 | 第12-15页 |
1.2.2 连接型脱氧核酶 | 第15-19页 |
1.2.3 修饰型脱氧核酶 | 第19页 |
1.3 脱氧核酶体外进化与合理设计 | 第19-22页 |
1.3.1 脱氧核酶体外进化 | 第19-20页 |
1.3.2 脱氧核酶合理设计 | 第20-22页 |
1.4 脱氧核酶应用研究 | 第22-25页 |
第2章 实验材料、设备及方法 | 第25-39页 |
2.1 试剂和溶液配制 | 第25-26页 |
2.2 实验仪器 | 第26-27页 |
2.3 实验方法 | 第27-39页 |
2.3.1 酶学性质表征 | 第27-32页 |
2.3.2 催化核心结构与功能关系 | 第32-34页 |
2.3.3 A5G突变体性质表征 | 第34-36页 |
2.3.4 I-R3N脱氧核酶应用探索 | 第36-39页 |
第3章 I-R3脱氧核酶酶学性质与构效关系 | 第39-66页 |
3.1 前言 | 第39-40页 |
3.2 酶学性质表征 | 第40-48页 |
3.2.1 I-R3N和I-R3S脱氧核酶序列及其二级结构 | 第40-41页 |
3.2.2 Zn~(2+)浓度对I-R3N和I-R3S脱氧核酶活性影响 | 第41-42页 |
3.2.3 热变性对I-R3N和I-R3S脱氧核酶活性影响 | 第42-43页 |
3.2.4 NaCl浓度对I-R3N和I-R3S脱氧核酶活性影响 | 第43-44页 |
3.2.5 KCl浓度对I-R3N和I-R3S脱氧核酶活性影响 | 第44页 |
3.2.6 I-R3N和I-R3S脱氧核酶二价金属离子选择性 | 第44-45页 |
3.2.7 金属离子对I-R3N和I-R3S脱氧核酶活性干扰 | 第45-46页 |
3.2.8 Zn~(2+)(无NaCl)对I-R3N和I-R3S脱氧核酶活性影响 | 第46-47页 |
3.2.9 pH对I-R3N和I-R3S脱氧核酶活性影响 | 第47-48页 |
3.2.10 反应时间与I-R3N和I-R3S脱氧核酶断裂程度关系 | 第48页 |
3.3 催化核心构效关系 | 第48-57页 |
3.3.1 I-R3N和I-R3S脱氧核酶磷酸位点鉴定 | 第48-49页 |
3.3.2 I-R3N脱氧核酶催化核心突变体与催化活性关系 | 第49-52页 |
3.3.3 NaCl存在时I-R3N脱氧核酶突变体与活性关系 | 第52页 |
3.3.4 pH6.0 和 8.0 对I-R3N脱氧核酶突变体活性影响 | 第52-53页 |
3.3.5 I-R3N脱氧核酶中活性突变体比较 | 第53-54页 |
3.3.6 A5C突变体断裂位点鉴定分析 | 第54-55页 |
3.3.7 I-R3N脱氧核酶多位点突变体与催化活性关系 | 第55-57页 |
3.4 A5G突变体性质表征 | 第57-60页 |
3.4.1 pH对A5G突变体活性影响 | 第57-58页 |
3.4.2 反应时间与A5G突变体断裂程度关系 | 第58页 |
3.4.3 Zn~(2+)浓度对A5G突变体活性影响 | 第58-59页 |
3.4.4 A5G突变体对二价金属离子选择性 | 第59-60页 |
3.4.5 金属离子对A5G突变体催化活性干扰 | 第60页 |
3.5 I-R3N脱氧核酶应用探索 | 第60-64页 |
3.5.1 Zn~(2+)浓度对I-R3N-FB脱氧核酶影响 | 第61-62页 |
3.5.2 反应时间对I-R3N-FB脱氧核酶影响 | 第62页 |
3.5.3 热变性对I-R3N-FB脱氧核酶影响 | 第62-63页 |
3.5.4 缓冲液HEPES对I-R3N-FB脱氧核酶影响 | 第63-64页 |
3.6 结论 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-71页 |
研究生期间发表的文章 | 第71-72页 |
致谢 | 第72页 |