| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 引言 | 第9-11页 |
| 1 材料 | 第11-14页 |
| 1.1 动物、细胞和药品 | 第11页 |
| 1.2 实验材料 | 第11-14页 |
| 1.2.1 主要仪器 | 第11-12页 |
| 1.2.2 主要试剂 | 第12-14页 |
| 2 实验方法 | 第14-24页 |
| 2.1 细胞培养 | 第14-16页 |
| 2.1.1 灭菌准备 | 第14页 |
| 2.1.2 试剂准备 | 第14页 |
| 2.1.3 细胞复苏 | 第14页 |
| 2.1.4 细胞换液 | 第14-15页 |
| 2.1.5 细胞传代 | 第15页 |
| 2.1.6 细胞冻存 | 第15页 |
| 2.1.7 细胞计数 | 第15-16页 |
| 2.2 造模 | 第16页 |
| 2.2.1 模型的建立与分组 | 第16页 |
| 2.2.2 模型给药 | 第16页 |
| 2.3 各组肿瘤组织称重 | 第16页 |
| 2.4 免疫组化 | 第16-17页 |
| 2.4.1 灌注固定 | 第16-17页 |
| 2.4.2 包埋、速冻、切片 | 第17页 |
| 2.4.3 抗原染色 | 第17页 |
| 2.5 肿瘤组织浸润淋巴细胞的分离 | 第17-18页 |
| 2.5.1 肿瘤单细胞悬液的制备 | 第17页 |
| 2.5.2 淋巴细胞的分离 | 第17-18页 |
| 2.6 流式细胞术 | 第18页 |
| 2.7 免疫磁珠分选Treg细胞 | 第18-19页 |
| 2.8 Treg细胞的鉴定 | 第19页 |
| 2.9 TUNEL(TdT-mediateddUTPnickendlabeling) | 第19页 |
| 2.10 Real-timePCR | 第19-21页 |
| 2.10.1 细胞裂解抽提RNA | 第19-20页 |
| 2.10.2 逆转录合成cDNA | 第20页 |
| 2.10.3 PCR扩增 | 第20-21页 |
| 2.11 免疫荧光染色 | 第21页 |
| 2.12 WesternBlot | 第21-24页 |
| 2.12.1 Treg细胞蛋白提取 | 第21页 |
| 2.12.2 BCA蛋白定量 | 第21-22页 |
| 2.12.3 配胶 | 第22页 |
| 2.12.4 电泳 | 第22页 |
| 2.12.5 转膜 | 第22-23页 |
| 2.12.6 抗体孵育及显色 | 第23-24页 |
| 3 统计分析 | 第24-25页 |
| 4 结果 | 第25-34页 |
| 4.1 西黄丸对4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤瘤重的影响 | 第25页 |
| 4.2 西黄丸对4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤微环境中Treg细胞数量的影响 | 第25-27页 |
| 4.3 4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤微环境中分选出的Treg细胞纯度鉴定 | 第27-28页 |
| 4.4 西黄丸对4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤微环境中Treg细胞凋亡的影响 | 第28-29页 |
| 4.5 西黄丸对4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤微环境中Treg细胞MEKK1、SEK1、JNK1、AP-1mRNA表达的影响 | 第29-30页 |
| 4.6 西黄丸对4T1乳腺癌荷瘤小鼠肿瘤微环境中Treg细胞MEKK1、SEK1、JNK1、AP-1蛋白表达的影响 | 第30-34页 |
| 5 讨论 | 第34-36页 |
| 结论 | 第36-37页 |
| 参考文献 | 第37-41页 |
| 综述 | 第41-50页 |
| 参考文献 | 第47-50页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51页 |
